老年下肢深靜脈血栓患者血清Gas6、IL-1β、NETs水平與介入治療效果的關系

吳郵電,李 寧

許昌醫院介入科,河南許昌 461000

下肢深靜脈血栓(DVT)屬于血管外科疾病,可累及全身主干靜脈,經皮導管介入溶栓治療是其常用治療手段,能夠有效糾正血液循環,溶解血栓,但仍有部分患者療效欠佳[1-2]。早期預測DVT患者介入治療預后情況對調整治療方案及改善患者預后尤為關鍵。白細胞介素-1β(IL-1β)是一種促炎性細胞因子,可通過激活炎癥-免疫細胞,影響血管內皮細胞活性[3]。中性粒細胞胞外陷阱(NETs)在多種炎癥及免疫系統中起重要調節作用,已有研究證實,其可加快血小板、紅細胞凝結,促進纖維蛋白生成[4]。生長停滯特異性基因產物6(Gas6)是一種分泌型蛋白,其水平與動脈斑塊高度和斑塊總面積明顯相關,這說明Gas6在動脈粥樣硬化形成過程中發揮重要調控作用[5]。但有關血清Gas6、IL-1β、NETs與DVT患者介入治療效果關系的研究較少見。因此,本研究通過分析Gas6、IL-1β、NETs與DVT患者介入治療效果的關系,以期為疾病診治提供參考依據,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年2月至2023年1月本院收治的120例老年DVT患者作為研究對象。納入標準:符合DVT相關診斷標準[6],經下肢彩色多普勒超聲檢查確診;年齡≥60歲;發病在14 d內且為單側下肢血栓。排除標準:伴有下肢損傷或下肢血管病變;既往存在下肢骨折;有先天或獲得性凝血障礙疾病史;存在精神障礙、意識模糊;合并嚴重肝腎功能不全;對介入治療不能耐受;近6個月內服用過影響凝血功能、血小板功能的藥物。根據治療7 d后臨床療效將研究對象分為無效組(22例)和有效組(98例)。無效組中男15例,女7例;年齡65～75歲,平均(67.87±2.74)歲;體質量指數(BMI)18.7～24.1 kg/m2,平均(22.05±0.75)kg/m2;病因:創傷性關節炎10例,類風濕關節炎5例,膝骨關節炎7例。有效組中男61例,女37例;年齡65～77歲,平均(68.01±2.80)歲;BMI 18.5～24.0 kg/m2,平均(21.95±0.70)kg/m2;病因:創傷性關節炎40例,類風濕關節炎22例,膝骨關節炎36例。兩組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。所有研究對象均知情同意本研究,并簽署知情同意書,本研究經本院醫學倫理委員會審批通過(倫理審批號:20201245)。

1.2療效評價標準 參考《深靜脈血栓形成的診斷和治療指南(第三版)》[6]評價療效:疼痛、腫脹消失,超聲檢查結果顯示深靜脈通暢,無血栓,血管壁光滑,靜脈管徑正常為治愈;活動后輕微疼痛,超聲檢查結果顯示深靜脈基本通暢,靜脈管徑正常,血栓明顯縮小為顯效;超聲顯示大部分血栓消失,深靜脈部分再通,患肢周徑縮小≥2 cm為有效;未達上述標準為無效。

1.3治療方法 均經導管介入溶栓,患者取平臥位,股靜脈穿刺健側,進行下腔靜脈造影檢查,明確病變位置后,于下腔靜脈處放置濾器,保證濾器頂端距深靜脈開口距離為0.5～1.0 cm,經淺靜脈留置針,選取適宜溶栓導管,置入血栓遠心端,使末端與微量泵相連,以每次100 000～200 000 U尿激酶經溶栓導管持續微量泵入,于2 h內泵入完畢,間隔6 h進行下一次泵入,溶栓12 h后,進行靜脈造影,隨后每間隔24 h靜脈造影1次,以便調整導管位置。待血栓2 d無變化或完全溶解時治療停止,療程5～7 d。

1.4檢測方法 治療前及治療3、7 d后取3 mL空腹靜脈血,離心處理,離心半徑為10 cm,離心轉速為3 000 r/min,離心時間為10 min,取上清液備用。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清Gas6、IL-1β水平,MPO-DNA復合物捕捉酶聯免疫吸附試驗檢測NETs水平,試劑盒均購自美國R&D SYSTEMS公司,所有操作嚴格遵循試劑盒說明書。

1.5觀察指標 (1)比較兩組治療前及治療3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平;(2)分析Gas6、IL-1β、NETs與老年DVT患者介入治療效果關系;(3)血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測DVT患者介入無效的價值。

2 結 果

2.1兩組血清Gas6、IL-1β、NETs水平比較 無效組與有效組Gas6、IL-1β、NETs水平存在時間與組間的交互效應,差異有統計學意義(F交互=15.214,P<0.001);兩組Gas6、IL-1β、NETs水平均隨著治療時間變長而逐漸降低,差異有統計學意義(F=12.375、12.271、13.277,P<0.001);無效組Gas6、IL-1β、NETs水平均明顯高于有效組,差異有統計學意義(F=23.537、22.851、23.213,P<0.001)。見表1。

