α-地中海貧血融合基因檢測(cè)的臨床應(yīng)用

魏云芳，唐健，張若鵬，3，何建萍

1.昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教研室，云南 昆明 650200；

2.昆明市婦幼保健院昆明學(xué)院附屬婦幼保健醫(yī)院醫(yī)學(xué)遺傳與產(chǎn)前診斷科，云南 昆明 650000；

3.大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，云南 大理 671000

地中海貧血也稱為珠蛋白生成障礙性貧血，是一種常見的單基因隱性遺傳性疾病，目前對(duì)該病尚無特異性治療方法。地中海貧血可分為α和β兩種類型，其分子機(jī)制與α和β珠蛋白基因發(fā)生改變引起珠蛋白合成異常繼而導(dǎo)致溶血性貧血的發(fā)生有關(guān)。人類α-珠蛋白基因定位于16 號(hào)染色體pl3.3，包括ζ2、ψζ1、ψα2、ψα1、α2和α1基因，由于ζ2和ψζ1基因間以及α1和α2 基因之間存在廣泛的同源序列，兩個(gè)ζ 和2 個(gè)α基因之間往往易發(fā)生不同程度的同源重組，這導(dǎo)致了人類珠蛋白基因拷貝的增加或減少[1-2]，因此，α-地中海貧血基因型包括東南亞型缺失(--SEA)、-α3.7和-α4.2缺失，QS、CS 和WS 點(diǎn)突變，甚至一些未知突變[3-4]。α2-珠蛋白融合基因地中海貧血于2013 年首次通過DNA 序列分析在湖南永州一個(gè)患有Hb H 病的2 歲女孩中被鑒定[5]，其在人群患病情況及分布還不得而知，目前常規(guī)試劑盒不包含該基因位點(diǎn)的檢測(cè)，無法滿足臨床對(duì)不同疾病類型進(jìn)行篩查需求。因此，本研究分別采用PCR-導(dǎo)流雜交法、反向點(diǎn)雜交法、缺口PCR (gap-PCR)以及高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)1例α2-珠蛋白融合基因血標(biāo)本，探討其在α-地中海貧血融合基因檢測(cè)中目前常規(guī)分子診斷方法的應(yīng)用效果，分析其可能存在的缺陷與不足。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 該病例來源于昆明市婦幼保健院2020 年1 月1 日至12 月31 日婚育體檢中心的α2珠蛋白融合基因樣本，籍貫為云南省昆明市祿勸縣，漢族，男性，22歲，既往體健，否認(rèn)輸血史，否認(rèn)家族遺傳病史，無貧血貌，知情同意并簽署相關(guān)同意書。……