劉逢秋,管小琴,王婭蘭,蘇 晏
(重慶醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理學教研室,分子醫(yī)學與腫瘤研究中心,重慶400016)
單腺苷二磷酸核糖基化(mono-ADP-ribosylation)是由單腺苷二磷酸核糖基化轉(zhuǎn)移酶(mono-ADP-ribosyltransferases,mono-ARTs)催化的一種蛋白轉(zhuǎn)錄后修飾,其將ADP-核糖從NAD +轉(zhuǎn)移到受體蛋白特定的氨基酸位點如精氨酸、半胱氨酸殘基上。又可根據(jù)接受單腺苷二磷酸核糖基化作用的不同氨基酸種類,將其分為4 種亞型。精氨酸特異性單腺苷二磷酸核基化就是其中重要一種[1]。
MIBG 是一種去甲腎上腺素神經(jīng)遞質(zhì)胍類似物。放射性131I 標記的MIBG 在臨床上作為腫瘤靶放射藥物來診斷和治療腎上腺腫瘤。而未放射標記的MIBG 可以影響多種細胞生物學功能。目前研究發(fā)現(xiàn)MIBG 能夠特異性抑制精氨酸特異性單腺苷二磷酸核糖基化的功能。因MIBG 其化學結(jié)構與精氨酸特異性單腺苷二磷酸核糖基化轉(zhuǎn)移酶催化的底物結(jié)構類似,從而可以競爭性抑制精氨酸特異性單腺苷二磷酸核糖基化作用[2]。通過加入MIBG 能引起細胞膜到細胞核的一系列信號的傳導的改變最終可抑制平滑肌細胞增殖和遷移[3]。
本實驗通過使用MIBG 抑制精氨酸特異性單腺苷二磷酸核糖基化作用,進一步探究其對肝癌HepG2 細胞增殖的影響。
新生小牛血清(四季青公司);RPMI-1640 培養(yǎng)基、胰蛋白酶(HyClone 公司);PMSF,PIPA 裂解液(Beyotime);MIBG(Sigma 公司);ART1 多克隆抗體(SANTA 公司與Sigma 公司);兔抗山羊IgG/FITC標記抗體(中衫金橋);RhoA,c-myc 多克隆抗體(武漢山鷹公司);cyclin A1 多克隆抗體(博士德生物);辣根過氧化物酶標記羊抗兔IgG(北京博奧森);BCA 試劑盒(碧云天公司)。……