血清LncRNA-MALAT1 水平與心肌梗死患者疾病嚴重程度和預后的關系

邵燦，周文，陳芙蓉

心肌梗死是老年人群中心血管疾病的好發類型，發病率、死亡率較高，部分嚴重者可能導致胸痛、休克。急性心肌梗死（AMI）的發病機制相對復雜，認為與心肌損傷、炎癥進展和血流改變有關[1-2]，手術治療的效果良好，可有效降低患者病死率和致殘率，但依然有部分患者因各種原因出現近期心血管不良事件（MACE）。既往臨床多將肌鈣蛋白作為AMI 臨床診斷和預后評價的監測指標[3]，但其在早期心肌損傷時敏感性較差。近年來隨醫學進步和分子生物學發展，越來越多的研究者發現，AMI患者的發病與進展可能與基因表達和調控有關[4]。長鏈非編碼RNA（lncRNA）是分子生物學中一種非編碼轉錄RNA，參與諸多心血管疾病的發病進展。肺腺癌轉移相關轉錄本1（MALAT1）是lncRNA中的家族成員，權瑜等[5]發現，LncRNA-MALAT1可以調節血管內皮功能，抑制其表達可以抑制心肌細胞氧化應激損傷狀態，發揮一定的心臟保護效果。鑒于此，本研究探討LncRNA-MALAT1 與AMI 患者病情進展及預后的關系，旨在為臨床治療AMI，改善預后挖掘潛在治療靶點，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2019 年3 月至2020 年8 月在溫州市中西醫結合醫院接受治療的120 例AMI 患者為觀察對象。其中男71 例，女49 例；年齡40 ～75 歲，平均（55.9±5.1）歲；基礎疾病：高血壓42例，糖尿病49 例，高血脂29 例。納入標準：符合AMI診斷標準[6]，經心電圖、冠脈造影檢查確診；年齡＞18歲；急性胸痛發作至就診時間＜8 h；接受經皮冠狀動脈介入（PCI）術治療；臨床資料無缺失，可完成研究。排除標準：既往或現在明確存在腫瘤疾病者；合并心絞痛、肥厚型心肌病、糖尿病視網膜病變、嚴重血管病變、嚴重感染和肺部疾病；妊娠期、哺乳期女性；合并免疫系統障礙者；既往存在心臟手術史者。本研究過程符合《赫爾辛基宣言》相關倫理要求，經溫州市中西醫結合醫院醫學倫理委員會批準[倫研批第（2023-L040）號]，且已豁免患者及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 通過電子病歷系統收集研究對象的臨床資料，包括患者性別、年齡、體質量指數（BMI）、吸煙史、血脂情況[總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白]、收縮壓、舒張壓、血清心肌肌鈣蛋白I（cTnⅠ）、超敏C 反應蛋白（hs-CRP）及肌酸激酶（CK-MB）等水平。

1.2.2 實時熒光定量PCR 法測定血清LncRNAMALAT1 水平 采集研究患者外周靜脈血5 ml，離心分離取上清液，利用密度梯度離心法分離PBMC。用Trizol 法（上海雙達生物技術有限公司）提取PBMC 細胞的總RNA，并使用紫外分光光度計（賽默飛，型號：Multiskan SkyHigh）檢測RNA 的濃度。先采用逆轉錄試劑盒進行逆轉錄獲得cDNA，將產物置于4 ℃條件下保存，再以獲得的cDNA 為模板進行熒光定量PCR 擴增，在RT-PCR 儀上設置反應條件：95℃5min 預變性；隨后經95℃變性10s，60℃退火35 s，65 ℃延伸30 s，擴增35 個循環。引物序列如下：LncRNA-MALAT1 上游引物：5’-AGGCGTTGTG-CGTAGAGGA-3’，下游引物：5’-GGATTTTTACCAA-CCACTCGC-3’；內參GAPDH上游引物：5’-AGACAGCCGCATCTTCTTGT-3’，下游引物：5’-CTTGCCGTGGGTAGAGTCAT-3’。引物由上海生工生物工程有限公司合成。LncRNAMALAT1 表達量=，其中CT=CT（target）-C（tcalibrator），CT=CTlnRNA-CT18S。

1.2.3 Gensini 評分 對研究對象行冠狀動脈造影檢查，并以Gensini評分標準[7]評價冠脈狹窄程度，分為Gensini 評分≥60 分組（n=52）和Gensini 評分＜60 分組（n=68）。

1.2.4 MACE 評估 研究對象均在本院接受手術，且電話或門診隨訪6 個月。記錄隨訪期間再發心肌梗死、血管重建、惡性心律失常、慢性心力衰竭、心源性休克等MACE 發生情況。

1.3 觀察指標（1）比較Gensini 評分≥60 分組和Gensini 評分＜60 分組患者的臨床資料。（2）比較非MACE 組和MACE 組患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平。（3）分析血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 預測AMI 患者近期發生MACE 的價值。

