電針公孫和內關穴對胃潰瘍大鼠血清SOD及胃竇前壁粘膜影響的實驗研究*

馬杭琨，李天嬌，崔良慧，王朝陽

(北京中醫藥大學，北京100029)

胃潰瘍是胃粘膜的侵襲因素超過防御因素和修復能力的結果。正常生命體在代謝過程中會產生氧自由基，加之一些外界因素也能促使氧自由基的濃度升高，而這些氧自由基若不能及時清除，就會引起生物膜的過氧化損傷。正常胃黏膜上含有大量的巰基，而氧自由基可以作用于胃黏膜上的巰基使其蛋白質變性、酶失活，從而引起了胃粘膜損傷。有研究人員在研究中藥治療胃潰瘍時發現，中藥可從神經內分泌免疫網絡基礎上對胃潰瘍產生治療作用，通過調節腦及胃內自主神經的神經內分泌免疫功能，從而對機體進行整體調節，改善胃潰瘍癥狀，針灸的治療作用也相類似。筆者通過觀察胃潰瘍大鼠血清SOD及胃竇前壁粘膜的病理變化，來探討電針公孫和內關穴是否對胃潰瘍有治療作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康Wistar大鼠50只(購自維通利華實驗動物技術有限公司)，體重(220±30)g，雄性。

1.2 實驗動物分組 隨機選4只大鼠進行預實驗，之后在46只大鼠中，隨機選10只大鼠作為空白對照組，剩下的大鼠進行造模，造模后將存活的30只老鼠分為3組，每組10只，分為模型對照組、藥物對照組和電針治療組。

1.3 動物模型制作 大鼠實驗前禁食不禁水24 h，灌胃無水乙醇1 ml/只。于造模后，電針治療組針刺公孫和內關穴，應用持續脈沖電流，頻率2 Hz，強度2 mA;藥物對照組灌胃谷氨酰胺0.1 g/kg;模型對照組在相同時間抓取外不作處理。

1.4 觀察方法

1.4.1 表現觀察 觀察大鼠的毛色、食欲、活動等狀況。

1.4.2 病理切片觀察 于治療后，處死大鼠，分離鼠胃，以彎眼科剪插入幽門斷端，沿大彎側剪開鼠胃，觀察大鼠胃竇情況。之后剪取包括潰瘍部分的胃竇組織約0.5×1.0 cm的組織塊，置于4%甲醛液內固定24 h后，常規脫水，沿縱軸方向石蠟包埋，5 μm厚切片，HE染色，光鏡觀察。

1.4.3 血清SOD活性觀察 于治療后心臟取血，離心取血清，用SOD試劑盒(購自南京建成)檢測SOD。

1.4.4 數據的統計學處理 統計資料以均數±標準差(xˉ±s)表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 表現觀察 大鼠造模后，出現被毛乍起、蓬松，不欲飲食，活動減少，倦臥嗜睡。前4天上述癥狀最為明顯，隨后逐漸緩解，被毛光澤有所恢復，飲食和活動稍好于前幾日。空白對照組大鼠健康如初，未見明顯異常。

2.2 病理切片觀察 空白對照組大鼠胃竇壁結構基本完整，未見明顯的炎性細胞浸潤。見圖1。

圖1 空白對照組

模型對照組大鼠胃竇壁結構破壞。表面組織壞死，其下可見肉芽組織，并有炎性細胞浸潤，潰瘍周圍粘膜腺體間質有充血、水腫。肌層和漿膜被破壞，近漿膜面見有瘢痕組織。見圖2。

圖2 模型對照組

藥物對照組大鼠潰瘍處胃竇壁結構基本恢復，胃竇壁具有一定厚度，壞死組織已基本消失，潰瘍周圍粘膜腺體間質充血、水腫情況減輕，粘膜下層可見肉芽組織，小血管壁較厚，有少量炎性細胞浸潤。但未見肌層，漿膜面新生結締組織疏松。見圖3。

針灸治療組大鼠胃竇壁結構完整，胃竇壁較厚，未見壞死組織，粘膜腺體完整，無充血水腫。可見極少量中性粒細胞，漿膜結構完整。見圖4。

2.3 血清SOD活性統計結果 見表1。實驗結果顯示，空白對照組和模型對照組兩組比較，其SOD活性有顯著差異(P＜0.01);藥物對照組和針灸治療組兩組比較，其SOD活性沒有顯著差異(P＞0.05)。藥物對照組和針灸治療組分別與模型對照組比較，其SOD

活性有明顯差異(P＜0.05);而藥物對照組和針灸治療組分別與空白對照組比較，其SOD活性沒有明顯差異(P＞0.05)。實驗結果提示針灸治療組和藥物治療組效果相當，都可以提高血清SOD活性，使之接近正常，對治療胃潰瘍有明顯效果。

