段榮清,厲柳岑,湯旗,梅蕾,沈耀
溫州醫科大學 檢驗醫學院(生命科學學院),浙江 溫州 325035
膠質瘤是常見的原發性顱內腫瘤之一,也是最具侵襲性和最致命的腦腫瘤,分為不同的級別和組織學亞型[1]。流行病學表明膠質瘤發生在各個年齡段,但以成年人多見,男性比女性更容易患病[2]。 目前,膠質瘤的治療主要通過手術切除和輔助放化療。膠質瘤腫瘤細胞向周圍正常組織明顯侵襲性和浸潤增殖大大降低了治療效果,導致患者預后惡化,5年病死率超過90%[3-5]。肌肽是一種天然存在的二肽,廣泛分布在肌肉、大腦等可興奮組織中,具有多種有益作用,包括抗氧化、抗糖化、離子螯合劑、傷口愈合促進劑和自由基清除劑[6]。研究[7]表明,肌肽具有抑制體內惡性細胞生長的潛力,被視為潛在的抗癌藥物。為了明確肌肽對膠質瘤的抗腫瘤作用,本研究探討了常氧和低氧條件下肌肽對人腦膠質瘤細胞增殖的影響及其潛在的分子機制,為膠質瘤的臨床治療提供新思路。
1.1 細胞培養人膠質瘤細胞系U251和U87分別購自中國典型培養物保藏中心和中國科學院細胞生物學研究所。DMEM購自美國Gibco公司;FBS購自澳洲CLARK公司;L-Glutamine(100×)和青霉素-鏈霉素(100×)購自上海碧云天生物技術有限公司。U251和U87細胞均在補充有10% FBS、1% L-谷氨酰胺和1%青霉素鏈霉素的DMEM中培養。用DMEM溶解肌肽并配置成500 mmol/L的溶液。細胞樣本分為常氧組、常氧+肌肽組、低氧組、低氧+肌肽組。常氧和低氧組加入適量完全培養基后分別放入常氧培養箱(21% O2、5% CO2、37 ℃)和低氧培養箱(1% O2、5% CO2、 37 ℃)中繼續培養。……