SAMP8鼠背海馬 synaptotagm inⅣ的年齡效應(yīng)與分布

王龍海, 陳貴海, 楊啟綱, 張 瓊 (安徽中醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室, 合肥 30038; 安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科)

突觸結(jié)合蛋白 synaptotagmin(Syt)屬于突觸前囊泡蛋白,是涉及神經(jīng)遞質(zhì)釋放過程和腦的學(xué)習(xí)記憶等生理功能的關(guān)鍵蛋白之一[1]。該蛋白家族在嚙齒類和人類中已經(jīng)發(fā)現(xiàn) 16種亞型[2],其中在腦組織內(nèi)表達(dá)的 Syt有 SytⅠ -Ⅶ、Ⅸ -Ⅺ、Ⅷ。由于 Syt不同亞型在組織分布、與二價(jià)金屬離子的結(jié)合、鈣離子誘導(dǎo)的與磷脂及 t-SNARE結(jié)合的動(dòng)力學(xué)等方面有所不同,所以 Syt不同亞型在生物學(xué)功能上也存在差異[3-5]。目前有資料表明,基因突變小鼠腦內(nèi)海馬 SytⅣ的水平與腦衰老的進(jìn)程以及年齡相關(guān)的學(xué)習(xí)記憶功能等相關(guān)[6],但正常衰老的小鼠海馬內(nèi)SytⅣ的水平如何變化,以及 SytⅣ在 SAMP8鼠海馬亞區(qū)的分布狀況均未見報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 本實(shí)驗(yàn)小鼠為 SAMP8鼠,購自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(普通級(jí)),常規(guī)條件下喂養(yǎng)。SAMP8鼠分為 3個(gè)年齡組:①青年組:4.5月齡,22只;②中年組:9月齡,23只;③老年組:13月齡,19只。在實(shí)驗(yàn)開始前對(duì)小鼠進(jìn)行篩選,有運(yùn)動(dòng)障礙、白內(nèi)障、脫毛及體表可見明顯腫塊的小鼠被排除。所有小鼠接受標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類食物,自由飲水。實(shí)驗(yàn)開始前 4周,將小鼠飼養(yǎng)于檢測室里,每天接觸一次(拎尾、撫摸)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,動(dòng)物可得到足夠的食物和水。

1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑 一抗為兔抗小鼠 SytⅣ蛋白單克隆抗體,購于美國 Sigma公司。二抗為 SP超敏試劑盒(SP-9001,生物素標(biāo)記羊抗兔/小鼠 IgG),購于北京中杉金橋生物科技有限公司。DAB顯色試劑盒也為北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。……