開展厭氧菌學勢在必行

厭氧菌是人體皮膚、口腔、胃腸道等部位的正常菌群。當患者免疫功能低下時，常引起感染要、甚至導致敗血癥。厭氧細菌學是研究微觀生態(tài)平衡、失調和調整的重要部分，在消化道菌群中，99.9%以上為厭氧菌，組成了重要的膜菌群，在生物拮抗、營養(yǎng)、免疫等方面具有不可估量的生理意義。

開展厭氧菌培養(yǎng)的必要性

厭氧菌是一大群在無氧環(huán)境下生長的細菌。厭氧菌種類繁多近十年來，無芽胞厭氧桿菌及菌球是細菌性感染的重要原因之一。人體的各個組織和器官對厭氧菌都是敏感的，在一定的條件下都能發(fā)生厭氧菌感染。當機體全身免疫功能低下或人體微生態(tài)平衡失調的情況下，可發(fā)生厭氧菌內源性感染，人體外屏障遭到破壞也可發(fā)生外源性感染。臨床細菌感染，特別是深部感染，其中厭氧菌感染約50%～60%，不做厭氧培養(yǎng)幾乎漏掉50%病原菌。很多厭氧菌對臨床常用的抗菌藥物耐藥。不分離出厭氧菌，很難擬定正確的治療措施延誤治療。當深部膿腫、敗血癥等常規(guī)細菌學核查陰性時，往往源于厭氧菌感染。厭氧菌感染是一種內源性感染，病種遍及臨床各科，人體的各個部位、各種器官均可發(fā)生厭氧菌感染。報道在菌血癥中的10%可檢出厭氧菌，在牙源性口面部感染病例中有94%，在吸入性肺炎及肺膿腫時有93%，在婦產科各種感染性疾病中有100%，直腸周圍膿腫的77%可檢出厭氧菌，而且有相當一部份病例是單一的厭氧菌感染^［1，2］。

厭氧菌感染在診斷和治療上的特殊性：檢出厭氧菌須具備必要的條件，如有特殊的厭氧培養(yǎng)系列同，包括特殊采樣方式、培養(yǎng)基、鑒定試劑及設備等。一旦確診厭氧菌感染，在治療上也有其特殊性。

臨床常用的氨基糖苷類抗生素、磺胺類藥物對厭氧菌無效。脆弱類桿菌由于產生β內酰胺酶可對青霉素，頭孢菌素類β內酰胺抗生素耐藥。為了有效控制臨床感染性疾病，首先必須明確感染源是需氧菌還是厭氧菌，因此臨床細菌室有必要把厭氧菌培養(yǎng)作為常規(guī)細菌檢驗。

厭氧菌培養(yǎng)的可行性

臨床醫(yī)生要認識到厭氧菌在感染性疾病的重要性，能認真采樣和送檢，并能識別厭氧菌感染的重要特征，如感染局部產生氣體分泌物有惡臭，帶血或呈色感染部位在肛門、口腔、鼻竇、咽等黏膜周圍，有菌血癥表現(xiàn)，但細菌培養(yǎng)陰性，長期使用氨基糖苷類抗生素無效者。

臨床醫(yī)生一般希望通過細菌檢驗報告盡證實有無厭氧菌感染，而不是某一種菌。因此，檢驗科應加強厭氧菌的分離，再根據(jù)條件建立簡易鑒定流程或復雜流程；或以涂片方式報告，如革蘭陽性球菌和、厭氧桿菌、革蘭陰性厭氧球菌、厭氧桿菌。有條件的還可以在耐氧試驗陽性的菌株中進一步鑒定，以確定菌種類型。

厭氧菌培養(yǎng)分離、鑒定、試劑的商品化，減輕了我們準備試劑的負擔。如價廉、簡易的厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、厭氧盒；可靠的厭氧鑒定系統(tǒng)如API、VITEK及其他細菌鑒定系統(tǒng)均具有厭氧鑒定功能。自動化血培養(yǎng)分析系統(tǒng)均有厭氧血培養(yǎng)瓶、便、血、胸腹水等無菌體液的厭氧菌培養(yǎng)。

美國臨床實驗室標準化委員會已推薦出可作為厭氧藥敏試驗的方法，如濃度梯度（Etest）法、瓊脂稀釋法。當用常規(guī)厭氧菌藥物治療無效時，可做藥敏試驗，用于糾正原有的方案。

厭氧菌學研究進展及展望

厭氧菌檢測方法學進展，用胞外酶原理設計的鑒定系統(tǒng)，不需要在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。厭氧氣體發(fā)生劑的改進，不需要在發(fā)生袋中加水，不需要觸酶，大大簡化了操作步驟。全自動細菌鑒定系統(tǒng)的問世，為厭氧菌鑒定創(chuàng)造了更為便利和快捷的條件。

分子生物學技術介入?yún)捬蹙鷮W的研究和檢測，大大縮短了報告的時間。對厭氧菌的鑒定由一般表型特征的鑒定深化為遺傳性特征的鑒定。目前聚合酶鏈反應技術已應用到臨床，直接從標本中檢測厭氧致病菌，應用擴增16S校蛋白DNA限制性分析法鑒定放線菌。

在研究厭氧菌的耐藥機理方面，已發(fā)現(xiàn)革蘭陰性厭氧菌，如脆弱類桿菌，卟啉單胞菌的孔狀分子結構與其耐藥性有關，并在真核細菌和彎曲菌屬中有結構類似的孔狀分子結構，位于細菌外膜，并了解到這種結構與細菌膜滲透性下降導致耐藥有關^［3］。

展望：雖然實驗科學的快速發(fā)展推動了厭氧菌的研究，但與臨床需要相比還有很大的差距，如厭氧菌分離需要時間過長（48～72小時），費用高，開展不普及。今后的任務首先要從入手，分子生物學方法要著眼于臨床需要，建立正確便捷的檢測方法，使每一個細菌室都能開展厭氧菌培養(yǎng)。此外，在基礎理論方面，要深入研究厭氧菌感染的病因，致病因素和免疫機理，從而有效地預防和治療厭氧菌感染。

參考文獻

1 張秀珍，主編.當代細菌檢驗與臨床.北京:人民衛(wèi)生出版社，1999:234-248.

2 馬紀平，許淑珍.我國厭氧菌檢驗現(xiàn)狀及改進措施.中華醫(yī)學檢驗雜志，1999，22:9-11.

3 汪冰，黃安華.非同位素標記脆弱擬桿菌DNA探針的研究.中華傳染病雜志，1997，15:9-11.