microRNA-1誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化過程中Notch信號(hào)分子的表達(dá)變化

鄧海燕，曾俊義，魏云峰,，王夢(mèng)洪,，鄭澤琪,，張 婉，文 通

(南昌大學(xué) 第一附屬醫(yī)院 1.心血管內(nèi)科； 2.江西省高血壓病研究所， 江西 南昌 330006)

研究論文

microRNA-1誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化過程中Notch信號(hào)分子的表達(dá)變化

鄧海燕1，曾俊義2*，魏云峰1,2，王夢(mèng)洪1,2，鄭澤琪1,2，張 婉2，文 通1

(南昌大學(xué) 第一附屬醫(yī)院 1.心血管內(nèi)科； 2.江西省高血壓病研究所， 江西 南昌 330006)

目的探討微小RNA-1對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響及分化過程中Notch信號(hào)分子的表達(dá)變化。方法全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠MSCs并進(jìn)行流式細(xì)胞學(xué)鑒定，miR-1慢病毒載體感染大鼠MSCs(MSCsmiR-1)按培養(yǎng)時(shí)間將細(xì)胞分成4組：對(duì)照組、培養(yǎng)4、6和15 d組；光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化，qPCR檢測(cè)miR-1及心肌細(xì)胞特異性基因GATA-4、cTnI、α-actin表達(dá)，免疫熒光檢測(cè)cTnI表達(dá)，Western blot檢測(cè)α-actin表達(dá)；qPCR檢測(cè)Notch信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)變化。結(jié)果原代大鼠MSCs呈長(zhǎng)梭形、漩渦狀生長(zhǎng)，98%以上細(xì)胞表達(dá)CD44和CD29，不足1%的細(xì)胞表達(dá)CD45。MSCsmiR-1中miR-1表達(dá)水平持續(xù)上升，同時(shí)伴隨心肌特異性基因GATA-4、cTnI和α-actin的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，感染4 d后可見cTnI在部分MSCsmiR-1中表達(dá)，同時(shí)可檢測(cè)到α-actin在MSCsmiR-1中表達(dá)；MSCsmiR-1向心肌樣細(xì)胞分化過程中，Notch信號(hào)分子Jagged1、Notch1、Notch3和Hey2表達(dá)水平逐漸下調(diào)，于15 d時(shí)下調(diào)幅度最大。結(jié)論傳導(dǎo)miR-1至大鼠MSCs中可促使其向心肌樣細(xì)胞的分化；且分化過程中伴隨著Notch信號(hào)分子Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2表達(dá)水平下調(diào)。

miR-1；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；心肌樣細(xì)胞；Notch

微小RNA(microRNAs,miRNAs)作為生命過程中一類重要的調(diào)控因子成為近年來的一大研究熱點(diǎn)。研究表明， miRNAs在一系列生物學(xué)行為比如干細(xì)胞增殖、干細(xì)胞分化中起著非常重要的作用[1]。……