‘野釀2號(hào)’兩性花毛葡萄品種綜合育苗技術(shù)

趙明　牟海飛　呂朝安　王趣有　林茜　鄒瑜　吳代東　林貴美　韋紹龍

摘要：為解決毛葡萄利用傳統(tǒng)硬枝扦插及嫁接的繁殖方法成活率低的問(wèn)題，項(xiàng)目組通過(guò)不斷的實(shí)踐和改進(jìn)，利用組培快繁結(jié)合苗圃育苗技術(shù)形成了完整的‘野釀2號(hào)兩性花毛葡萄種苗繁育體系，本研究從組培苗培育、組培沙床假植一嫩枝沙床扦插假植一生根苗營(yíng)養(yǎng)杯假植三步假植育苗法、假植施肥、假植病蟲(chóng)害防治管理4個(gè)方面闡述了‘野釀2號(hào)兩性花毛葡萄育苗的綜合技術(shù)，利用本技術(shù)，可在短期內(nèi)大量生產(chǎn)、供應(yīng)優(yōu)質(zhì)健康種苗，提高毛葡萄生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。

關(guān)鍵詞：野釀2號(hào)；兩性花毛葡萄；育苗

中圖分類(lèi)號(hào)：S663.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

論文編號(hào)：2013-0837

0 引言

廣西具有獨(dú)特的喀斯特地貌地質(zhì)特點(diǎn)，以及典型的氣候環(huán)境，蘊(yùn)藏著豐富的野生葡萄資源。毛葡萄是其中蘊(yùn)藏量最大的一個(gè)種，主要分布于桂中、桂西、桂北等巖溶石山地區(qū)。野生毛葡萄鮮果具有出汁率高、含酸量高、含糖量低、果皮厚、單寧多、色素濃、香氣獨(dú)特等特點(diǎn)，含多種維生素、礦物質(zhì)、及豐富的氨基酸，還含有花色素雙糖苷、超氧化歧化酶（SOD）及白藜蘆醇（RES），利用野生毛葡萄漿果加工釀造出的葡萄酒，有益于預(yù)防心臟血管疾病、調(diào)節(jié)人體免疫系統(tǒng)、降低疾病發(fā)生率，深受消費(fèi)者喜愛(ài)，市場(chǎng)供不應(yīng)求。近年來(lái)，野生毛葡萄酒的認(rèn)識(shí)度以及知名度不斷提高，原料需求量也逐年增加，推動(dòng)了毛葡萄從野生轉(zhuǎn)為人工種植，廣西多地利用石山坡地建立了毛葡萄原料生產(chǎn)基地。優(yōu)良的毛葡萄品種及健康的種苗來(lái)源成為當(dāng)前人工種植亟待解決的主要問(wèn)題，項(xiàng)目組經(jīng)過(guò)多年努力成功選育出了‘野釀2號(hào)兩性花野生毛葡萄品種，該品種的選育成功使野生毛葡萄進(jìn)入了真正意義上的人工馴化栽培階段，對(duì)毛葡萄產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展意義重大，該品種白花授粉不受天氣因素影響，果實(shí)品質(zhì)佳，是穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的保證，生產(chǎn)上正逐步取代原來(lái)推廣種植的‘野釀1號(hào)單性花品種。果農(nóng)利用種子、扦插、嫁接等傳統(tǒng)的繁殖方法進(jìn)行育苗，出現(xiàn)較多問(wèn)題，主要有：種苗遺傳性狀不穩(wěn)定、雌雄性狀分離、產(chǎn)量及品質(zhì)性狀與該品種的優(yōu)良特性不一致、成活率極低不能滿足生產(chǎn)需要等。雖然進(jìn)行了組培育苗技術(shù)的相關(guān)研究，但因玻璃化以及效率、成本等問(wèn)題，仍沒(méi)能在生產(chǎn)上應(yīng)用。針對(duì)毛葡萄育苗對(duì)技術(shù)要求較高的問(wèn)題，迫切需要相關(guān)的育苗技術(shù)，為生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。項(xiàng)目組通過(guò)不斷的實(shí)踐和改進(jìn)，利用組培快繁結(jié)合苗圃育苗技術(shù)形成了一套完整的種苗繁育體系，利用該技術(shù)繁育的種苗遺傳性狀穩(wěn)定，產(chǎn)量及品質(zhì)均保持該品種的優(yōu)良特性、種苗根系發(fā)達(dá)、定植成活率高，定植后生長(zhǎng)迅速病害少，綜合育苗技術(shù)的實(shí)施受季節(jié)、氣候等外界因素的影響較小，可以在短期內(nèi)大量生產(chǎn)、供應(yīng)優(yōu)質(zhì)健康種苗?，F(xiàn)將‘野釀2號(hào)兩性花毛葡萄綜合育苗技術(shù)總結(jié)如下。

