HPLC法測(cè)定麥杞西洋參飲料中人參皂苷Rb1的含量

【摘要】 目的 建立此種麥杞西洋參飲料中人參皂苷Rb1的含量測(cè)定方法。方法 HPLC法。流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸（28：72：0.1）。檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫40℃。結(jié)果 人參皂苷Rb1含量在0.4695-2.3476mg/ml之間呈良好線性，平均回收率為98.0%，RSD=1.7%（n=5）。結(jié)論 方法可靠，簡(jiǎn)單可行，為控制麥杞西洋參飲料的內(nèi)在質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 麥杞西洋參飲料：西洋參；人參皂苷Rb1；HPLC法

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.547 文章編號(hào)：1004-7484（2012）-08-2852-01

麥杞西洋參飲料以西洋參為主要原料，經(jīng)過科學(xué)工藝制成，具有緩解體力疲勞的保健功能。為更好地控制其內(nèi)在質(zhì)量，確保其質(zhì)量穩(wěn)定可靠，我們以HPLC法測(cè)定了本品中的主要有效成分西洋參中人參皂苷Rb1的含量，為控制其質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀：安捷倫1200高效液相色譜儀；天平：分析天平十萬(wàn)分之一XS-205；人參皂苷Rb1對(duì)照品：中國(guó)藥品生物制品檢定所；麥杞西洋參飲料樣品：吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司。所用試劑甲醇、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為重蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：安捷倫C18；流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸（28：72：0.1）；檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm；柱溫：40℃；流速：1ml/min；進(jìn)樣量：10ul；理論板數(shù)：理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算不應(yīng)低于1800。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品25mg，置于25ml量瓶中，加50%甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻，作對(duì)照品液（每1ml中含人參皂苷Rb11mg）。

2.3 供試品溶液的制備 精密量取本品50ml，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至12，用水飽和正丁醇溶液振搖提取3次，每次25ml，合并提取液，置水浴上蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶解至5ml量瓶中并稀釋至刻度，作為供試品溶液。

2.4 陰性對(duì)照溶液的制備 按處方組成，取出西洋參外的其余藥，按制備工藝要求，制成不含西洋參的陰性對(duì)照樣品，再按供試品溶液的制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.5 空白試驗(yàn) 按上述條件，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液，陰性對(duì)照品溶液適量，分別注入液相色譜儀測(cè)定，結(jié)果其它成分對(duì)人參皂苷Rb1的測(cè)定無(wú)干擾，符合測(cè)定要求，詳細(xì)結(jié)果，見下圖：

2.6 線性關(guān)系考察 精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品0.05869g，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作對(duì)照品溶液（每1ml中含人參皂苷Rb12mg）。從對(duì)照品溶液中精密吸取溶液2、4、5、6、8ml，分別置10ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液及對(duì)照品溶液各10ul，注入液相色譜分析儀分析，以峰面積為縱坐標(biāo)，以人參皂苷Rb1濃度為橫坐標(biāo)，得回歸方程為：A=2011.7C-3.0445，r=0.9999（n=6），結(jié)果表明：人參皂苷Rb1對(duì)照品在所試濃度0.4695-2.3476mg/ml范圍內(nèi)具良好的線性關(guān)系，詳細(xì)結(jié)果，見表1。

2.7 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)行精密度試驗(yàn)，其 =2577.68，RSD=0.3875%（n=6）。結(jié)果表明儀器具有良好的精密度，詳細(xì)結(jié)果，見表2。

2.8 穩(wěn)定性考察 精密吸取同一樣品，照2.3方法制備測(cè)定，考察0、2、4、6、8小時(shí)時(shí)峰面積的變化，結(jié)果8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好，其 =2349.23，RSD=0.5838%（n=5），詳細(xì)結(jié)果，見表3。

2.9 重現(xiàn)性考察 精密吸取同一批樣品6份，照2.3方法制備，獨(dú)立試驗(yàn)，結(jié)果平均含量為11.7mg/100ml，其RSD=1.3378%（n=6）。表明重現(xiàn)性良好，詳細(xì)結(jié)果，見表4。

2.10 回收率試驗(yàn) 取已知含量（11.7mg/100ml）樣品5份，分別精密量取25ml，分別精密加入人參皂苷Rb1對(duì)照品溶液（0.1224mg/ml）25ml，按供試品溶液的制備方法制成檢測(cè)溶液，并依法測(cè)定，詳細(xì)結(jié)果，見表5。其平均回收率為98.02%，RSD=1.7207%（n=5）。

3 討論

本研究采用高效液相色譜法，選用人參皂苷Rb1為標(biāo)示性成分，對(duì)麥杞西洋參飲料中西洋參的有效成分之一人參皂苷Rb1進(jìn)行含量測(cè)定。并分別對(duì)線性關(guān)系，精密度，穩(wěn)定性，重現(xiàn)性和回收率進(jìn)行了考察。試驗(yàn)結(jié)果表明所建立的方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確、可行，能有效地控制麥杞西洋參飲料的內(nèi)在質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

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