表1 兩組血清Gas6、IL-1β、NETs水平比較

2.2老年DVT患者介入治療無效的影響因素分析 以老年DVT患者介入治療效果為因變量(有效=0,無效=1),將治療3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平作為自變量,對自變量進行賦值(以120例研究對象檢測結果的平均值為界:≤平均值=0,>平均值=1)。賦值如下,治療3 d后:Gas6≤12.05 ng/mL=0,>12.05 ng/mL=1;IL-1β≤4.84 mg/L=0,>4.84 mg/L=1;NETs≤0.58=0,>0.58=1。治療7 d后:Gas6≤9.86 ng/mL=0,>9.86 ng/mL=1;IL-1β≤2.96 mg/L=0,>2.96 mg/L=1;NETs≤0.32=0,>0.32=1。多因素Logistic回歸分析結果顯示,治療3 d后血清Gas6>12.05 ng/mL、IL-1β>4.84 mg/L、NETs>0.58,治療7 d后血清Gas6>9.86 ng/mL、IL-1β>2.96 mg/L、NETs>0.32是老年DVT患者介入治療無效的危險因素(P<0.05)。見表2。

表2 多因素Logistic回歸分析老年DVT患者介入治療無效的影響因素

2.3血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測DVT患者介入無效的效能 以治療無效老年DVT患者為陽性樣本,以治療有效老年DVT患者為陰性樣本,繪制ROC曲線。結果顯示,治療3 d后血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測老年DVT患者治療無效的曲線下面積(AUC)為0.904,靈敏度、特異度分別為81.82%、98.98%,聯合檢測的AUC明顯大于單獨檢測(P<0.05);治療7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測老年DVT患者治療無效的AUC為0.941,靈敏度、特異度分別為86.36%、87.76%,聯合檢測的AUC明顯大于單獨檢測(P<0.05)。見表3、圖1、圖2。

表3 血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測DVT患者介入無效的效能

圖1 治療3 d后血清Gas6、IL-1β、NETs預測DVT患者介入無效的ROC曲線

圖2 治療7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs預測DVT患者介入無效的ROC曲線

3 討 論

既往研究報道,炎癥反應與DVT形成密切相關,一方面炎癥反應可引起凝血因子大量生成,從而加快血液高凝狀態形成,另一方面血栓生成又可加劇炎癥反應[7-8]。IL-1β是一種促炎性細胞因子,廣泛參與人體組織破壞、水腫形成等多種病理損傷過程,其可通過改變巨噬細胞、內皮細胞,以及聚集活化血小板、白細胞,加重凝血、纖溶系統失衡而促進血栓形成[9-10]。Gas6主要在巨噬細胞、內皮細胞及血管平滑肌細胞中表達[11],有研究通過分析864例靜脈血栓栓塞患者血清Gas6水平,發現老年患者高Gas6水平與靜脈血栓栓塞復發、大出血和病死風險明顯相關[12]。嚴志強等[13]報道,非腫瘤DVT患者治療前IL-1β水平明顯高于健康人群,抗凝治療后明顯下降,但仍明顯高于健康人群。在此基礎上,本研究發現,治療3、7 d后無效組血清Gas6、IL-1β水平均高于有效組,表明Gas6、IL-1β在DVT演變過程中發揮重要作用?？紤]原因在于以下方面:IL-1β可誘導內皮細胞與血小板發生黏附,同時可促進中性粒細胞遷移并黏附內皮細胞,導致血液纖溶能力下降,從而引起血栓生成;Gas6可通過作用于GP Ⅱ b/Ⅲ a,磷酸化AKT和PI3K,啟動“自內而外”信號轉導機制,激活下游信號分子β3整合素,促進顆粒釋放,使纖維蛋白原交連相近血小板,進而形成牢固血小板栓。本研究還發現,血清Gas6、IL-1β水平升高可影響老年DVT患者介入治療效果,提示臨床可于疾病早期動態監測血清Gas6、IL-1β水平變化情況,為評估病情變化、預測預后提供有效信息[14-15]。

NETs是由中性粒細胞顆粒和細胞外DNA、組蛋白組成的復合物,能夠殺滅和捕獲細胞外病原菌[16-17]。THAKUR等[18]報道,NETs可激活血小板和凝血級聯反應,對誘導血栓生成具有促進作用。本研究結果表明,無效組治療3、7 d后血清NETs水平高于有效組,且其水平與治療效果呈負相關,與張銀龍等[19]研究論點相近,說明血清NETs水平變化不僅與病情變化聯系緊密,還能影響預后。推測原因,NETs可通過作用于凝血因子XⅡ、血管性血友病因子等分子,促進紅細胞、血小板聚集及纖維蛋白形成;還可通過與組織因子相結合,激活外源性凝血途徑[20]。已有相關研究證實,NETs可裂解、氧化血栓調節蛋白和組織因子通道抑制劑,導致體內天然抗凝物質降解失活,加劇凝血反應[21]。

此外,ROC曲線分析結果證實,血清Gas6、IL-1β、NETs對DVT患者介入治療無效均具有良好預測價值,但可能目前還無法滿足臨床實際應用,仍有較大提升空間。為此,本研究創新性探討3項指標聯合檢測的預測價值,結果發現,治療7 d后,血清Gas6、IL-1β、NETs聯合檢測預測DVT患者介入治療無效的AUC達0.941,較各項血清指標單獨檢測的AUC明顯提高,可為臨床提供更為可靠的診斷途徑。

綜上所述,血清Gas6、IL-1β、NETs水平變化對預后有明顯影響,3項指標聯合檢測可作為預測DVT患者介入治療效果的重要輔助途徑。但本研究不足之處在于納入樣本量偏少,可能造成數據的偏倚,仍需后續擴大樣本量進行進一步的驗證。