1 組培苗培育

1.1外植體處理

冬剪時(shí)，選擇‘野釀2號(hào)兩性花毛葡萄一年生成熟枝條，采回備用，枝條要求：品種絕無(wú)混雜、芽眼飽滿度高、病蟲(chóng)害未見(jiàn)發(fā)生、枝條成熟良好、髓部相對(duì)較小、枝條木質(zhì)化程度高、健康健壯的枝條。將直徑大于0.6cm的枝條，剪成帶有2-3個(gè)芽的插穗，上部離芽1cm左右平剪，下部靠芽剪成斜茬，用生根劑浸根后扦插到沙床上（扦插沙床下部是疏松紅壤，上部是約10cm厚中沙）。扦插后插條萌發(fā)長(zhǎng)出嫩芽，選擇5～10cm長(zhǎng)的嫩芽剪下，除去全部葉片，在自來(lái)水下輕輕沖洗干凈，剪成長(zhǎng)度為3cm左右的大莖段，然后進(jìn)行消毒，消毒時(shí)先用75%的酒精消毒1min，然后用0.1%的升汞液消毒5min，最后用無(wú)菌水把消毒液漂洗干凈后，剪成約0.5-1.0cm長(zhǎng)帶一個(gè)腋芽的外植體。

1.2培養(yǎng)基

基本培養(yǎng)基均為MS培養(yǎng)基，略作修改，即啟動(dòng)培養(yǎng)基：MS+BA 0.5-2.0mg/L+KT 0-1.0mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L，微型扦插培養(yǎng)基：1/2MS+BA 0.05mg/L+IAA 1.0mg/L+活性炭0.05-0.1mg/L（添加適量活性炭的培養(yǎng)基，玻璃化和愈傷組織發(fā)生率明顯降低），培養(yǎng)基均加入白糖3%、瓊脂0.4%-0.45%，pH值5.8-6.0。

1.3培養(yǎng)條件及生產(chǎn)操作

培養(yǎng)溫度：25-30℃，光照強(qiáng)度：2000-3000lx，每天光照時(shí)間：12h，培養(yǎng)容器有：250mL廣口瓶、600mL三角瓶，12×14cm²的聚丙烯塑料袋（假植移栽前階段使用）。培養(yǎng)基在溫度121℃、壓力1.1kg/cm²條件下滅菌20-25min。

按上述方法將外植體處理后，接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，當(dāng)外植體上有正常嫩芽長(zhǎng)出時(shí)，將嫩芽從外植體上切下，切成帶一個(gè)葉片（即腋芽）的單芽小莖段，扦插到無(wú)菌的微型扦插培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)40-50天培養(yǎng)，小植株長(zhǎng)出3-5條完整根系，4-6片葉，即可轉(zhuǎn)瓶，再重復(fù)上述過(guò)程進(jìn)行擴(kuò)繁操作。

1.4假植前煉苗

選擇適當(dāng)?shù)臅r(shí)間進(jìn)行煉苗，使其定植后迅速適應(yīng)露地的不良環(huán)境條件，縮短緩苗時(shí)間，能夠提高組培苗假植的成活率。毛葡萄組培生根袋苗在室內(nèi)培養(yǎng)40天，室內(nèi)光照強(qiáng)度設(shè)置為2000-3000lx，而后轉(zhuǎn)到大棚進(jìn)行煉苗，大棚用遮陽(yáng)網(wǎng)將光照強(qiáng)度調(diào)節(jié)為5000-10000lx，假植前必須進(jìn)行自然散射光煉苗7-10天，且不可時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，大棚一般要加蓋一層遮光率70%的遮光網(wǎng)，若中午氣溫高于35℃時(shí)要蓋兩層遮光網(wǎng)，保持溫度在28-32℃間為宜。煉苗后組培苗表現(xiàn)為植株韌性強(qiáng)、葉片綠、厚、硬，莖和根不易折斷，不易失水。

