外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977與狼瘡性腎炎疾病活動性的關系及臨床價值

趙志娟 仝 巖 李文博 馮慧潔

河南中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科,河南省鄭州市 450000

狼瘡性腎炎(LN)為系統性紅斑狼瘡常見并發癥,臨床表現除系統性紅斑狼瘡癥狀外,還存在腎功能不全、血尿、蛋白尿等,且疾病嚴重程度與治療方案選擇、預后密切相關[1-2],故而臨床早期診斷及早干預具有重要作用。臨床目前對LN的診斷以病理學活檢為金標準,但其屬于侵入性操作,創傷較大,故而作為腎臟損傷程度評估的常用檢查手段并不理想。隨著臨床研究深入,分子診斷得到重視。機體腎小球免疫復合物沉積為LN發生的原因之一,而微小RNA(miRNA)作為內源性編碼單鏈RNA分子,在LN發生中發揮了重要作用[3-4]。基于此,本研究選取我院收治的104例LN患者為研究對象,探討外周血微小RNA-23b(miR-23b)、微小RNA-202-3p(miR-202-3p)、微小RNA-7977(miR-7977)在LN疾病活動性中的臨床價值,旨在為臨床判定LN疾病活動性提供參考,現分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2020年4月—2022年5月收治的104例LN患者為研究對象,其中女49例,男55例,年齡20～55歲,平均年齡(38.20±7.54)歲,病程0.5～7.0年,平均病程(3.53±1.50)年。納入標準:符合LN相關診斷標準[5];知情本研究,簽署同意書;血液系統功能正常;精神、認知正常。排除標準:合并其他腎病;心力衰竭;惡性腫瘤;感染性疾病;腎功能衰竭;合并其他免疫系統疾病;過敏性疾病;呼吸衰竭。根據入院時系統性紅斑狼瘡疾病活動指數(SLE-DAI)將患者分為活動組(63例,SLE-DAI評分≥10分)和穩定組(41例,SLE-DAI評分<10分)。研究經我院醫學倫理委員會審核批準。

1.2 方法 收集LN患者臨床資料,包括性別、年齡等;采集其入院時空腹血液約5ml,離心(3 000r/min,10min,8.5cm),取血清,使用實時定量聚合酶鏈反應法測定miR-23b、miR-202-3p、miR-7977表達量;使用HITACHI 7600-210自動生化分析儀測定血肌酐(SCr),使用Sysmex XE-2100血液分析系統測定紅細胞沉降率(ESR),使用免疫比濁法測定補體C3、補體C4,計算腎小球過濾率(eGFR)=186×(SCr)-1.154×(年齡)-0.203×0.742。

1.3 觀察指標 (1)比較兩組一般臨床資料,包括性別、年齡、體重指數(BMI)、病程、吸煙史、飲酒史、高血壓、eGFR、SCr、ESR、補體C3、補體C4等。(2)比較兩組入院時外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平。(3)分析外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平與臨床有差異指標、SLE-DAI評分的相關性。(4)分析影響LN疾病活動性的因素。(5)外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平聯合檢測對活動性LN的診斷價值。

2 結果

2.1 兩組一般臨床資料比較 兩組性別、年齡、BMI、病程、吸煙史、飲酒史、高血壓情況比較,差異無統計學意義(P>0.05);活動組eGFR、SCr、ESR、補體C3、補體C4水平與穩定組相比,差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般臨床資料比較

2.2 兩組入院時外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平比較 與穩定組相比,入院時活動組外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平均較低(P<0.05)。見表2。

表2 兩組入院時外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平比較

2.3 miR-23b、miR-202-3p、miR-7977與臨床有差異指標、SLE-DAI評分的相關性 入院時外周血miR-23b、miR-7977、miR-202-3p水平與eGFR、補體C3、補體C4水平呈正相關,與ESR、SCr、SLE-DAI評分呈負相關(P<0.05)。見表3。

