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北京市玉淵潭公園蚜蟲種類調查

2024-09-20 00:00:00趙曉娟張羽佳宋佳佳孫玉紅趙眾鄒迎新范友梅
安徽農業科學 2024年17期

摘要 利用抽樣調查法,對北京玉淵潭公園的蚜蟲進行采集,并通過形態和分子對采集到的蚜蟲進行種類鑒定和數量統計。共采集304頭蚜蟲,鑒定出22種,調查種類最多的3種為紫薇長斑蚜(Sarucallis kahawaluokalani)、禾谷縊管蚜(Rhopalosiphum padi)和居竹擬葉蚜(Phyllaphoides bambusicola)。近些年,蚜蟲數量、種類及抗藥性均呈上升趨勢。調查北京玉淵潭公園的蚜蟲種類多樣性,旨在建立北京玉淵潭公園的蚜蟲名錄,進行藥劑選擇,為害蟲防治提供科學依據。

關鍵詞 蚜蟲;分子鑒定;櫻花;玉淵潭公園

中圖分類號 S763.36 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611(2024)17-0138-03

doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2024.17.031

Survey of Aphids in Yuyuantan Park

ZHAO Xiao-juan1,ZHANG Yu-jia2,SONG Jia-jia2 et al

(1.Yuyuantan Park, Beijing 100142;2.China Agricultural University, Beijing 100193)

Abstract Aphids were collected from Yuyuantan Park by means of sampling survey, and species identification and population statistics were carried out by morphological and molecular methods.A total of 304 aphids were collected and 22 species were identified.The three most common aphids were Sarucallis Kahawaluokalani, Rhopalosiphum padi and Phyllaphoides bambusicola.In recent years, the number, species and resistance of aphids were increasing.The aim of this study was to establish a list of aphids in Yuyuantan Park and to provide scientific basis for pest control.

Key words Aphids;Molecular identification;Cerasus;Yuyuantan Park

基金項目 北京市公園管理中心科研專項(ZX2022020)。

作者簡介 趙曉娟(1986—),女,河北靈壽人,高級工程師,碩士,從事園林綠化養護與管理研究。通信作者,高級工程師,從事園林景觀營造與栽培管理研究。

收稿日期 2023-10-22;修回日期 2023-12-06

玉淵潭公園歷史悠久,持久的景觀維護勢必會引發土壤中營養元素失衡,危害櫻花樹生長的各種有害生物積聚[1],蚜蟲等刺吸害蟲頻發,危害嚴重。通過對玉淵潭公園昆蟲種類的調查,了解昆蟲種類的多樣性,既可以合理使用農藥,又充分利用天敵來防治害蟲,創造綠色生態環境。

蚜蟲俗稱膩蟲或蜜蟲,隸屬于昆蟲綱(Insecta)胸喙亞目(Stemorhyncha),包括球蚜總科(Adel-goidea)和蚜總科(Aphidoidea)。蚜蟲用口針穿刺植物表皮造成機械損傷,但由于傷口較小導致無法發現傷口存在,且植物防御反應受到影響,所需的鈣被蚜蟲唾液所分泌的結合蛋白截斷,抑制了其防御反應[2]。如桃蚜是超過110種植物病毒的載體。蚜蟲除通過群體吸收植物體液導致直接危害,還會形成植物病毒傳播導致間接危害[3]。筆者利用抽樣調查法,對北京市玉淵潭公園蚜蟲種類進行調查,以期為害蟲防治提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試昆蟲為2022年4月12日—10月12日在北京玉淵潭公園收集。采集到的標本立即投入100%乙醇中固定,放于-20 ℃冰箱中保存備用。

1.2 主要試劑與儀器

藥劑:2×Rapid Taq Master Mix 購于南京諾唯贊生物有限公司;QuickExtract DNA Extraction Solution 1.0 購于BiosearchTM Technologies 公司;核酸染料(GenecolourTM)購于北京金博益生物有限公司;瓊脂糖購于Spanish公司;設計引物由擎科生物有限公司合成。

