精子頂體酶活性與精液常規檢查參數關系分析

作者單位：400020 重慶市人口和計劃生育科學技術研究院附屬醫院

通訊作者：陳可

【摘要】 目的 通過比較精子頂體酶正常組和異常組精液常規檢測參數差異，明確頂體酶活性在評估男性生育能力中的重要意義。方法 從316例男性不育癥患者的精液中選取36例頂體酶活性正常標本和36例頂體酶活性異常標本，分別作為頂體酶活性正常組和頂體酶活性異常組。所有精液標本均進行精子活率、A+B級精子活力、精子密度、精子畸形率、精子頭部畸形率測定，運用相關統計學方法分析。結果 頂體酶正常組精子活率、A+B級精子活力、精子密度均顯著高于異常組，精子畸形率和精子頭部畸形率均顯著低于異常組，且精子頂體酶活性與精子活率、A+B級精子活力、精子密度呈顯著正相關與精子畸形率和精子頭部畸形率呈顯著負相關。結論 精子頂體酶活性可以代表精子質量，精液常規檢測參數可能是精子頂體酶活性的影響因素，可作為臨床評估男性生育能力的重要指標。

【關鍵詞】 精子頂體酶； 精子活率； A+B級精子活力； 精子密度； 精子畸形率； 精子頭部畸形率

Analysis of relationship between sperm acrosin activity and index of routine testing of semen CHEN Ke，BAO Hua-qiong，DING Jie，CAI Min.The Affiliated Hospital of Population and Family Planning Science and Technology Research Institute in Chongqing. Chongqing 400020，China

【Abstract 】 Objective To clarify the value of sperm acrosin activity in evaluating male fertility through comparing the routine testing of semen between sperm acrosin normal group and abnormal group.Methods According to sperm acrosin activity， collected 36 cases of semen with normal sperm acrosin activity and 36 cases of semen with abnormal sperm acrosin activity from 316 cases with sterility，then we detected and analyzed survival rate of sperm， sperm motility（A+B）， density of sperm， rate of teratosperm， rate of spermhead deformity.Results Survival rate of sperm， sperm motility（A+B）， density of sperm of sperm acrosin normal group were higher than that of abnormal group， rate of teratosperm and rate of spermhead deformity of normal group were lower than that of abnormal group.Sperm acrosin activity and survival rate of sperm， sperm motility（A+B）， density of sperm were positively correlated， but was negatively correlated with rate of teratosperm， rate of spermhead deformity.Conclusion Sperm acrosin activity can represent the quality of sperm and can be important indicator for evaluating male fertility in clinic.

【Key words】 Sperm acrosin； Survival rate of sperm; Sperm motility （A+B）; Density of sperm; Rate of teratosperm; Rate of spermhead deformity

精液常規分析都被作為評價男性生育能力的主要指標，但是精子的數量與活動能力并不能完全反映精子的受精能力^［1］，而精子頂體酶活性的測定，在判定精子受精能力方面比傳統的精子數量和運動能力更具客觀性，并且證實并支持了總頂體酶與受精率之間存在正相關的觀點^［2］。本文通過比較精子頂體酶正常組和異常組在精液常規的差異，明確了精子頂體酶與精液常規指標之間的關系，確認了頂體酶在評估男性生育能力上的重要意義，現闡述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集316例男性不育癥患者的精液，根據筆者所在醫院對標本中精子頂體酶活性的檢測，將其分為頂體酶正常組和頂體酶異常組，每組均隨機選取36份樣本進行精液常規檢測。所有不育男性均于2009年7月～2010年8月在筆者所在醫院確診，年齡24～46歲，無性功能障礙病史，體檢未發現有明顯睪丸、附睪及輸精管異常，無外傷及遺傳性疾病家族史，且排除女方不能生育可能。

1.2 方法

1.2.1 精液標本收集及檢查 禁欲2～7 d后手淫取精液于干燥專用采集杯盛裝，置37 ℃水浴箱內液化，按照WHO精液分析標準方法對精液進行處理。

1.2.2 精子動態分析 采用計算機輔助精子分析系統（CASA），檢查結果參照世界衛生組織精液分析標準。

1.2.3 精子形態分析 采用改良巴氏染色法進行染色，采用人工修正方法對精子進行形態分析。為了提高閱片的準確性，同一片由2位專業檢驗人員分析精子形態。

1.2.4 頂體酶活性測定 按照深圳華康生物醫學工程有限公司頂體酶試劑盒的檢查方法進行。

精子頂體酶檢測步驟：（1）新鮮精液液化后，充分顛倒混勻后計數以（M×10⁶/ml）；（2）每份標本同時設測定管和空白管，每管參加反應的精子數為7.5×10⁶個。根據標本精子濃度（M×10⁶/ml），計算每管所需精液量vml（計算方法：v7.5/M）。以容量為1.5 ml的Eppendorf管作為測定管和對照管。將精液充分顛倒混勻后，分別于測定管、對照管各加精液vml，2000 g離心20 min；（3）傾倒棄去精漿，將Eppendorf管倒扣于吸水紙上，吸去流至管口部精漿；（4）測定；（5）結果計算：在24 ℃，水解1.0 μmolBAPNA/min的底物量定義為1 IU頂體酶活性。