表3 miR-23b、miR-202-3p、miR-7977與臨床有差異指標、SLE-DAI評分的相關性

2.4 影響LN疾病活動性的因素 以LN疾病活動性為因變量,將LN患者入院時eGFR、SCr、ESR、補體C3、補體C4、外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平作為自變量,對自變量進行賦值(以104例的平均值為界:≤平均值=1,>平均值=2)。eGFR:≤76.93ml/(min·1.73m2)=1,>76.93ml/(min·1.73m2)=2;SCr:≤96.01μmol/L=1,>96.01μmol/L=2;ESR:≤53.66mm/h=1,>53.66mm/h=2;補體C3:≤0.80g/L=1,>0.80g/L=2;補體C4:≤0.24g/L=1,>0.24g/L=2;miR-23b:≤0.49=1,>0.49=2;miR-202-3p:≤10.49=1,>10.49=2;miR-7977:≤6.10=1,>6.10=2。Logistic回歸分析顯示,入院時eGFR≤76.93ml/(min·1.73m2)、SCr>96.01μmol/L、ESR>53.66mm/h、補體C3≤0.80g/L、補體C4≤0.24g/L、外周血miR-23b≤0.49、miR-202-3p≤10.49、miR-7977≤6.10水平是活動性LN的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響LN疾病活動性的因素

2.5 外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平聯合檢測對活動性LN的診斷價值 以活動性LN患者為陽性樣本,以穩定性LN患者為陰性樣本繪制ROC曲線。結果顯示,外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平聯合診斷活動性LN的AUC為0.882,最佳診斷敏感度、特異度分別為80.95%、95.12%。見表5。

表5 外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平聯合檢測對活動性LN的診斷價值

3 討論

LN為免疫復合物性腎小球炎性反應,可增加系統性紅斑狼瘡患者病死風險,因腎活檢臨床廣泛應用受限,需積極尋找評估LN疾病活動程度的其他指標,以幫助臨床早期診斷、干預,從而改善預后。miRNA是生物學研究的熱點,與機體免疫功能、自身免疫耐受水平密切相關,在大多數自身免疫性疾病中呈異常表達,尤其是系統性紅斑狼瘡等患者[6-8]。在本研究中,LN患者外周血miR-23b呈異常表達,且其表達水平≤0.49是活動性LN的危險因素。有關研究發現[9],miR-23b在系統性紅斑狼瘡中呈低表達,可能通過介導轉化生長因子β1/Smad3通路參與到其發生、發展過程中,并與疾病活動性具有明顯關聯性。系統性紅斑狼瘡患者可能存在Treg細胞功能缺陷,而在Treg細胞中miR-23b靶基因→叉頭狀轉錄因子P3呈特異表達,故而可影響自身免疫功能,且miR-23b-BMSCs促使轉化生長因子β大量分泌時,可加快Treg細胞分化[10]。故而miR-23b與系統性紅斑狼瘡發生、疾病活動程度有關。

本研究結果顯示,miR-202-3p與LN有關,其表達水平與疾病活動度具有相關性,外周血miR-202-3p≤10.49時為活動性LN的危險因素。龐杰等[11]研究發現,系統性紅斑狼瘡患者血清miR-202-3p水平與T淋巴細胞亞群具有顯著相關性,可參與患者免疫反應調控過程,且其表達缺失時可激活免疫炎性反應,促使系統性紅斑狼瘡發生、發展。miR-202-3p與機體免疫反應有關,其可靶向結合PPARGC1A mRNA,抑制Toll樣受體信號傳導及其介導的免疫反應,從而加重系統性紅斑狼瘡病情,導致LN。

miR-7977是臨床近年新發現的miRNA,可參與細胞分化、增殖等行為過程,在自身免疫性疾病等疾病中扮演重要角色。本研究結果還顯示,LN患者外周血miR-7977呈異常表達,并與eGFR、補體C3、補體C4、ESR、SCr、SLE-DAI評分具有緊密關聯性,且是活動性LN的危險因素。杜然等[12]研究指出,外周血miR-7977表達水平越低,LN病情越嚴重,與本研究結果一致。miR-7977異常升高可促進炎性介質釋放、加重免疫系統紊亂程度,加快彌漫性增生性疾病發生,引起LN[13]。因此,臨床積極關注LN患者外周血miR-7977表達水平具有數據指導作用。

另外,本研究ROC曲線分析顯示,外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平聯合診斷活動性LN的AUC、敏感度、特異度最佳,故而推薦將其作為常用指標進行推廣應用。

綜上所述,LN患者外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平異常表達,并與疾病活動程度有關,聯合檢測有助于臨床判定疾病活動度。