S100A8/A9預測膿毒癥相關肝損傷的臨床價值

膿毒癥（sepsis）是由感染導致的宿主反應失調綜合征，可引起多臟器損傷，是重癥監護病房（inten-sivecareunit，ICU）死亡率較高的疾病。肝臟是膿毒癥最易受累的器官之一，膿毒癥相關肝損傷（sepsisrelatedliverinjury，SRLI）是指由膿毒癥直接或間接引起的肝損傷，甚至肝衰竭。炎癥反應、氧化應激、凝血功能障礙、細菌移位、線粒體功能障礙參與SR-LI的發生和發展。早期發現SRLI并予以及時干預可提高患者生存率。S100A8/A9是一種鈣結合蛋白復合物，主要存在于中性粒細胞和單核細胞中]，占中性粒細胞胞漿蛋白的 45%^[4] ，在感染時分泌，通過觸發細胞因子的釋放和中性粒細胞的募集介導炎癥反應的發生與發展5。S100A8/A9在膿毒癥患者中高表達，其水平與炎癥反應及患者預后相關。本研究選取我院重癥醫學科2020年8月一2023年9月收治的膿毒癥患者113例，探討血清S100A8/A9水平對SRLI的預測價值。

1資料與方法

1.1一般資料膿毒癥患者113例，病因包括肺部感染48例，腹腔感染46例，泌尿系感染10例，皮膚或軟組織感染9例，其中發生血流感染46例。113例膿毒癥患者分為肝損傷組48例與非肝損傷組65例。膿毒癥相關肝損傷診斷標準：（1）血清總膽紅素（totalbilirubin，TBil） ；（2）國際標準化比值（international normalized ratio，INR） gt;1.5 ：（3）血清丙氨酸氨基轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）高于正常值上限2倍。至少具備以上兩項條件?；颊呷朐汉?24h 內完成序貫器官衰竭評分（sequential organfailureassessment，SOFA）及急性生理和慢性健康狀況評分（acute physiology and chronic health evalua-tion，APACHE-II）。納入標準：（1）符合《第三版膿毒癥與感染性休克定義國際共識》關于膿毒癥診斷標準；（2）年齡 gt;18 歲；（3）住院時間超過 24h ；（4）臨床資料完整。排除標準：（1）慢性肝炎、肝硬化、惡性肝腫瘤、藥物性肝損傷、酒精性肝損傷、慢性肝功能障礙急性發作；（2）梗阻性黃疸。本研究已獲得南通大學附屬南通第三醫院醫學科研與臨床試驗倫理委員會批準（倫理號：EK2020106）。

1.2血清S100A8/A9檢測入院 24h 內采集患者外周靜脈血 4mL ，凝固后離心取血清，置于 -80^°C 凍存。采用酶聯免疫吸附法（enzyme-linked im-munosorbent assay，ELISA）檢測 S100A8/A9 水平，嚴格遵循試劑盒（上海江萊生物有限公司）說明書步驟進行操作。

1.3統計學處理應用SPSS26.0統計學軟件分析數據，GraphPadPrism8.0作圖。正態分布的計量資料以 表示，組間比較采用獨立樣本 χ_t 檢驗或方差分析。非正態分布的計量資料以 [M（Q₁，Q₃） 表示，組間比較采用Mann-Whitney U 檢驗。計數資料以n（%） 表示，組間比較采用 χ² 檢驗。采用Spearman系數進行相關性分析，多因素Logistic回歸分析膿毒癥患者發生肝損傷的危險因素，繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計算曲線下面積（areaundercurve，AUC），分析血清S100A8/A9對膿毒癥相關肝損傷的預測價值。 Plt; 0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組患者臨床特征比較肝損傷組與非肝損傷組在性別、APACHE-Ⅱ評分、并發膿毒癥休克和應用機械通氣方面比較，差異均無統計學意義（ Pgt; 0.05）。相較于非肝損傷組，肝損傷組患者年齡較低，SOFA評分較高，肺部感染較少，血流感染較多，差異均有統計學意義（ Plt;0.05 ）。見表1。

2.2兩組血清S100A8/A9水平及生化指標比較肝損傷組血清S100A8/A9、INR、TBil、天冬氨酸轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）及ALT水平高于非肝損傷組，差異均具有統計學意義（ Plt;0.05 ）。見表2。

2.3膿毒癥患者血清S100A8/A9水平與肝功能相關性分析Spearman 相關性分析發現，膿毒癥患者血清中S100A8/A9水平與ALT ^（r=0.323，Plt;0.001） ）

