血清miR-483-3p、RAAS系統參數與高血壓前期患者血壓水平相關性及進展至高血壓危險因素分析

高血壓是我國中老年人群常見的慢性疾病，隨著社會老齡化加重，其發病率顯著升高，且呈現年輕化趨勢。高血壓前期為血壓值介于高血壓和理想血壓之間的病理狀態，不僅極容易進展為高血壓，且可增加發生心血管疾病的風險。臨床實踐發現，對高血壓前期患者單純檢測清晨舒張壓（diastolicbloodpressure，DBP）、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）特異性較差，而 24h 動態血壓監測又較繁瑣，不易被患者接受。因此，尋找識別高血壓前期的相關指標具有重要價值。近年來研究指出，微小RNA（microRNA，miR）參與高血壓的發生與發展，一項以180例高血壓患者為對象的研究發現，患者血清microRNA-483-3p水平高于健康者2。腎素-血管緊張素-醛固酮系統（renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS）激活是引起原發性高血壓的重要機制，當前高血壓治療多以RAAS系統為靶點，如醛固酮受體拮抗劑、血管緊張素轉化酶抑制劑等。本研究選擇我院2020年1月—2021年11月收治的90例高血壓前期患者，分析血清miR-483-3p、RAAS系統參數水平與其血壓水平的相關性以及對進展至高血壓的預測價值。

1資料與方法

1.1一般資料以高血壓前期患者90例為觀察組，非高血壓及高血壓前期健康者90例為對照組。觀察組男性49例，女性41例；年齡45＼～67歲，平均（ 53.64±7.52? 歲，符合《國家基層高血壓防治管理指南2020版》3中關于高血壓前期的診斷標準。對照組男性50例，女性40例；年齡為43＼～66歲，平均（ 歲，無急慢性疾病。兩組患者性別、年齡比較，差異均無統計學意義（ Pgt;0.05） 。納入標準：年齡30＼～75歲；臨床資料完整；簽署參與本研究的知情同意書。排除標準：入組前1個月服用過任何降壓藥物；合并可引起繼發性高血壓的相關疾病；合并惡性腫瘤、嚴重心腦血管疾病者及肝腎功能障礙;妊娠期或哺乳期女性。

1.2 方法

1.2.1定量聚合酶鏈反應（quantitative polymerasechainreaction， qPCR ）檢測血清 miR-483-3p ：采集受試者清晨空腹靜脈血 5mL ，常溫下靜置 30min ，凝固后離心取血清，存放在 -80^°C 冰箱中待檢。采用Trizol試劑提取樣本總RNA，分光光度計測量其質量與純度。應用TaqManmicroRNAcDNA試劑盒和FastKingOneStep逆轉錄PCR試劑盒（武漢吉立德生物科技）進行RNA反轉錄。應用定量PCRSYBR-Green試劑盒（廣州達安基因股份有限公司）進行熒光定量PCR。反應體系：RNA酶滅菌水 4μL，SYBR- Green Mix 10μL ，上下游引物各 1μL ，cDNA 4μL 0miR-483-3p上游引物序列：5'-AGTCTGGTCGTG-CACGGCACGTGCAC-3'，下游引物序列： 5^° -TGCG-TGCACGGCACCACGTTTGGCAC-3'。采用 2^-ΔΔG 法計算血清 miR-483-3p 相對表達量。

1.2.2RAAS系統參數檢測：采集受試者清晨空腹肘靜脈血 3mL ，離心分離血漿，應用maglumi2000全自動化學發光測定儀（深圳市新產業生物醫學工程有限公司）及配套試劑盒檢測醛固酮（aldosterone，ALD）血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡI，Ang I）和血漿腎素活性（plasma reninactivity，PRA）水平。按儀器操作規范與試劑盒說明書操作。

1.2.3 24h 動態血壓監測：采用ACF-D1動態血壓監測儀（上海艾迅醫療設備有限公司）對受試者進行連續 24h 動態血壓監測，每隔 30min 測量1次，白天為7：30＼～21：00，夜間為21：00＼～次日7：30。記錄夜間、白天及 24h 平均DBP、SBP。

1.2.4隨訪：對90例高血壓前期患者進行3年隨訪，每年作1次常規體檢，觀察高血壓發生情況。將隨訪期間進展至高血壓的25例設為高血壓組，其余65例設為非高血壓組。進展至高血壓的判斷標準：依照《2020國際高血壓學會全球高血壓實踐指南》，在沒有使用任何降壓藥物前提下，清晨 8：00DBP? 90mmHg 和（或 ）SBP?140mmHg

