酒精對雄性大鼠性激素、精漿果糖、精漿鋅的影響

楊向峰 徐計秀 梁廷宇

在中華民族的歷史長河中，酒及酒文化一直占據著重要地位，素有無酒不成席之說。過度飲酒對身體的危害很大，特別是對男性不育方面。從遺傳學角度分析，酒精對人體生殖細胞的損傷，是導致出生缺陷的重要原因之一[1-2]。有關男性生殖的狀況和研究是近十多年來男性學研究的熱門話題。研究表明，人類的生殖功能正逐漸退化，在過去五十年內，人類精液質量下降了近一半，將來不育癥的發生率可能高于目前文獻報道的12%～15%，甚至達到30%以上[3]。通過動物實驗研究過度飲酒對男性不育癥的機制，對男性不育癥的防治有著重要的意義。

1 資料與方法

1.1 實驗動物及分組處理 選擇8周齡實驗用健康成年雄性SD大鼠40只，體重(210±20)g，由山西醫科大學實驗動物中心提供。將雄性大鼠隨機分成四組，每組10只。對照組(酒精0.0 g/kg)、低量組(酒精2.7 g/kg)、中量組(酒精4.5 g/kg)、高量組(酒精7.5 g/kg)。各酒精處理組均用無水酒精加入不同量蒸餾水灌胃，灌胃量為1.5 ml/l00 g，對照組給予等量蒸餾水，1次/d，連續13周。于末次染毒24 h后采用頸椎脫臼法處死，經下腔靜脈采血并分離血清，置-20 ℃冰箱凍存，待測血清中睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)含量；取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒溫箱中液化，5000 r/min離心30 min，分離出精漿于-70 ℃冰箱凍存，待測精漿中果糖含量、精漿中鋅含量。

1.2 觀察指標及方法

1.2.1 血清性激素測定 13周后，分別經下腔靜脈采血并分離血清，置-20 ℃冰箱凍存待測。采用放免法檢測血清中睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)含量。

1.2.2 精漿果糖、鋅測定 13周后，分別剖取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒溫箱中液化，5000 r/min離心30 min，分離出精漿于-70 ℃冰箱凍存待測。采用紫外法檢測精漿中果糖含量，采用比色法檢測精漿中鋅含量。

1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計軟件進行分析。計量資料以()表示，多組間的均數比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)；方差齊性時采用Dunnett法，若方差不齊，采用Tamhane’s T2進行校正兩兩比較，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 酒精對性激素(T、FSH、LH)的影響 各酒精處理組大鼠血清T、FSH、LH含量均明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表1。

表1 酒精對血清T、FSH、LH的影響()

表1 酒精對血清T、FSH、LH的影響()

*P<0.05，△P<0.01，與對照組相比

組別 T(nmol/L) FSH(mIU/L) LH(mIU/L)對照組(n=10) 12.952±2.89 1.395±0.19 1.539±0.31酒精2.7 g/kg組(n=10) 8.598±2.19△ 0.716±0.14△ 1.213±0.26*酒精4.5 g/kg組(n=10) 6.321±2.77△ 0.582±0.31△ 1.098±0.20△酒精7.5 g/kg組(n=10) 3.005±2.21△ 0.421±0.47△ 0.821±0.11△

2.2 酒精對精漿生化(果糖、鋅)的影響 各酒精處理組大鼠精漿果糖、鋅的含量均明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表2。

表2 酒精對精漿果糖、鋅的測定結果()

表2 酒精對精漿果糖、鋅的測定結果()

*P<0.05，△P<0.01，與對照組相比

組別 果糖(mg/dl) 鋅(μg/ml)對照組(n=10) 0.133±0.021 0.019±0.003酒精2.7 g/kg組(n=10) 0.058±0.025△ 0.016±0.003*酒精4.5 g/kg組(n=10) 0.033±0.013△ 0.011±0.002△酒精 7.5 g/kg組(n=10) 0.029±0.010△ 0.006±0.003△