2.4影響膿毒癥肝損傷的多因素Logistic回歸分析將單因素分析中差異有統計學意義的年齡、肺部感染、血流感染、SOFA評分、S100A8/A9、ALT、AST、TBil、INR等均納入多因素Logistic回歸分析，經共線性檢驗方差膨脹系數均 lt;5 ，指標間無多重共線性。結果顯示，血清S100A8/A9、ALT及TBil指標升高是影響SRLI發生的危險因素 Plt;0.05， 。見表3。

2.5血清S100A8/A9單獨及聯合ALT、TBil檢測對膿毒癥肝損傷的預測價值ROC曲線分析顯示，血清S100A8/A9預測SRLI的AUC為0.758，取截斷值87.199ng/mL 時，敏感度為0.708，特異度為0.723，與ALT、TBil聯合檢測的AUC為0.992；敏感度為0.958，特異度為0.969，優于單一指標的診斷價值。見表4及圖2。

3討論

SRLI是膿毒癥常見的并發癥，也是ICU內膿毒癥患者死亡的高危因素。目前SRLI尚無統一診斷標準，尤其是早期發現膿毒癥肝損傷的診斷標準。在膿毒癥中中性粒細胞和單核細胞是免疫系統抵御人侵生物體的第一道防線。中性粒細胞激活后產生促炎及抗炎介質，包括細胞因子、趨化因子和損傷相關分子模式（danger-associated molecular patterns，DAMPs）等，DAMPs與細胞因子的相互作用會引發持續的免疫激活，從而導致膿毒癥多器官功能障礙發生率和致死率增加[]。

S100A8/A9是重要的炎癥介質，具有促炎細胞因子功能，在機體受到刺激后作為一種DAMPs發揮作用[4]。它與細胞表面的模式識別受體（pattermrecognitionreceptors，PRRs）Toll樣受體4（Toll-likereceptor4，TLR4）、晚期糖基化終產物受體（receptorforadvanced glycation endproducts，RAGE）相互作用，觸發TLR4或RAGE介導的髓樣分化因子88/IkB激酶（recombinant myeloid differentiation factor88/inhibitorofkappaBkinase，MyD88/IKK）和絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）炎癥信號通路，導致趨化因子和促炎因子的產生和釋放，并抑制細胞生長、引發細胞毒性和誘導細胞凋亡，從而促進膿毒癥的發生發展及器官功能障礙[1l-12]。在膿毒癥時由于肝臟是炎癥反應的主要部位，大量DAMPs聚集在肝竇內，進一步加重肝細胞的損傷[13]。此外，S100A8/A9引起促炎細胞因子表達的升高也與SRLI的發生密切相關。

本研究結果顯示，肝損傷組血清S100A8/A9水平高于非肝損傷組，提示S100A8/A9可能參與SRLI的發生。已有眾多學者對S100A8/A9在膿毒癥相關器官功能障礙中的作用進行研究，包括膿毒癥引起的肺[4]心肌[15-16]腦[7]和腎[8損傷。S100A8/A9i中性粒細胞在膿毒癥期間通過抑制線粒體呼吸鏈復合物I中表達，導致線粒體功能障礙及內皮細胞凋亡[9]。膿毒癥小鼠肝臟中線粒體呼吸鏈復合物V活性下降，致使線粒體結構損壞和功能障礙，最終導致肝功能損傷[20]。在盲腸結扎穿刺（cecal ligation puncture，CLP）誘導的小鼠膿毒癥肝損傷模型中，S100A8/A9通過激活絲氨酸/蘇氨酸激酶（serine/threonine ki-nase，AKTB生成和抑制AMP活化蛋白激酶（adenosine 5’-monophosphate-activated protein ki-nase，AMPK）介導的線粒體能量代謝增加，促進膿毒癥肝損傷發生，而抑制或敲除S100A8/A9可顯著改善小鼠肝功能障礙、肝臟細胞損傷及炎癥浸潤21。

本研究Spearman 相關分析發現，血清 S100A8/A9水平升高與ALT、TBil升高具有一定相關性，說明在膿毒癥患者受到炎癥打擊后，血清S100A8/A9水平升高在一定程度上反映肝細胞的損傷程度。此外，本研究通過多因素Logistic回歸分析發現S100A8/A9是SRLI發生的獨立危險因素之一，將ALT、TBil和S100A8/A9均納入SRLI的預測模型，結果顯示，血清S100A8/A9預測SRLI發生的AUC為0.758，與ALT、TBil指標聯合預測的AUC為0.992，敏感度為0.958，特異度0.969。可見S100A8/A9與ALT、TBil聯合顯著提高了對SRLI的診斷效能，提示血清S100A8/A9或可作為預測膿毒癥肝損傷的生物學指標。

綜上所述，血清S100A8/A9水平升高與膿毒癥肝損傷的發生密切相關，與ALT、TBil聯合檢測可提高預測膿毒癥發生肝損傷的價值。

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[收稿日期]2024-11-02（本文編輯王曉蘊）