1.4 統計方法 使用SPSS 23.0統計軟件進行分析，計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較行t檢驗；計數資料采用[例（%）]表示，比較采用檢驗。預測價值分析采用受試者工作特征（ROC）曲線，計算曲線下面積（AUC）。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Gensini 評分≥60 分組和Gensini 評分＜60 分組患者臨床資料比較 Gensini 評分≥60 分組和Gensini評分＜60 分組患者在性別、年齡、BMI、吸煙史、收縮壓、舒張壓、低密度脂蛋、總膽固醇、三酰甘油等差異均無統計學意義（均P ＞0.05），兩組高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 等差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 Gensini 評分≥60 分組和Gensini 評分＜60 分組AMI 患者臨床資料比較

2.2 非MACE 組和MACE 組患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平比較 120 例AMI 患者經6 個月隨訪后有36 例患者出現MACE，將其納為MACE 組，其余納為非MACE 組。MACE 組患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高于非MACE 組（均P ＜0.05），見表2。

表2 非MACE 組和MACE 組AMI 患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平比較

2.3 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 預測AMI 患者近期發生MACE 價值 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 水平均具有預測AMI 患者MACE 價值，AUC 分別為0.641，0.692。以高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1水平截斷值為臨界點，采用并聯的方式進行聯合檢測預測AMI 患者預后價值，其AUC 為0.726，敏感度為83.33%，特異度為61.90%，聯合檢測AUC及敏感度均高于各指標單獨檢測，見表3。

表3 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 水平預測AMI 患者近期發生MACE 價值

3 討論

AMI 指的是由于冠狀動脈內突然的血栓形成，導致了血液不能夠通過冠狀動脈給心肌細胞供血和供氧，此時心肌就會出現壞死，是一種可能危及生命的急性冠脈綜合征，具有發病突然、死亡風險較高等特點，臨床主要采用PCI 術治療。但PCI 術后仍存在急性心力衰竭、嚴重心律失常等MACE 事件發生的風險，嚴重威脅患者生存[8]。因此，早期有效診治對控制AMI 疾病發展以及降低死亡率具有不可忽視的意義。

Gensini 評分是冠脈狹窄程度的常見評分，可有效反映冠狀動脈病變的發生及嚴重程度[9]。本研究發現，Gensini評分≥60 分組和Gensini評分＜60 分組患者在高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 方面差異均有統計學意義（均P＜0.05）。LncRNAs是一類長度超過200 nt的RNA，可以以RNA 的形式調控下游多種基因表達，參與癌癥、神經系統、心血管系統等多種疾病的發生和進展[10-11]。lncRNAs 廣泛參與心臟發育、動脈粥樣硬化、心肌梗死、心臟衰竭、高血壓和動脈瘤等發病過程中[12-13]。既往有研究顯示，血清LncRNA-MALAT1在AMI 患者中呈高表達，可作為AMI 患者MACE風險評估的重要生物標志物[14]。本研究結果表明，血清高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 水平與AMI疾病嚴重程度有關。

本研究120 例AMI 患者經6 個月隨訪后有36例患者出現MACE，MACE 組患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高于非MACE 組。這提示AMI 患者預后可能與血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高低存在一定關聯。LncRNA-MALAT1 在心血管疾病中發揮重要作用。有研究顯示，血清LncRNA-MALAT1 水平可用于預測AMI患者心室重構情況，推測血清LncRNA-MALAT1 水平可用于評估AMI 患者預后情況[15]。本研究結果顯示，血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平均具有預測AMI 預后價值，AUC 分別為0.641，0.692，聯合檢測AUC及敏感度均高于各項指標單獨檢測，這提示血清高密度脂蛋白和LncRNAMALAT1 水平能較好預測AMI患者預后，聯合檢測可提高AMI 敏感性。

綜上所述，血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平可影響AMI 患者疾病嚴重程度，兩個指標聯合應用可有效預測患者短期預后情況，臨床可通過檢測血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1水平變化，評估患者預后，并及時采取對應預防干預措施減少患者病死風險。盡管本研究可為臨床改善AMI患者提供科學依據，但仍存在一定的不足之處。本研究納入樣本量偏小，且患者均來自同一家醫院，可能造成數據存在偏倚；且隨訪時間較短，對于上述指標能否預測AMI 患者治療后遠期預后需要擴大樣本量延長隨訪時間行進一步分析研究。

利益沖突 所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明 邵燦：研究命題的提出、設計，撰寫論文；周文：采集及清洗數據、篩選病例；陳芙蓉：實施研究、論文審定、實施研究