將人的皮膚成纖維細胞直接誘導為神經(jīng)干細胞

賈偉麗，李 默，吳劍宇，王淑艷，陳志國，張 愚*

(首都醫(yī)科大學宣武醫(yī)院 1.細胞生物室； 2.教育部神經(jīng)變性病重點實驗室， 北京 100053)

研究論文

將人的皮膚成纖維細胞直接誘導為神經(jīng)干細胞

賈偉麗1,2，李 默1,2，吳劍宇1,2，王淑艷1,2，陳志國1,2，張 愚1,2*

(首都醫(yī)科大學宣武醫(yī)院 1.細胞生物室； 2.教育部神經(jīng)變性病重點實驗室， 北京 100053)

目的探討將人的皮膚成纖維細胞誘導為神經(jīng)干細胞。方法將成人的皮膚成纖維細胞用帶有Pax6報告基因和綠色熒光蛋白的慢病毒感染，并經(jīng)歷其病毒載體的抗性基因嘌呤霉素篩選后的細胞作為初始細胞，轉入在維持神經(jīng)干細胞生長發(fā)育、分化、保持功能穩(wěn)定性和可塑性中起非常重要作用的10個基因Sox2、Klf4、c-Myc、Tcf3、Ascl1、Brn2、Neurog2、Foxg1、Hes1和Id1，對經(jīng)過重新編程表達GFP綠色熒光蛋白的細胞用流式細胞儀進行篩選，并對其進行免疫熒光染色和分化的鑒定。結果轉入基因后成功誘導為神經(jīng)干細胞(iNSCs)。iNSCs能表達神經(jīng)干細胞的標志性基因(Nestin)，能分化為神經(jīng)元(β Ⅲ-tubulin)和星形膠質細胞(GFAP)。結論通過轉入外源因子的方式可以將人的皮膚成纖維細胞誘導為神經(jīng)干細胞。

誘導神經(jīng)干細胞；人的皮膚成纖維細胞；重編程；轉錄因子；報告基因

神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)是存在于胚胎或成體腦組織中的一種干細胞，可以自我更新，并分化為神經(jīng)元、星形膠質細胞、少突膠質細胞。

人源神經(jīng)干細胞 (human neural stem cells,hNSCs)主要來源于流產(chǎn)胎兒的腦組織，除來源不穩(wěn)定和供給受限制外，還面臨著將非自體的細胞進行移植所引發(fā)的免疫排斥反應。誘導多……