煉苗后將生根苗上透明的培養(yǎng)基以及可能形成的愈傷組織清理干凈，具體做法為：剪開(kāi)組培生根袋（聚丙烯塑料袋），盆內(nèi)裝入清水，把帶有培養(yǎng)基的生根苗倒入盆內(nèi)，用手輕輕地抓住組培苗莖的中下部，洗凈根上的透明培養(yǎng)基，盡可能少用手接觸小苗根部，避免傷及根部。再進(jìn)行消毒處理，方法為：放入800-1000倍的50%多菌靈溶液中浸泡5-10s或0.1%高錳酸鉀溶液浸泡3-5s，取出待種。

2 三步假植育苗法

2.1組培苗沙床假植

2.1.1苗床準(zhǔn)備 選擇通風(fēng)透光性好、接近水源、便于排水、交通方便、平整的地塊作育苗地，搭建拱架結(jié)構(gòu)育苗棚，寬度5-6m，長(zhǎng)30m左右，棚頂至地面高2.2-2.5m左右，棚緣高1.2m左右，棚內(nèi)留出一條50cm寬的操作道，育苗棚兩頭各留一道可開(kāi)關(guān)的門(mén)以便進(jìn)出，大棚應(yīng)抗風(fēng)，不積水。育苗前清除大棚內(nèi)雜草，平整棚內(nèi)地面，然后噴1次800倍75%百菌清和600倍80%敵敵畏混合液，關(guān)閉棚門(mén)悶棚7-10天，待用。

苗床要求起畦，畦面高于地面3.5-5.0cm，規(guī)格1.5m×2.5m，以體積百分比80%紅泥+20%沙搗碎拌勻后作沙培假植的基質(zhì)，將洗凈消毒的組培生根苗直接假植在苗床基質(zhì)上，假植前一天將苗床淋濕，使苗土松軟，假植時(shí)采用開(kāi)小溝的方法，株距5cm、行距10cm，注意苗不能種得太深，以根剛好全部入土為宜，以防止莖干因水分的原因而腐爛。

2.1.2光溫水調(diào)控 充足的水分是植株生長(zhǎng)的必要條件，假植成活率受水分的影響，合理的控制水分至關(guān)重要，假植后首先必須淋足定根水，大棚蓋好遮陽(yáng)網(wǎng)，棚內(nèi)溫度控制在30℃左右。畦面加蓋小拱棚保濕，以5.0cm寬、2.0m長(zhǎng)毛竹片作為拱棚的骨架，毛竹片兩頭削尖便于插入土中，每個(gè)拱棚由3-4條竹片支撐，骨架上覆蓋0.05mm厚的聚乙烯薄膜，覆膜后邊緣壓土，假植后5天內(nèi)，要經(jīng)常淋水噴霧，晴天每天淋水1-2次或噴霧3-4次，陰天2-3天淋水1次，讓植株葉片時(shí)刻保持水分，讓小拱棚內(nèi)空氣濕度保持90%以上，使葉片保持彈性而不萎蔫。假植后10天，小苗逐漸長(zhǎng)出新根，老根恢復(fù)活力，組培苗成活，逐步打開(kāi)小拱棚薄膜，使空氣濕度降低至60%-70%，假植后15-20天，不需人工控制濕度。秋、冬季節(jié)，溫度稍低，假植育苗過(guò)程需要45～60天；夏季高溫時(shí)，假植育苗過(guò)程可縮短為30-40天。假植時(shí)間應(yīng)適宜，時(shí)間過(guò)短，毛葡萄假植苗不夠強(qiáng)壯，抗逆性差，移入營(yíng)養(yǎng)杯后易感染病害（軟腐?。?dǎo)致死苗；假植時(shí)間太長(zhǎng)，毛葡萄假植苗根過(guò)長(zhǎng)，上杯時(shí)不易種植影響成活率。

毛葡萄組培苗假植前期需弱光，假植后期可逐漸轉(zhuǎn)強(qiáng)光，使苗逐漸適應(yīng)自然光。春、秋、冬季用70%的遮陽(yáng)網(wǎng)遮陰，夏季用90%的遮陽(yáng)網(wǎng)遮陰。保持最適宜生長(zhǎng)的溫度，溫度過(guò)低或過(guò)高都不利于其生長(zhǎng)，對(duì)假植成活率影響較大，冬季需采用薄膜升溫和保溫，夏季采用遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭降溫。大棚還需蓋薄膜擋雨，但要注意經(jīng)常保持棚內(nèi)空氣流通，以防霜霉病和軟腐病等病害的發(fā)生。