儀器設備:移液槍(Eppendorf,Germany)、離心機(Eppendorf,Germany)、PCR 儀(Eppendorf,Germany)。電子天平(Sartorius 2004MP)購于Opton公司;電泳槽購于北京君意東方電泳設備有限公司;電泳凝膠成像儀器購于北京賽智創業科技公司;金屬浴購于北京卡迪尤生物科技有限公司。

其他材料:鑷子、放大鏡、指形管、剪刀、飼養瓶、離心管。

1.3 抽樣調查方法

利用蚜蟲喜食嫩枝嫩葉的特性,通過觀察植物的長勢、形態及螞蟻數量,對其進行捕捉。在櫻花園20 m2的種植區域中,選取各區域內有代表性的櫻花樹10株樹,每棵樹按東西南北方向的樹冠上、中、下部各觀察4片展開樹葉,每株樹調查48片葉,10株樹共計480片葉,記錄其上的所有蚜蟲數量。每隔3 d調查1次。

1.4 昆蟲的形態鑒定

通過對昆蟲的頭部、胸部、腹部的觸角、足、產卵器等形態特征比對近年公開發表和出版的有關書籍、研究報告等論著、論文進行查詢和檢索。通過直接觀察法,用單反相機記錄昆蟲的形態特征,室內在解剖鏡下鑒定,記錄其特征。參考《常見蚜蟲生態圖鑒》《東北農林蚜蟲志》《西北農林蚜蟲志》《中國昆蟲生態大圖鑒》《中國常見植物野外識別手冊》。

1.5 昆蟲的分子鑒定

1.5.1 DNA提取。

用 QuickExtract DNA Extraction Solution 1.0 對采集后凍存單頭無翅成蚜提取 DNA,具體操作方法:①在滅菌的 1.5 mL 離心管中放入采集的單頭健康無翅成蚜,將其放入液氮中 30 s;

②將30 μL細胞裂解液加入離心管中,并用電動勻漿儀充分研磨4~5 s;③確保研磨充分后,將離心管放入 65 ℃水浴鍋中,6 min后取出;④再將離心管放入 80 ℃水浴鍋中,1 min 30 s后立即放在冰上;⑤將提取液轉移至 200 μL 的八連排中,寫好日期、標號等標簽,離心5 s后,保存于-20 ℃冷凍備用。

1.5.2 PCR擴增和測序。

(1)根據已公布的蚜蟲COI基因片段。選用設計引物,蚜蟲的引物序列[4]:

LCO1490,5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG -3′;HCO2198,5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA -3′。

(2)以25 μL PCR反應體系擴增目的基因片段。25 μL PCR反應體系為2×Rapid Taq Master Mix 12.5 μL,模板DNA 2.0 μL,

正向引物1.0 μL,反向引物1.0 μL,ddH2O 8.5 μL。

(3)PCR 擴增程序見表1。

(4)凝膠電泳檢測。取5 μL PCR 反應液用于1 %瓊脂糖凝膠電泳檢測。使用紫外凝膠成像分析儀器檢測擴增條帶,對目的條帶清晰的 PCR 產物送樣測序。

(5)PCR擴增產物測序。由北京擎科生物科技有限公司進行測序。將測序結果用 NCBI 的 BLAST 軟件與GenBank 數據庫進行比對,鑒定昆蟲種類。

2 結果與分析

2.1 COI序列比對和鑒定結果

研究對象為采集的304頭蚜蟲,利用DNA條形碼技術測序結果與數據庫同名物種基因序列相似度對比,同源性99%以上確定為一個物種,發現鑒定采集蚜蟲共22種(表2)。

2.2 種群數量變化

蚜蟲種群數量的變化受諸多因素的影響,如人工防治、寄主植物、天敵數量等。此次調查種類最多的為紫薇長斑蚜(Sarucallis kahawaluokalani),占比10.53%,禾谷縊管蚜(Rhopalosiphum padi)占比6.58%,居竹擬葉蚜(Phyllaphoides bambusicola)占比6.58%。從近幾年公園蚜蟲的發生情況分析,蚜蟲數量、種類及抗藥性均呈上升趨勢。