頂體酶活性（μIU/10⁶）（測定管OD值-空白管OD值）×2×10⁶/（495×7.5）

判斷標準：＜48.2 μIU/10⁶精子（正常值48.2～218.7 μIU/10⁶精子）。

1.3 試劑與儀器 （1）采用改良Kennedy法檢測精子頂體酶活性，定量試劑盒來自深圳華康生物醫學工程有限公司；（2）主要儀器752紫外-可見分光光度計，低速自動平衡離心機，24 ℃電熱恒溫孵育箱，精密移液器，0.5 cm厚度玻璃比色皿，Eppendorf管（每支1.5 ml），CASAS-QH-Ⅲ精液分析儀，0LYMPUCX-41。

1.4 統計學方法 采用SPSS軟件包進行統計分析，采用t檢驗和卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 精子頂體酶正常組和異常組精液常規比較 通過分析發現精子頂體酶正常組精子活率、A+B級精子活力、精子密度均顯著高于異常組（P＜0.05），精子畸形率和精子頭部畸形率均顯著低于異常組（P＜0.05），見表1。

表1 頂體酶正常組和異常組精液常規指標對比

2.2 精子頂體酶與精液各常規指標相關性分析 運用統計學分析方法，發現精子頂體酶活性還與精子活率、A+B級精子活力、精子密度呈顯著正相關，與精子畸形率和精子頭部畸形率呈顯著負相關，見表2。

表2 精子頂體酶活性與精液各指標相關性

3 討論

近年來，不孕不育發生率在逐年增加。據WHO統計預測，不孕不育將成為僅次于腫瘤和心腦血管疾病的第三大疾病^［3］。以往精子活率、A+B級精子活力、精子密度、精子畸形率、精子頭部畸形率作為常規的男性生育能力檢測被廣泛應用于臨床，但由于檢查者主觀性的存在，使得其不能完全反映男性生育能力。精子頂體酶是以一種胰蛋白酶原形式合成并儲存在頂體內，發生頂體反應時，頂體酶原釋放并活化，為精卵結合提供條件，頂體酶活性低下會影響卵丘的分解及對透明帶的穿透，故頂體酶活性是判斷精子生育力很有價值的一項指標^［4］，具有較強的客觀準確性。

本文通過比較精子頂體酶正常組和異常組在精液常規檢測方面的差異，以明確頂體酶活性與精子活率、A+B級精子活力、精子密度、精子畸形率、精子頭部畸形率之間的關系，分析精子頂體酶活性的可能影響因素。結果發現頂體酶正常組精子活率、A+B級精子活力、精子密度均顯著高于異常組（P＜0.05），精子畸形率和精子頭部畸形率顯著低于異常組（P＜0.05），且精子頂體酶活性與精子活率、A+B級精子活力、精子密度呈顯著正相關，與精子畸形率和精子頭部畸形率呈顯著負相關。這提示男性精子活率、A+B級精子活力、精子密度可能為頂體酶活性的促進因素，而精子畸形率和精子頭部畸形率可能為頂體酶活性的抑制因素，但它們對精子頂體酶活性的影響需要進一步實驗研究來確認。

一般認為，精子活率越高、A+B級精子活力越大、精子密度越大，男性的生育能力越強，相反則越弱。而精子畸形率越高，精子頭部畸形率越高，男性的生育能力也就越差。本文中的實驗結果與之相符，頂體酶活性正常組的精子活率、A+B級精子活力、精子密度顯著高于異常組，而精子畸形率和精子頭部畸形率顯著低于異常組。由于精子頂體酶能夠間接反映出精子在常規檢測方面的質量，故提示精子的頂體酶活性能夠很好地作為男性生育能力的評價指標，這與陳伊等^［5］的研究結果相一致。此外，精子頂體酶活性與精子活率、A+B級精子活力、精子密度呈正相關，與精子畸形率和精子頭部畸形率呈負相關的結果還與歐陽冰清等^［6］研究結果相一致。

總之，本文通過分析精子頂體酶正常組和異常組在精液常規檢測方面的差異，明確了常規檢測參數與頂體酶活性的相關性，探討了精子頂體酶的可能影響因素，為頂體酶活性作為評價男性生育能力指標提供了重要依據，具有一定的臨床參考意義。

參 考 文 獻

［1］ 陳國武.不育癥病人精子功能試驗的應用與評估.生殖與避孕，1995，15（5）：323.

［2］ Sharma R，Hogg J，Bmmharn DR，et al.Is spermatozoan acrosin a predictor of fertilization and embryo quality in the human.Fertilsteril，1993，60（5）：881-887.

［3］ 程可佳，劉強，黎杰運.橘核丸治療少弱精子癥臨床機理探討.中國臨床實用醫學，2007，1（5）：27-31.

［4］ Howes L，Jones R.Interactions between zona pellueida glycoproteins and sperm proacrosin/acrosin during fertilization.J Reprod Immunol，2002，53（122）：181-192.

［5］ 陳伊，羅明.精子頂體酶活性與男性不育.實驗與檢驗醫學，2008，11（5）：532-533.

［6］ 歐陽冰清，曹云霞，趙濟華，等.頂體酶活性與精子質量的關系.安徽醫藥，2007，11（6）：528-529.

（收稿日期：2011-03-04）

（本文編輯：陳丹云）