完善食品微生物學檢驗工作的建議

【摘要】 本文結合食品微生物檢驗檢測的特點，以及在基層疾控中心從事食品微生物檢驗的工作經驗，探尋目前食品微生物檢驗檢測工作的現狀及其存在的問題，提出對完善食品微生物檢驗檢測工作的建議。

【關鍵詞】 食品微生物學檢驗；完善；建議

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.710 文章編號：1004-7484（2012）-08-2992-01

食品微生物檢驗工作是評價食品衛生質量，保證消費者飲食安全必不可少的手段，所以本文從人員、設施環境、設備及檢驗物資的管理與配制六個等方面闡述了影響食品微生物檢驗的關鍵因素，完善食品微生物檢驗工作，使其更加高效、快捷地對食品微生物進行檢測，出具公正、準確、可靠的數據。

1 人員

檢驗人員應經過一定時期的正規化、專業化的培訓，具備必須的的理論知識、實踐操作能力。單位應對新參加檢驗工作的同志，進行專業知識培訓經考試合格后方能持證上崗，同時要確保實驗室人員得到及時培訓不斷更新知識，學習和掌握新標準、新理論、新技術和新方法。

2 設施、環境

2.1 實驗室的設施建設 實驗室的設施建設微生物實驗室的建設應以生物安全為核心，應符合《生物安全實驗室建筑技術規范》的要求，確保實驗室人員的安全和實驗室周圍環境的安全。同時實驗室應具有進行微生物檢驗適宜充分的設施條件，包括檢測設施及輔助設施，特殊的設備要在特殊的環境下放置和操作。按照不同檢驗類別要求設置實驗室，實驗室內要合理布局，清潔區與污染區劃分明確要有明顯標識。

2.2 環境條件的檢測 實驗時實驗室溫度應控制在18-26℃，相對濕度控制在30%-70%，每次使用進行檢測記錄。無菌室應在每次實驗前后進行消毒處理，其消毒效果每月檢測一次，結果可參照GB15981-1995《醫院消毒衛生標準》的效果標準要求進行評價。具體消毒方法與檢測如下：

2.2.1 紫外線消毒 在室溫下，220V30W紫外燈下方垂直位置lm處的253.7nm紫外線輻射強度應≥70μW/cm2，低于此值時應更換，設置適當數量的紫外燈，確保平均每立方米應不少于1.5W。紫外線消毒時無菌室內應保證清潔干燥，應在無人條件下進行，作用時間不少于30min。

2.2.2 無菌室空氣消毒效果檢驗方法（自然沉降法） 一般情況下無菌室面積≤30m2時，設一條對角線上選取3點，即中心l點、兩端各距墻1米處各取一點；無菌室面積>30m2時選取東、南、西、北、中5點，其中東、南、西、北點均距墻lm。在所選位點，將9cm直徑普通營養瓊脂平板距地面80厘米處開蓋暴露l5min后送檢。

2.2.3 無菌室工作臺面消毒效果檢驗方法（涂抹法） 一般情況下采集工作臺面100cm2，用5×5cm2滅菌規格板，放在臺面上，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返涂抹5次，并隨之轉動拭子，連續采樣4個規格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml滅菌生理鹽水的試管中送檢。

3 設備及檢驗物資管理與配制

3.1 根據檢驗項目的要求正確配備儀器設備，并按質量管理體系要求對購置、驗收、運轉情況進行控制，按儀器設備的檢定狀態分類加貼紅、黃、綠三色狀態標識以防誤用。對所有影響檢驗結果的儀器設備均應建立儀器設備檔案，定期檢定，做好期間核查。