3 討論

蚜蟲是園林重要害蟲之一,蚜蟲會根據植物散發的揮發物在多樣性和空間排列復雜的環境中尋找寄主植物[5]。了解蚜蟲多樣性可以幫助我們更好地了解它們的生態特征、種群密度以及它們與植物的相互作用。這有助于制定更有效的害蟲防治策略,保護觀賞植物的健康,提升游客的觀賞價值。

不同種類的蚜蟲在不同寄主的不同部位取食。植物部位的營養成分、植物信號、植物屏障等都影響蚜蟲對寄主的選擇性。如桃蚜喜歡在幼嫩的甘藍葉上取食而非老葉,幼嫩的甘藍葉比老葉有更高的氨基酸與糖比率[6]。對于蚜蟲的化學防治重要的是針對蚜蟲種類以及對藥劑敏感度選擇正確的藥劑品種、合適的施藥劑量以及合適的施藥時期[7-8]。登記更多高效的農藥品種,推動我國園林樹木上的農藥登記進程,為園林樹木病蟲害防治提供更多選擇,從而更加科學合理地指導用藥[9]。

桃蚜、棉蚜、蘋果黃蚜等有翅蚜通過遷飛習性可在多種植物取食,其中危害較嚴重的植物是海棠、月季、櫻花??稍谟谐嵫涟l生和遷飛擴散前,充分利用天敵來控制蚜蟲。調查發現天敵有大草蛉、異色瓢蟲、龜紋瓢蟲等,這些天敵在蚜蟲生命周期中扮演不同角色,有助于控制蚜蟲的數量,對蚜蟲具有較強的防治作用,應合理保護和利用。Ali-Arous等[10]發現有機除草方法對蚜蟲的豐富度有積極的影響,相比之下,常規除草方法會導致蚜蟲天敵的稀缺。保留或恢復天敵昆蟲所需的植物種群、花卉和雜草,提供豐富的食物和棲息地可以有效保護天敵。

參考文獻

[1]

趙曉娟,侯世星,孫玉紅,等.玉淵潭公園櫻花樹根瘤病發病情況調查及不同防治技術效果評價[J].安徽農業科學,2022,50(9):138-139,142.

[2] 唐平華,陳國平,朱明庫,等.蚜蟲防治技術研究進展[J].植物保護,2013,39(2):5-12,19.

[3] GIORDANENGO P,BRUNISSEN L,RUSTERUCCI C,et al.Compatible plant-aphid interactions: How aphids manipulate plant responses[J].C R Biol,2010,333(6/7):516-523.

[4] FOOTTIT R G,MAW H E L,VON DOHLEN C D,et al.Species identification of aphids (Insecta: Hemiptera: Aphididae) through DNA barcodes[J].Mol Ecol Resour,2008,8(6):1189-1201.

[5] SHIH P Y,SUGIO A,SIMON J C.Molecular mechanisms underlying host plant specificity in Aphids[J].Annu Rev Entomol,2023,68:431-450.

[6] CAO H H,ZHANG Z F,WANG X F,et al.Nutrition versus defense: Why Myzus persicae(green peach aphid) prefers and performs better on young leaves of cabbage[J].PLoS One,2018,13(4):1-16.

[7] 湯秋玲,馬康生,高希武.蔬菜蚜蟲抗藥性現狀及抗性治理策略[J].植物保護,2016,42(6):11-20.

[8] 張玉國,胡海燕,劉興軍,等.春季桃樹蚜蟲的發生與藥劑防治[J].安徽農業科學,2016,44(16):170-171,195.

[9] 趙曉娟,孫玉紅,高捷.我國北方主要園林樹木上農藥的登記現狀分析[J].現代農藥,2021,20(6):16-20.

[10] ALI-AROUS S,MEZIANE M,DJELOUAH K.Interactions between wild flora, crops, aphids (Hemiptera, Aphididae) and their natural enemies in citrus orchards[J].J Insect Biodivers Syst,2023,9(1):17-32.

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