HPLC法測定苦參中苦參堿的含量

北京同仁堂科技發展股份有限公司（100079）王春燕

苦參為豆科植物苦參Sophora flavescens Ait. 的干燥根。功效為清熱燥濕，殺蟲，利尿。用于熱痢，便血，黃疸尿閉，赤白帶下，陰腫陰癢，濕疹，濕瘡，皮膚瘙癢，疥癬麻風；外治滴蟲性陰道炎。筆者建立了高效液相色譜法測定苦參中苦參堿的含量，現報告如下：

附表1 線性關系考察

附表2 精密度試驗

表3 重復性試驗

1 儀器與試藥

儀器 Angilent 1100 高效液相色譜儀；色譜柱Angilent ZORBAX Eclips Plus C18（4.6×250mm，5um）；薄層板：青島海洋化工廠；苦參堿對照品：110805-200306由中國藥品生物制品檢定所提供；樣品：外購；試劑：配制標準溶液及供試品溶液的試劑均為分析純，液相色譜用試劑為色譜級試劑，液相用水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜分析條件 流動相：四氫呋喃—0.3%十二烷基硫酸鈉（用磷酸將pH調值調至3.0）（21：79）。流速：1.0ml/min。柱溫：20℃。檢測波長：210nm。進樣量：對照品5ul，樣品5ul。層析柱的理論板數：以苦參堿峰計算應不低于5000。

2.2 供試品溶液的制備 取本品粉末0.3g，精密稱定，置100ml 磨口三角瓶中，加入乙醇20ml，濃氨水0.5ml，密塞，超聲提取（功率250W，頻率40Hz）20分鐘，提取液用濾紙過濾，藥渣和濾紙用乙醇洗滌3 次，每次5ml，合并濾液，于75℃水浴中回收溶劑，殘渣用流動相定容至10ml量瓶中，搖勻。經0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液備用。

附圖1 苦參堿的標準曲線

2.3 標準曲線的制備 精密稱取苦參堿對照品18.9mg，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取苦參堿對照品溶液（0.756mg/ml）0.25，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，分別吸取對照品溶液10ul注入液相色譜儀，測得峰面積，結果見附表1。以對照品進樣量（ug）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線（見附圖1），結果表明苦參堿在0.0756～0.756ug范圍內呈良好的線性關系。……