表1 各組對血清SOD活性的影響(±s)

表1 各組對血清SOD活性的影響(±s)

注:與空白對照組比較，*P＜0.01，▲P＞0.05;與模型對照組比較，#P＜0.05;與藥物對照組比較，△P＞0.05。

活性空白對照組組別 樣本個數 血清SOD 10 69.93 ±3.60模型對照組 10 39.78 ±3.21*藥物對照組 10 52.38 ±2.09#▲針灸治療組 10 60.57 ±5.80#△▲

3 討論

胃粘膜在面臨損害，如胃粘膜缺血、各種應激反應、化學物質作用時，機體可產生大量的氧自由基，氧自由基與胃粘膜中的不飽和脂肪酸結合，造成脂質過氧化損害。胃黏膜中含有較高濃度的巰基，氧自由基導致胃黏膜損傷的機制就是作用于巰基使其蛋白質變性、酶失活。超氧歧化酶(SOD)能有效地清除氧自由基從而抑制胃粘膜中的脂質過氧化反應，使細胞膜的化學性質變得穩定[1]。機體內SOD活性可反映機體抗氧化反應的能力。本實驗研究也證實，SOD活性與胃潰瘍損傷指數呈相關性，因此認為超氧歧化物活性的降低是導致胃粘膜損傷的重要原因之一。

中藥對實驗性胃潰瘍的作用主要從減弱胃潰瘍的攻擊因子、增強胃黏膜防御因子、改善中樞神經功能和增強胃動力幾方面考慮。有研究者從對神經內分泌免疫網絡對中醫藥治療胃潰瘍進行研究，認為某些中藥可調節腦及胃內自主神經分泌的紊亂，改善胃潰瘍癥狀。針灸的治療作用也類似，有實驗發現針灸還能刺激胃黏膜細胞增殖[1]。

明代劉純的《醫經小學》中最早記載了“公孫沖脈胃心胸”，現代研究顯示，電針公孫、內關穴可能通過神經傳導對胃起到調節作用。內關、公孫兩穴配伍電針后，兩穴的陽性標記運動神經元樹突野延伸至Ⅶ、Ⅵ、Ⅴ板層，并特異性地與中間外側核、中間內側核聯系。因此推測內關、公孫穴與胃等內臟之間可能存在著內關、公孫穴→軀體傳入神經→第Ⅸ板層→第Ⅶ、Ⅵ、Ⅴ板層、中間外側核、中間內側核→孤束核→交感神經、副交感神經→胃等內臟的調節關系[2]。在治療胃潰瘍疾病時常以胃經的足三里為主穴，配合公孫和內關穴使用。現代研究表明，電針足三里與內關、公孫穴不同配伍能提高胃黏膜EGF含量，促進NO的合成與釋放，起到對胃黏膜的保護作用。內關、公孫與足三里穴單獨配伍沒有明顯地增效作用，而兩穴合用時可有明顯增效作用[3]。且有關研究顯示，針刺對提高胃組織總SOD的活性、降低胃組織MDA的含量有一定的作用，尤其在針刺后3 h時段其修復作用較明顯[4]。

本實驗研究顯示，模型對照組與空白對照組相比大鼠血清SOD活性明顯降低(P＜0.01)，大鼠抗氧化反應能力降低。而在通過藥物治療和電針公孫、內關穴進行干預后，大鼠血清SOD活性與模型對照組相比有顯著提高(P＜0.05)，并與空白對照組血清SOD活性值相近(P＞0.05)，且電針治療組大鼠血清SOD活性略高于藥物治療組。結果提示電針公孫和內關穴不僅可從神經傳導路徑對胃起到調節作用，還能通過有效提高血清SOD活性，使其接近正常大鼠血清SOD活性，從而提高大鼠抗氧化反應能力，促進大鼠胃粘膜的愈合，發揮抗潰瘍作用。

[1]潘凱.中醫藥治療實驗性胃潰瘍進展[J].浙江中西醫結合雜志，2009，19(1):57 －59

[2]林鋟武，陳以國，蔡定芳.內關、公孫配伍相關性的神經解剖學研究[J].上海針灸雜志，1999，18(6):25 －28

[3]王靈，彭楚湘，周國平，等.電針足三里與內關公孫不同配伍對胃黏膜損傷大鼠NO EGF的影響[J].中醫藥學刊，2006，24(11):2051－2052

[4]孫阿娟，袁英，謝元華，等.電針足三里對酸化乙醇致大鼠胃黏膜損傷胃組織總SOD、MDA影響的時效關系研究[J].上海針灸雜志，2005，24(1):39 －41