腎結核患者分枝桿菌培養診斷價值的分析

作者單位：650301 昆明市第三人民醫院結核病院

通訊作者：李瓊秀

【摘要】 目的 分析BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統和羅氏培養法在腎結核患者尿液分枝桿菌培養中的診斷價值。方法 收集昆明結核病防治院2007年9月～2010年8月期間256例門診和住院的腎結核患者尿液標本，用BacT/ALERT3D和羅氏培養這兩種方法進行結核分枝桿菌培養，分析兩種培養方法對腎結核的診斷價值。結果 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統陽性率為43%，羅氏培養法陽性率為25.4%，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統的陽性率明顯高于羅氏培養法，結果所需時間短于羅氏培養法，但是培養費用高于羅氏培養法。結論 通過結核分枝桿菌培養兩種方法的比較，對選擇腎結核的檢查方法有一定意義。

【關鍵詞】 腎結核； 分枝桿菌培養； BacT/ALERT3D

腎結核病是由于結核菌侵犯了人體的腎臟組織而導致的疾病，腎結核起病隱匿，不易發覺，導致腎結核病很難在發病早期得到及時的確診，患者尿液結核分枝桿菌培養可以確診腎結核，使疾病在早期得到治療，傳統的羅氏培養法和BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養兩種方法都能幫助診斷腎結核，為了解兩種方法的臨床應用價值，特對兩種方法進行比較，以對選擇檢查方法有所幫助。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本來源：系2007年9月～2010年8月期間筆者所在醫院門診和住院腎結核患者的尿液標本，共計256份。BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養142例，其中男87例，女55例，年齡19～56歲，平均37歲；羅氏培養114例，其中男68例，女46例，年齡23～55歲，平均35歲。同時收集其相關臨床資料。

1.1.2 試劑與儀器 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養儀和與其配套的MB/Bact培養瓶、MAS抗生素添加劑。

1.2 方法

1.2.1 標本處理 留取全量夜尿，靜置4～5 h后，棄上清液，取沉淀部分10 ml，經3000 r/min離心30 min，取沉淀進行堿處理［與等倍量4%氫氧化鈉（NaOH）混合，處理15 min］后接種。

1.2.2 標本接種 （1）BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統:加10 ml reconstituein flud至抗生素MSA中使其溶解，然后加0.5 ml溶解的MAS到MB/BacT培養瓶中，用注射器取0.5 ml標本加入該培養瓶中，經掃描培養瓶條碼后放入BacT/ALERT3D儀內自動檢測。（2）羅氏培養法:取標本0.1 ml均勻接種在整個培養基斜面上，每份標本接種2支培養基。接種后斜面向上于37 ℃環境中平放24 h后，檢查培養基污染情況，擰緊瓶蓋，直立放置，37 ℃繼續培養。羅氏培養法結果判斷參照臨床技術操作規范-結核病分冊^［1］。

1.3 統計學分析 采用χ²檢驗。

2 結果

2.1 兩種檢測方法的結果 在腎結核活動期，較易檢出結核菌，256份標本用兩種方法檢測，結果BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統的陽性率為43%，羅氏培養法陽性率為25.4%，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統的陽性率明顯高于羅氏培養法（P＜0.01）。見表1。

表1 兩種檢測方法的結果（n，%）

注：χ²8.51，P＜0.01

2.2 兩種檢測方法的時間和費用 BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統細菌生長報告陽性時間平均為12.8 d；羅氏培養法細菌生長報告陽性時間平均為20.2 d。BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統的收費標準為70元，羅氏培養法的收費標準為30元。見表2。

表2 兩種檢測方法的時間和費用

3 討論

結核病是當今全球范圍對人類最具威脅性的感染性疾病之一，是單病因所致的感染性疾病中死亡率最高的疾病。中國是全球結核病的重災區，結核病的發病總人數居全球第二。由于不規范的抗結核治療導致耐藥結核分枝桿菌，尤其是耐多藥結核?。∕DR-TB）的產生與傳播是造成全球結核病嚴峻形勢的主要原因之一^［2］。2006年以來，廣泛耐藥結核?。╔DR-TB）的出現使得結核病的防控更加棘手^［3，4］，腎結核病的檢測周期長，羅氏培養法得到結果的時間晚于BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養。羅氏培養法的陽性率也明顯低于BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養。腎結核的診斷方法較少，BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養診斷腎結核就顯得尤為重要和珍貴。

BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統原理：此系統用一個比色計傳感器和反射光監測溶解于培養基內的CO₂的存在和生成。如果檢測標本中有結核分枝桿菌存在，則生物代謝培養基中的底物產生CO₂。位于每個培養瓶底部的透氣傳感器的顏色就會由藍綠色變為黃色。即使輕微的顏色改變亦導致系統監測的反射率增加，瓶底的反射率每10分鐘由儀器監測并記錄一次，在報告陽性時，大概每毫升的細菌濃度為10⁶～10⁷。

BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養檢測系統自動化程度高、陽性率高、污染率低、檢測時間短等優勢，然而BacT/ALERT3D全自動微生物快速培養儀需要進口，與其配套的培養基也需要進口，價格昂貴，成本明顯高于羅氏培養法。

參 考 文 獻

［1］ 中華醫學會.臨床技術操作規范-結核病分冊.第1版.北京：人民軍醫出版社，2004，3:32.

［2］ 劉家云，徐修禮，孫惠平，等.耐藥結核分枝桿菌基因突變分析.中華檢驗醫學雜志，2010，33：594-598.

［3］ Banerjee R，Schecter GF，Flood J，et al. Extensively drug-resistant tuberculosis:new strains，new challenges. Expert Rev Anti Infect Ther，2008，6:713-724.

［4］ Gandhi NR，Moll A，Sturm AW，et al. Extensively drug-resistant tuberculosis as a cause of death in patients co-infected with tuberculosis and HIV in a rural area of South Africa. Lancet，2006，368:1554-1556.

（收稿日期：2011-03-07）

（本文編輯：陳丹云）