氧化石墨烯固定化溶菌酶的研究進展*

李 慧，龐姍姍，田家瑤，王云云，薛志飛，龔國利

(1 陜西科技大學設計與藝術學院，陜西 西安 710021；2 陜西科技大學食品與生物工程學院，陜西 西安 710021)

GO雖然對溶菌酶具有良好的吸附作用，但GO與蛋白質的相互作用，會擾亂蛋白質結構的完整性，從而導致活性的降低[17-18]。Yang等[19]研究了溶菌酶在GO和RGO上的吸附，測定了載體對酶活性的抑制作用，與RGO相比，GO對溶菌酶活性表現出更強的抑制作用，GO誘導酶去折疊，導致α-螺旋結構喪失，色氨酸殘基暴露于水環境中，GO濃度從2 μg/mL增加到18 μg/mL，溶菌酶的活性從93.8%降低至56.2%，RGO濃度從0 μg/mL增加到2 μg/mL，溶菌酶活性增加2.4%，當RGO濃度增加到18 μg/mL，仍保留初始酶活94.9%。Chakrabarti等[16]研究了雞蛋清溶菌酶(HEWL)吸附在GO上對結構和功能的影響。結果顯示，雞蛋溶菌酶可以在GO上自發固定，固定后溶菌酶的二級和三級結構變化較小，但熱穩定性和酶的活性顯著降低。GO對溶菌酶活性和構象具有顯著影響，GO固定溶菌酶，色氨酸殘基(Trp)的環境變化影響酶的活性位點，對酶活性產生抑制作用。

本文綜述近年來通過功能化修飾、包覆-吸附法、與天然高分子共混、位點特異性固定等方法，穩定GO對溶菌酶的吸附量，減少抑制酶活的原理、方法，并對未來該領域的發展方向做出展望。

1 GO固定化溶菌酶的途徑

傳統的固定化酶的方式有共價結合、物理吸附、交聯、包埋四種。GO表面有豐富的含氧官能團，在固定溶菌酶時，主要有物理吸附法和共價結合法兩種途徑。

1.1 物理吸附法

GO作為載體，目前采用物理吸附法固定溶菌酶的應用較為廣泛。……