2.2嫩枝沙床扦插假植

2.2.1插穗采集 嫩枝扦插3-11月均可以進(jìn)行，組培苗在大棚沙床上長(zhǎng)有7-9片葉（含組培時(shí)的老葉）后即可采插穗。采穗后原小植株要保留2-3片葉，并馬上噴灑殺菌劑防腐。過(guò)15-20天后（氣溫低的季節(jié)時(shí)間長(zhǎng)些），剪過(guò)的植株又萌出2-4個(gè)新枝，即可進(jìn)行第二次剪取插穗，如此循環(huán)操作，一般在第五輪之后即停止不再修剪扦插。節(jié)間相對(duì)短的嫩枝才可作為插穗使用，不徒長(zhǎng)，無(wú)卷須，不成蔓狀，無(wú)木質(zhì)化，否則不適宜作插穗。采下的嫩枝剪成2-3個(gè)節(jié)位、帶2-3片新葉（每葉片剪去一半）的插穗，泡入清水中備用，然后扦插到沙床上。

2.2.2扦插沙床條件 沙床規(guī)格長(zhǎng)2.5m、寬1.2m，面上鋪中沙3cm左右，下部墊6-7cm厚的松土。扦插時(shí)插穗插入深度以1/3為宜，扦插后立即淋足水分，直接在插穗頂部蓋上0.1mm厚的聚乙烯薄膜（我們稱(chēng)之為面膜）保持濕度，四周密封，根據(jù)苗床墑情，每隔3天掀開(kāi)面膜淋透水一次，天氣晴朗時(shí)要注意補(bǔ)充水分，保持土壤濕度在60%-70%為宜，以免因缺水影響插條發(fā)芽及生根，但在下午16h以后不宜澆水，以免夜間濕度過(guò)大，引起插條生菌，影響成活。并及時(shí)清除苗床上的雜草。4-5天后，在面膜上開(kāi)3-4個(gè)/m²約筷子大小的小孔，7-8天后，下午16h到次日10h前揭開(kāi)面膜，白天蓋回，10天后則可全天揭開(kāi)面膜。插穗一般6-7天開(kāi)始發(fā)根，8-11天基本全部長(zhǎng)根，在溫度低的春、秋季節(jié)則要10-20天后才生根，根數(shù)以3-4條居多，粗壯的嫩枝則可長(zhǎng)5-6條根。保持最適宜生長(zhǎng)的溫度（30℃左右），冬季采用薄膜覆蓋升溫和保溫。插條生根能力受光照時(shí)間長(zhǎng)短與強(qiáng)弱的影響很大，強(qiáng)烈的光照，溫度過(guò)高、蒸發(fā)量過(guò)大，可導(dǎo)致插穗凋萎，影響成活。因此，扦插初期必須及時(shí)采用遮陽(yáng)網(wǎng)遮陽(yáng)，降低溫度、減少蒸發(fā)，新根產(chǎn)生后，插條可以自主吸收水分后，再逐漸加大光照量。

2.3沙床苗營(yíng)養(yǎng)杯假植

2.3.1營(yíng)養(yǎng)杯及基質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)杯采用無(wú)紡布材料的有底營(yíng)養(yǎng)袋，直徑為8cm，高為12cm。以紅泥50%、泥炭49%、腐熟農(nóng)家肥1%（體積百分比）搗碎混勻配制營(yíng)養(yǎng)土。營(yíng)養(yǎng)袋裝滿土后緊靠排列在苗床上，移栽前3天用1000倍50%多菌靈對(duì)營(yíng)養(yǎng)袋土進(jìn)行消毒，移栽前1天應(yīng)把營(yíng)養(yǎng)袋土澆透水，沙培苗床淋濕水。

2.3.2沙床苗營(yíng)養(yǎng)杯假植 沙培苗的規(guī)格：新生5張以上健康葉片，15cm以上株莖高度，0.5cm以上株莖粗度，葉片、主干青綠、不徒長(zhǎng)，無(wú)病蟲(chóng)害，無(wú)變異。春季是假植的最佳時(shí)間，也可在秋季進(jìn)行假植。按苗大小分開(kāi)移栽，選擇生長(zhǎng)一致的苗移栽到同一苗床，手持2cm寬竹片在營(yíng)養(yǎng)杯上挖小坑，坑深3cm，小心放入幼苗，避免幼根折傷，而后埋土，稍稍壓實(shí)，栽苗深度埋及小苗基部，不露根，栽苗后澆足定根水，蓋上遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭，早晚封閉大棚，中午高溫時(shí)段應(yīng)打開(kāi)棚門(mén)通風(fēng)透氣1～3h。