1.3統計學處理應用SPSS23.0統計學軟件進行數據分析。計數資料以頻數表示，組間比較采用 χ² 檢驗；符合正態分布的計量資料以 表示，組間比較采用 Φ_t 檢驗;繪制受試者工作特征（receiver operat-ing characteristic，ROC）曲線分析血清 miR-483-3p 、RAAS系統參數對高血壓前期的診斷價值；采用Pearson相關性分析法分析 miR-483-3p 與RAAS系統參數的相關性以及 miR-483-3p. RAAS系統參數與高血壓前期患者血壓水平的相關性；采用Logis-tics回歸分析影響因素。 Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1觀察組與對照組 miR-483-3p RAAS系統參數水平比較觀察組 miR-483-3p 表達量、ALD、AngII、PRA水平高于對照組（均 Plt;0.001 ）。見表1。2.2miR-483-3p、RAAS系統參數對高血壓前期的診斷價值miR-483-3p、RAAS系統參數聯合診斷高血壓前期的曲線下面積為0.808，敏感度為 78.44% ，特異度為 75.32% ，高于單一指標診斷。見圖1。

2.3高血壓前期患者血清miR-483-3p水平與RAAS系統參數相關性Pearson相關性分析顯示，高血壓前期患者血清 miR-483-3p 水平與 ALD.AngI ！PRA呈正相關（均 Plt;0.01 ）。見表2。

2.4觀察組與對照組 24h 動態血壓比較觀察組夜間平均DBP及SBP、白天平均DBP及SBP 24h 平均DBP及SBP水平高于對照組（均 Plt;0.001 ）。見表3。

2.5高血壓前期患者血清miR-483-3p、RAAS系統參數與血壓水平的相關性Pearson相關性分析顯示，高血壓前期患者血清 miR-483-3p 及RAAS系統參數（ALD、AngⅡI、PRA）與夜間平均DBP及SBP、白天平均DBP及 SBP，24h 平均DBP及SBP呈正相關（均 Plt;0.05 ）。見表4。

2.6高血壓組與非高血壓組臨床特征及miR-483-3p、RAAS系統參數水平比較高血壓組年齡、體質量指數（body mass index，BMI）、高血壓前期病程、miR-483-3p表達量、ALD、AngI、PRA水平高于非高血壓組，差異均有統計學意義（均 Plt;0.05 ）。見表5。

2.7高血壓前期進展至高血壓危險因素分析以進展至高血壓作為因變量（進展至高血壓 ?=1 ，未進展至高血壓 ₌₀ ），將表4中具有統計學意義的指標作為自變量進行Logistics回歸分析，結果顯示，年齡增大（OR2.789，95%CI：1.658＼～4.687）、miR-483-3p表達量（OR2.462，95%CI：1.353＼～5.782）、ALD（OR2.978，95%CI：1.657＼～5.648）、AngII（0R 2.142， 95%CI .1.352＼～3.362）、PRA（OR3.645，95%CI：1.265＼～6.879）水平增高均為高血壓前期患者進展至高血壓的危險因素（均 Plt;0.05 。見表6。

3討論

高血壓前期為介于正常血壓與高血壓的特殊階段，我國18歲以上人群非高血壓患者高血壓檢出率約為 33.6% ，且該部分患者肥胖、糖尿病及心血管疾病發生風險顯著提高[5。因此，早期識別高血壓前期進展至高血壓的高危患者并制定干預方案，具有重要價值。

miRNA參與調控細胞活化、分化、調亡等過程， 等在高血壓的發生和發展中具有重要作用。動物實驗發現，高血壓大鼠血清中 miR-483-3p 水平異常升高。miR-483參與動脈硬化、肺動脈高壓等疾病的生理病理過程。高血壓發病期間miR-483-3p可保護內皮細胞功能。本研究結果顯示，觀察組血清 miR-483-3p 水平明顯升高，miR-483-3p、RAAS系統參數對高血壓前期具有較高的診斷價值， miR-483-3p 與高血壓前期患者血壓水平呈正相關，與何昕[研究結果部分一致。

RAAS系統在血壓調節過程中發揮重要作用，是參與原發性高血壓發生的重要機制。大量研究顯示，由肝臟和腎臟分別分泌的ALD、AngII、PRA通過一系列反應對血壓進行調節，參與高血壓的發生與發展]。ALD排鉀保鈉，促進水鈉重吸收，增加血容量，升高血壓水平。PRA作用于血管緊張素原，生成 AngI 和 AngII ，AngI可促進血管收縮和ALD分泌。本研究結果顯示，高血壓前期患者RAAS系統參數高于健康者，且與患者血壓水平呈正相關，與相關研究相符[3]，說明高血壓前期同樣存在RAAS系統異常情況。

本研究結果還顯示，年齡增大 Ω.miR-483-3p 表達量、ALD、AngⅡI、PRA水平增高為高血壓前期進展至高血壓的危險因素（均 Plt;0.05 ）。高血壓前期患者血清 miR-483-3p 表達量及ALD、Ang及、PRA水平升高，提示進展至高血壓的風險較大，臨床需及時實施針對性干預，以降低高血壓發生率。

[參考文獻]

[1] FU J，LIU Y，ZHANG L，et al. Nonpharmacologic interventionsforreducingblood pressureinadultswithprehypertensionto established hypertension[J].JAm Heart Assoc，2020， 9（19）：e016804.