急性腦梗死患者血清miR-206 及miR-122表達水平及其診斷價值分析

周宇立，費丹婷，索源，葉飛龍

急性腦梗死（ACI）是一種急性缺血性腦血管疾病，具有高發病率、高致殘率和高病死率等特點[1-2]。研究指出，miRNA在腦血管疾病的發生和預后中起著重要的作用，但其確定的基因靶標和信號通路仍不十分清楚[3]。miR-122 是一種機體組織特異性miRNA，參與調節機體神經發育過程，并在腦組織缺血、缺氧、腦梗死的發生發展過程中扮演重要角色，并與腦梗死病情及預后密切相關[4]。miR-206 屬于miR-1家族成員之一，具有調控細胞生長、增殖及凋亡等作用[5]。本研究旨在探討ACI 患者血清miR-206、miR-122 表達水平及其診斷價值，報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2021 年1 月至2022 年6 月嘉興市第一醫院收治的ACI 患者156 例（觀察組），納入標準：（1）符合《中國急性缺血性腦卒中診療指南2018》中ACI 診斷標準[6]；（2）行頭顱CT/MRI 檢查；（3）發病后24 h 內入院；（4）首次發病。排除標準：（1）合并感染性疾病者；（2）并發心房顫動引起的心源性腦栓塞者；（3）既往有腦血管病史者；（4）有血液病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病，以及心、腎、肺及肝等重要器官功能嚴受損者；（5）哺乳期或孕婦。選取同期在院體檢，且年齡、性別匹配的健康者150 例設為對照組。本研究征得患者及家屬知情同意，經嘉興市第一醫院醫學倫理委員會批準通過。

1.2 方法

1.2.1 標本采集及臨床指標檢測 觀察組于入院當日，對照組于體檢當日清晨空腹抽取10 ml 外周靜脈血，在4 ℃和1 600 r/min 下離心10 min，收集血清，并在-80℃下保存。采用電子血壓計測量兩組收縮壓及舒張壓。

1.2.2 檢測血清miR-206 及miR-122 水平 采用實時熒光定量PCR 法檢測血清miR-206、miR-122 的表達水平。使用Trizols 溶解試劑提取血清總RNA，通過逆轉錄反應獲得cDNA，以U6 為內參，按照制造商的指導進行PCR 擴增。采用2-CT法計算miR-206、miR-122 相對表達水平。

1.2.3 疾病嚴重程度及腦梗死面積評估 觀察組入院后第1 天采用美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）評分進行疾病嚴重程度評估：輕度（n=44），NIHSS評分＜5 分；中度（n=49），5 分≤NIHSS評分＜16 分；重度（n=63），NIHSS 評分≥16 分。ACI 患者均進行頭顱MRI DWI 檢查，記錄腦梗死病灶大小。根據病灶的最大直徑分為：小梗死面積（直徑1.6 ～3.0 cm）、中梗死面積（直徑3.1 ～5 cm）及大梗死面積（直徑＞5 cm）。

1.3 統計方法 數據采用SPSS 23.0 軟件分析，計數資料采用檢驗。計量資料符合正態分布以均數±標準差表示，多組間比較采用F檢驗，多重比較采用SNK-q 檢驗，組間比較采用配對t 檢驗；相關性分析采用Pearson法分析；受試者工作特征（ROC）曲線分析診斷價值。P ＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 觀察組收縮壓及舒張壓水平均顯著高于對照組（均P ＜0.05），見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 血清miR-206 及miR-122 表達水平比較 觀察組血清miR-206 及miR-122 表達水平高于對照組（均P ＜0.05），見表2。

表2 兩組血清miR-206、miR-122 表達水平比較

2.3 觀察組不同嚴重程度亞組血清miR-206及miR-122表達水平比較 3 組miR-206、miR-122 表達水平及NIHSS 評分差異均有統計學意義（均P ＜0.05）。與輕度組比較，重度組和中度組患者血清miR-206 表達、miR-122 表達及NIHSS評分均升高，且重度組表達水平高于中度組（q≥2.81，均P ＜0.05），見表3。

