豬偽狂犬病毒gD蛋白的截短表達與PPA－ELISA抗體檢測方法的建立

祖立闖，沈志強，＊，郭廣君，王金良，苗立中，董 林，呂素芳

（1.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州256600；2.山東省濱州畜牧獸醫研究院，山東 濱州256600）

豬偽狂犬病（Pseudorabies，PR）是由豬偽狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起豬的一種急性、熱性傳染病，主要以發熱、腦脊髓炎、奇癢、呼吸和神經系統障礙為主要特征，臨床上表現懷孕母豬流產、死胎、弱胎、木乃伊胎；新生仔豬發熱、神經癥狀、麻痹、衰竭死亡，死亡率可達100%；成年豬多耐過而呈隱性感染，成為該病的主要傳染源［1－2］。該病在世界范圍內流行，給全球養豬業造成了巨大的經濟損失［3－5］，我國自1947年發現此病以來，現全國已有30多個省份發生流行，是嚴重危害我國養豬業的重要疫病之一［6］。該病的危害在于病毒侵入豬體后，可潛伏于三叉神經節或薦神經節造成潛伏感染，病毒的潛伏感染使病豬終身帶毒并周期性向外排毒，給疾病的防治帶來很大困難［7］。

PRV屬皰疹病毒科（Herpesvifidae）a－皰疹病毒亞科（Alpha－herpesvirinae），在生物型上屬于豬皰疹病毒I型（Suid herpesvirus－1，SHV－1）［8］。SHV－1基因大約編碼50種結構蛋白，有11種為糖蛋白，其中gD是PRV的主要結構蛋白，它不但誘導體液免疫，而且誘導細胞免疫，同時是病毒粒子表面的病毒感染細胞的主要分子，在病毒吸附和侵入宿主細胞過程中發揮重要作用，為病毒復制的必需基因，是一種重要的中和抗原，也是保護性抗體的主要目標，能誘導較好的保護反應，抵抗PRV強毒株攻擊［9－13］。因此gD被作為PRV特異性抗原研究的首選蛋白。本研究對gD基因進行了截短表達，以表達的重組蛋白為包被抗原，優化ELISA反應條件，建立了可檢測PR血清抗體的間接ELISA診斷方法，并對現地采集的豬血清進行了檢測。……