3.1.1 恒溫培養箱、恒溫水浴箱、干熱滅菌箱、冰箱等首次安裝時要對溫度的穩定性和一致性進行校準。記錄培養箱、水浴鍋和干熱滅菌箱的溫度穩定性達到平衡所需的時間。

3.1.2 高壓蒸汽滅菌器 新購買的高壓蒸汽滅菌器的時間和溫度指示的準確度應滿足要求，同時進行消毒效果檢測，檢測合格后方可使用，并且定期進行監測。

3.1.3 生物安全柜 在基層疾控機構實驗室中使用生物安全柜基本是Ⅱ級安全柜，初安裝需由廠家專業技術人員進行培訓及性能測試，使用過程中廠家專業技術人員應定期對高效過濾器進行檢漏或更換，對風速或風量、溫濕度、含塵濃度、噪聲、照度等方面進行檢測，以保證檢測人員、周圍環境、檢測樣本的安全性，防止交叉污染，同時做好消毒、使用、維護、維修等記錄。

3.2 檢驗物資的管理與配制

3.2.1 培養基大多為半成品，按說明配制分裝后進行滅菌，培養基通常采用高壓蒸汽滅菌法不同的培養基進行滅菌的壓力和時間均有不同的要求，部分培養基無需高壓蒸汽滅菌只能煮沸滅菌。滅菌后應置于冰箱內保存，使用前應置培養箱內做無菌試驗。

3.2.2 診斷血清來源必須可靠，在有效期內使用和保存，使用時嚴格按無菌操作要求，避免造成血清的二次污染。

3.2.3 標準菌株必須來自權威機構或具有資質證明的機構，專人管理存放地點和設施應采取措施，非管理人員無法隨意獲取。為防止多次傳代后菌株發生變異，購買時盡量購買多孔小瓷珠保存的菌株，每次使用取一個進行復蘇，剩下的繼續放冰箱中保存以備下次使用。

4 樣品的采集、運輸和保存

要獲得準確、可靠的檢驗結果，首先必須采集符合要求的微生物樣品，根據檢測標準、檢測方法和檢測目的選擇和確定相應的采樣工具、運送容器、采樣方法、采樣部位、采樣時機和采樣量。樣品的采集必須具有代表性，要考慮到各種可能影響樣品質量的因素，防止因樣品受到外源性污染或者保存不當樣品變質和細菌生長，導致檢測結果失去意義。

5 操作

操作人員必須牢固樹立無菌觀念，整個操作過程均要求無菌操作，例如操作時盡量靠近火焰動作要迅速；樣品管口火焰滅菌、接種環每次使用前后均需火焰滅菌等。進入無菌室從樣品的制備到檢驗都要采取必要措施防止二次污染，取樣加樣前樣品、培養皿、試管、三角瓶等擺放整齊便于操作，操作前要在心中演練一遍，包括一支吸管用幾次加幾回樣。原始記錄要真實準確，能夠復述整個實驗過程，要按照GB4789標準規定的方法進行數據處理及結果判定。

6 檢測方法的選擇

根據檢測目的條件優先選用國家GB4789系列標準，并根據實驗條件、人員、設備選擇哪一法，優先選用第一法。目前新的國家標準《食品安全國家標準食品微生物學檢驗》不斷發布，應及時購買新的國家標準檢驗方法，新方法要及時進行學習，使用前必須經確認批準后方能實施。

過去食品微生物檢驗工作職能一般是由政府和企業檢驗組成，社會中介力量不足，現在私營檢驗機構逐漸出現，對我們基層疾控機構起到很大的促進作用。雖然活躍了檢驗市場，但是不可避免的帶來一些問題，這就需要采取政府部門監管、行業自律以及社會中介力量三種監督相結合的方式，加強食品微生物檢驗的公正性。為使微生物檢測數據更加科學、可靠和準確，每一個實驗室必須建立完善的質量管理體系，對實驗室與檢測活動相關的所有因素進行有效的質量控制，同時在日常工作中我們要遵守職業道德，要有嚴謹科學態度才能使微生物檢驗數據的準確性得以保證，為食品安全提供可靠技術保障。

參考文獻

[1] 齊小秋.病原微生物檢驗.衛生部病原微生物檢驗教材編寫組，2009，02.

[2] 李志勇，謝均憲，許龍巖.食品微生物檢驗的質量控制[J].檢驗檢疫科學，2004，14（4）.

[3] 李勁峰，李文，梁炯明，等.淺析疾控系統微生物檢驗質量控制[J].中國衛生檢驗雜志，2010，20（12）：434-435.