表3 觀察組不同嚴重程度亞組血清miR-206、miR-122 表達水平及NIHSS 評分比較

2.4 觀察組血清miR-206、miR-122 水平與NIHSS評分的相關性 Pearson 相關性分析顯示，觀察組miR-206 與miR-122 水平與NIHSS評分均呈顯著正相關（r=0.455、0.696，均P ＜0.05）。

2.5 觀察組不同嚴重程度亞組miR-206、miR-122 水平比較 觀察組不同梗死面積患者miR-206 與miR-122 水平差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 miR-206、miR-122 與急性腦梗死患者臨床參數的關系

2.6 血清miR-206 及miR-122 水平對ACI 的診斷價值 血清miR-206、miR-122 水平預測ACI 的AUC 分別為0.819（95%CI：0.771 ～0.860）及0.891（95% CI：0.851 ～0.924），截斷值分別為1.08 及1.38，對應的敏感度分別為73.08%及87.82%，特異度分別為92.00%及79.33%；血清miR-206、miR-122水平聯合預測的AUC 為0.896（95% CI：0.856 ～0.928），敏感度為72.44%，特異度為92.67%，見圖1。

圖1 血清miR-206、miR-122 水平預測ACI 的ROC 曲線

3 討論

ACI又稱缺血性腦卒中，其發病率占所有腦卒中的87%，且由于腦梗死發病的緊迫性和神經元功能的特殊性，往往導致高致殘率和高死亡率[7]。因此及早評估ACI疾病的發生及病情發展可有效改善患者預后。血清學監測由于便捷、快速及無創等優點在臨床應用廣泛，可為ACI患者的診斷提供參考依據[8]。

研究發現，在ACI患者血清中可檢測到miRNA的異常表達，提示miRNA 可能作為判斷ACI 發生的標志物[9]。miR-206 位于人類染色體6p12.2 上，參與細胞分化與血管形成[10]。吳小楊等[11]研究發現miR-206 在腔隙性腦梗死伴腦白質病變患者血清中表達升高，并參與患者認知功能損傷過程。本研究中ACI 患者血清miR-206 表達水平高于對照組，且隨著NIHSS評分的增加，血清miR-206 表達水平逐漸升高，并進一步發現miR-206 表達與NIHSS 評分呈正相關，提示miR-206 可能參與ACI 的發生、發展過程。ROC曲線顯示，血清miR-206 水平預測ACI 的AUC 為0.819，敏感度為73.08%，特異度為92.00%，表明通過檢測ACI 患者血清miR-206 水平可用于判斷ACI 發生。

既往研究表明，miR-122 影響缺血性腦卒中疾病的發生及發展過程，并與缺血后梗死面積有關[12]。王蒙蒙等[13]研究也表明miR-122 可有效診斷急性缺血性腦卒中的發生。本研究ACI 患者血清miR-122表達水平高于對照組，且隨著NIHSS 評分的增加，血清miR-122 表達水平逐漸升高，Pearson 相關性分析結果顯示ACI 患者血清miR-122、miR-206 表達與NIHSS 評分均呈正相關，表明miR-122 與ACI 的發生密切相關，對疾病嚴重程度評估具有積極意義。miR-206 與miR-122 表達隨著梗死面積的增加逐漸上升，表明血清中miR-206 與miR-122 的表達水平受梗死面積的影響。本研究ROC 曲線顯示血清miR-122 水平預測ACI 的AUC 為0.891，敏感度為87.82%，特異度為79.33%，與miR-206 水平聯合預測的AUC 為0.896，敏感度為72.44%，特異度為92.67%，表明聯合檢測二者在ACI 患者血清中的表達可用于預測ACI 發生，且預測效能高于單一指標檢測，可為ACI 疾病的預防和治療提供依據。

綜上所述，miR-206 及miR-122 在ACI 患者血清中表達均升高，二者與ACI 疾病嚴重程度密切相關，對ACI 疾病具有一定診斷價值。

利益沖突 所有作者聲明無利益沖突