李 望,高維強
(上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院干細胞研究中心,上海200127)
干細胞的生長和分化、成熟與周圍的微環境有關[1]。可能的機制是,干細胞在特定的微環境中受到周圍細胞信號的影響,從而對新的微環境中的調節信號做出反應。例如神經干細胞在神經系統內幾乎不增殖,只有當神經出現損傷時,才有可能被激活[2]。有研究表明[3],心臟干細胞平時也不具有增殖能力,只有在特定的時候才會增殖分化。人的間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是多潛能的細胞[4]。許多研究報道,這類細胞能夠分化成不同類型的細胞,例如可以分化成中胚層的組織包括骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱和脂肪[5]。近年來人的臍帶間充質干細胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)成為研究的熱點。由于hUCMSCs 具有組織樣本容易獲得、非侵入性的采集過程、并且采集臍帶沒有倫理道德上的爭議,人們認為hUC-MSCs 是比較原始的細胞且干性更強,比其他組織的MSCs 免疫排斥性低,并且具有更強的可塑性和擴增能力等優點[6]。本研究的目的是想探索hUCMSCs 在體外特定的組織細胞微環境中是否能夠被定向誘導分化成為前列腺上皮細胞。
PE 偶聯的CD105、FITC 偶聯的CD29、APC 偶聯的CD31、Per-Cy5.5 偶聯的CD45 和PE-Cy7 偶聯的CD34(eBioscience 公司);P63、AR、CK8、PSA 及vimentin 抗體(Santa Cruz 公司);睪酮、膠原蛋白酶IV 和胰蛋白酶(Sigma 公司);isopore 膜(Millipore 公司);膠原蛋白(collagen 膠)(BD 公司)。
泌尿生殖竇間質細胞的分離過程根據以往的研究報道[7]。從懷孕18 d 的SD 大鼠身上取出胚胎,處死并取下胚胎的泌尿生殖竇。把泌尿生殖竇間質與上……