瘦素受體 3057位基因多態性與 2型糖尿病及血脂的關系

陳利榮, 賈艷梅 (山西醫科大學汾陽學院教務處, 汾陽 0300; 山西醫科大學汾陽學院醫學檢驗系; 通訊作者,E-mail:clr98@63.com)

瘦素(leptin)是肥胖基因編碼的一種脂源性激素,瘦素受體(leptin receptor,LR)是 leptin的高親和力受體,是脂肪細胞分泌的具有保持機體能量平衡的激素,它們結合后方能發揮調節能量代謝和體脂平衡的作用。LR基因又被稱為糖尿病基因[1],于1995年被定位克隆[2]。人類 LR基因位于 1p31,長約 5.1 kb,含 20個外顯子,19個內含子,編碼 1 165個氨基酸[3,4]。目前已在其 20個外顯子中發現了19種基因多態性,但關于該基因變異與人類糖尿病等的關系報道不一[5,6]。本實驗選擇 LR基因外顯子 20,檢測 +3057位核苷酸 G→A多態性,探討該變異與 2型糖尿病及血脂的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本研究以 130例山西省呂梁地區漢族人為研究對象,其中 DM組 68例(男 35例,女33例),年齡 36-70歲,根據 1999年 WHO糖尿病診斷標準,均為醫院就診者,排除家族性高脂血癥患者;正常對照組 62例(男 29例,女 33例),年齡32-64歲。均為門診健康體檢者,無其他疾病。DM組與正常對照組在性別和年齡上均無顯著差異。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床檢測 ①空腹血糖:采用美國臺欣血糖儀測定。②血脂的測定:總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)采用酶法測定;高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)采用直接測定法;低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)采用免疫透射比濁法。以上指標均在同一臺日本 OLYMPUSAU640全自動生化分析儀進行。

1.2.2 基因組 DNA的提取 用常規酚/氯仿法提取外周血基因組 DNA,應用 751 GD紫外可見分光光度計檢測基因組 DNA的濃度和純度。

1.2.3 目的 DNA片段的 PCR擴增 PCR反應體系為 25μl,其引物……