2.3.3出圃前煉苗 出圃種植前7天應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)干旱煉苗和強(qiáng)光照鍛煉。具體方法是將淋水次數(shù)和數(shù)量適當(dāng)減少，同時(shí)逐步打開(kāi)大棚的四周，使空氣自然流通，降低溫棚溫度，最后將頂上的遮陽(yáng)網(wǎng)撤去，使其適應(yīng)外界環(huán)境，可以出圃大田種植。

3 假植施肥

3.1組培沙床苗的施肥

組培袋苗相對(duì)較弱，馬上接觸肥料容易引起肥害，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致燒苗，待假植成活穩(wěn)定后，根據(jù)生長(zhǎng)情況7-10天施肥一次，淋施0.1%復(fù)合肥（15-15-15）溶液。

3.2扦插沙床苗的施肥

扦插成活后淋施0.1%復(fù)合肥（15-15-15）+0.1%磷酸二氫鉀，15天施1次，等長(zhǎng)出2-3張新葉后，淋施0.15%復(fù)合肥（15-15-15）+0.125%磷酸二氫鉀，每月施1次。

3.3營(yíng)養(yǎng)杯假植苗的施肥

假植成活后，根據(jù)幼苗的葉色、長(zhǎng)勢(shì)進(jìn)行施肥，淋施0.2%復(fù)合肥（15-15-15）+0.15%磷酸二氫鉀或0.15%硝酸鉀，每月施1-2次。

4 假植病蟲(chóng)害防治

視病蟲(chóng)發(fā)生實(shí)際情況，有針對(duì)性的選用藥劑，以防為主，綜合防治。霜霉病防治：采用200倍波爾多液噴3-4次預(yù)防，發(fā)病后采用60%雷多米爾600-800倍液或60%代森錳鋅700-800倍液噴灑；軟腐病防治：在小苗假植成活后每隔15天噴1次藥，共3-5次，可噴50%托布津可濕性粉劑500倍液、75%百菌清可濕性粉劑500-800倍液；立枯病防治：發(fā)病初期開(kāi)始施藥，施藥間隔7-10天，可用75%百菌清可濕性粉劑600倍液、或5%井崗霉素水劑1500倍液、或20%甲基立枯磷乳油1200倍液，進(jìn)行噴霧。根線蟲(chóng)防治：地蟲(chóng)靈或益舒寶拌入基質(zhì)中，若在假植后發(fā)生，則用2%地蟲(chóng)靈600-1000倍液灌根，隔天1次，連灌2次。菜青蟲(chóng)、葉蟬、地老虎危害小苗嫩葉及莖干時(shí)，可用40%樂(lè)果800倍液殺死、防止蟲(chóng)害擴(kuò)散。

5 結(jié)論與討論

廣西野生毛葡萄發(fā)展面積逐年擴(kuò)大，優(yōu)質(zhì)健康種苗的需求量隨之不斷增加，多年反復(fù)試驗(yàn)證明，生產(chǎn)上野生毛葡萄采取硬枝扦插方法進(jìn)行種苗擴(kuò)繁，成活率極低。本研究形成了完整的‘野釀2號(hào)兩性花毛葡萄綜合育苗技術(shù)體系，該技術(shù)可以被生產(chǎn)者和推廣部門(mén)直接運(yùn)用，減少育苗操作過(guò)程的時(shí)間，提高苗木成活率。本套技術(shù)的兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：降低玻璃化和愈傷組織發(fā)生率的有效方法是在培養(yǎng)基（微型扦插）中添加0.01-0.1mg/L活性炭，腋芽萌芽率可達(dá)95%以上。接種材料的基部不膨大，根系直接從基部長(zhǎng)出，組培苗質(zhì)量和成苗率明顯提高；以“組培苗沙床假植一嫩枝沙床扦插假植-生根苗營(yíng)養(yǎng)杯假植”為基礎(chǔ)的三步假植育苗法，具有成活率高、操作簡(jiǎn)便、成本低、速度快和擴(kuò)繁系數(shù)大等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)組培苗假植苗和嫩枝扦插假植苗實(shí)行多輪的嫩枝扦插，迅速擴(kuò)繁種苗數(shù)達(dá)10倍以上。