3 討論

性腺軸功能的調節是人類生殖生理活動的關鍵，任何一個環節異常都可能導致男性不育。睪丸是精子發生和雄激素合成的重要器官。睪酮主要由睪丸的Leydig間質細胞分泌，后者是黃體生成素(LH)作用的靶細胞，黃體生成素是控制睪酮產生的主要刺激激素。雄性激素睪酮(T)是維持精子發生和成熟的必要條件，睪酮的分泌不足可影響精子的發生和成熟，造成生殖能力的下降。劉長云等[4]研究了乙醇可以直接作用于睪丸間質細胞，使間質細胞合成和分泌T的能力下降，從而使血中T濃度降低。Shi等[5]的觀點是，乙醇對下丘腦、垂體及睪丸均存在毒性作用。正是乙醇的這種毒性作用影響了下丘腦-垂體-性腺軸的調節作用，致使血LH、FSH濃度降低[6]。El-Sokkary 等[7]用體視學方法觀察長期給予乙醇的雄性大鼠的睪丸組織，曲細精管直徑明顯縮小，各級生精細胞數目減少，并可見退化變性的生精細胞。Martinez等[8]給予大鼠含乙醇的液體飲食，亦有類似報道。可以看出，酒精在體內經血-睪屏障進入睪丸組織，損害生殖器官，還可經血-腦屏障進入腦組織，代謝產生的自由基直接損害下丘腦和垂體，對下丘腦-垂體-性激素內分泌軸造成損害，影響促性腺激素的分泌，影響支持細胞的內分泌功能[9-10]。

隨著生物化學技術手段不斷發展，精漿生化檢測在男性不育診斷中起著越來越重要的作用。精囊腺分泌的果糖是供精子利用的主要能源物質。前列腺分泌的鋅能促進生殖器官發育，維持正常生精功能，提高精子密度和活力[11]。Dieudonne等[12]報道，精漿果糖可作為男性不育癥研究中一項篩查指標。精漿果糖為精子直接利用，其濃度與精子運動及受精能力呈正相關。當精漿果糖濃度低于正常時，不能提供精子能源，影響精子運動，以致不易受孕[13]。精漿果糖的檢測有助于了解不育患者精囊腺的功能狀態以及不育癥的病因診斷，對判斷男性生育力具有重要意義。

鋅是人體重要的微量元素，鋅含量的測定也反映前列腺的功能。精漿鋅對男性生殖功能有非常重要的作用，通過影響下丘腦-垂體-睪丸軸的功能，進而影響性腺的發育及睪丸的生精功能[14]；鋅是維持精子染色質穩定性的重要物質，可以清除由白細胞和有缺陷精子產生的氧自由基，減少氧自由基對精子的毒性[15]，鋅直接參與精子生成、成熟、激活和獲能過程，對精子活力、代謝及其穩定性都具有重要作用。Chia等[16]報道，精漿鋅濃度與精子密度、活力和活率呈正相關。Ali等[17]報道，雄激素水平低下的少或無精子癥患者精漿鋅水平顯著下降，認為精漿鋅缺乏是不育患者睪丸功能低下的原因之一。提示鋅在精子發生過程中起重要作用，鋅的缺乏可能導致精子發生異常或停滯。

酒精是乙醇的俗稱，乙醇是親脂性的小分子物質，過量飲用后，迅速吸收進入體內的乙醇超過了肝臟的氧化代謝能力而蓄積，乙醇的代謝產物乙醛能與各種蛋白質結合，形成乙醛-蛋白質毒物，此毒物可以抑制蛋白質合成，干擾細胞膜中類脂和蛋白結構，引起細胞功能障礙。

Christeff報道，長期飲酒的人可導致細胞及機體免疫力異常，這可能是飲酒對睪丸功能產生影響的原因之一[18]。在本研究中，飲酒大鼠血清激素的含量，如LH、FSH及T都較正常對照組降低。本研究結果表明，各酒精組血清T水平均明顯低于對照組，說明酒精可以抑制睪丸間質細胞合成睪酮，這與有關報道一致[19-20]，從而提示酒精所致的睪丸損傷的另一特征是抑制睪丸類固醇合成。本研究顯示，各酒精處理組大鼠血清LH均明顯低于對照組，高劑量組血清FSH水平也明顯低于對照組。酒精抑制睪丸間質細胞合成T，使血清T水平下降，隨即因長反饋機制，下丘腦、垂體促使LH分泌增多來彌補間質細胞功能受損，但隨著酒精暴露時間的延長，這種“中樞性補償”發生缺陷。從而引發下丘腦-垂體軸的損傷。另有研究表明，酒精可以使下丘腦LHRH mRNA表達上調，還使垂體雄激素受體數目減少，這說明除睪酮反饋機制外，酒精可以直接作用于下丘腦或垂體來干擾下丘腦-垂體-性腺軸的功能，從而進一步影響睪丸的結構和功能。

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