PRC1在肝內膽管細胞癌中的表達與作用機制研究

戴龍飛

（山東第一醫科大學附屬省立醫院，山東 濟南 250000）

膽管癌是僅次于肝細胞性肝癌的第二常見肝臟惡性腫瘤，過去幾十年，其發病率不斷上升[1]。大多數膽管癌患者早期無顯著的臨床癥狀，被發現時已屬于晚期，失去了手術機會[2]。因此，探究膽管細胞癌的生物學特征，尋找新的預警分子，提高膽管癌患者的檢出率尤為重要。細胞分裂失敗導致非整倍體可能是導致腫瘤發展的一個重要因素。作為細胞分裂的重要調節因子，胞質分裂蛋白調節因子1（protein regulator of cytokinesis 1，PRC1）調節反平行微管交聯，促進微管結構的形成，支持細胞形態和調節胞質分裂[3]。PRC1的表達失調促進了染色體的不穩定，在腫瘤的發生、發展中起重要作用[4]。目前，已有多項研究報道PRC1在腫瘤中表達升高，如肝癌[3]、胃癌[5]、結腸癌[6]、前列腺癌[7]和口腔鱗狀細胞癌[8]等，且與患者的預后相關。然而，PRC1在腫瘤發生、發展中的分子機制，尤其是在膽管細胞癌中仍然知之甚少。在本研究中，首先探究了PRC1在正常膽管細胞與肝內膽管細胞癌中的表達情況，進一步研究了PRC1在肝內膽管細胞癌中對其生物學功能的影響，并探討其可能的分子機制。

1 材料與方法

1.1 細胞培養和轉染 ICC細胞系（CCLP-1）來自衛生部多器官聯合移植重點實驗室的饋贈，并在含10%胎牛血清（Gibco，USA）和青霉素/鏈霉素的1640完全培養基中培養。小干擾RNA的轉染是將細胞接種在生長至40%的6孔組織培養板上。第2天，使用Lipofectamine 2000試劑（Invitrogen）根據制造商的說明書用靶向人PRC1或對照 siRNA（OriGene，USA）的100 nmol/L siRNA轉染細胞。對于PRC1的siRNA 的靶編碼序列為5'AGCGCUGCAAUUAGAAGUGGAUCGG 3'和5'CCGAUCCACUUCUAAUUGCAGCGCU 3'。……