小葉黃楊葉中化學成分對非小細胞肺癌A549增殖抑制作用的研究

明 洋，趙 莎，鄭一敏，胥秀英

(重慶理工大學 藥學與生物工程學院，重慶 400050)

小葉黃楊(Buxussinicavar.parvifolia)是黃楊科黃楊屬黃楊的一種,[1-2]含有生物堿類、黃酮類、甾醇、香豆素、木脂素和酸類化合物,[3-4]其葉有清熱解毒、化痰止咳、祛風、止血的功能。[5-6]有報道黃楊植物的生物堿成分具有抗腫瘤、抗菌、抗HIV、抗乙酰膽堿酯酶等作用。[7-9]

柏石頭等[10]對小葉黃楊全株化學成分進行研究，但對小葉黃楊葉抑制肺癌活性成分報道較少，本文針對小葉黃楊葉中化學成分對非小細胞肺癌A549增殖抑制研究，報道如下。

1 材料與儀器

1.1 藥材

供試藥材產自江蘇，由重慶理工大學傅善權副主任技師鑒定為黃楊科黃楊屬植物小葉黃楊(Buxus Microphylla)葉，批號：230324。非小細胞肺癌細胞(A549)由實驗室傳代培養得到。

1.2 儀器與試劑

DZF-6050真空干燥箱(天津泰斯特有限公司)，SHZ-D(Ⅲ)循環水式真空泵(河南省予華儀器公司)，RE-52AA旋轉蒸發儀(鞏義市予華儀器有限責任公司)，核磁(NMR)-600MHz(瑞士Bruker)，核磁(AVANCE NEO)-400MHz(瑞士Bruker)，Finnigan-LCQDECA(ESI-MS)(美國熱電公司)、倒置顯微鏡(日本Olympus)、超低溫冰箱(河南鑫貝西生物技術有限公司)、酶標儀(美國賽默飛)、潔凈工作臺(蘇凈安泰空氣技術有限公司)、恒溫CO2細胞培養箱(美國賽默飛)。95 %乙醇、鹽酸、石油醚(重慶川東化工(集團)有限公司)，三氯甲烷、二氯甲烷(成都市科隆化學品有限公司)分析純、胎牛血清(AusGenex)、CCK-8試劑盒(北京蘭杰柯科技有限公司)、胰蛋白酶EDTA(上海源培)、青鏈霉素混合液(上海源培)、二甲基亞砜(生物級)(上海麥克林化學試劑有限公司)、DMED培養基(BasalMedia)、吉非替尼(Aladdin：G408705-1ml)。

2 提取與分離

小葉黃楊10.0 kg葉干燥，粉碎后加10倍量(V/W)的75 %乙醇浸泡過夜，60℃水浴回流提取3次，2 h/次。……