急性冠脈綜合征患者血清HMGB1、LP-PLA2、IMA的表達水平及其與預后的關系

孟潔，蘇立貞，晉婕

1.西安高新醫院輸血科，陜西 西安 710075；

2.西安高新醫院生殖醫學科，陜西 西安 710075；

3.西安金域醫學檢驗所有限公司，陜西 西安 710018

急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)是臨床上常見的一類嚴重心血管疾病，主要是由于患者冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂繼發形成血栓而引起的嚴重冠脈狹窄甚至閉塞，最終導致不穩定型心絞痛、心肌梗死或者猝死[1]。由于ACS 起病急驟、進展迅速，具有較高的發病率和病死率，若未能及時治療，可導致嚴重并發癥，危及生命[2]。故早期進行診斷及治療對于改善ACS 患者預后具有重要意義。冠狀動脈造影術是ACS 診斷的金標準，但因其創傷性較大，患者依從性較低。血清學檢測由于快速、無創而被廣泛應用于臨床。高遷移率蛋白1(high-mobility group box-1，HMGB1)是一種內源性的促炎效應因子，對ACS患者病變程度及出現不良心血管事件具有一定預測價值[3]；脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein associated phospholipase A2，LP-PLA2)參與動脈粥樣硬化的發生發展，可以為ACS患者冠脈動脈狹窄程度提供參考依據[4]；缺血修飾蛋白(ischemia modified albumin，ⅠMA)隨ACS 患者病情程度加劇而顯著異常[5]。本研究主要檢測HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA在ACS患者中的表達水平，分析其與患者預后的關系，以期在疾病的診斷和預后方面提供一定依據從而輔助臨床診療工作。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2020年1～12月期間西安高新醫院收治的116 例ACS 患者作為觀察組，患者年齡40～70歲，平均(58.3±7.1)歲；男性66例，女性50例。納入標準：(1)符合《急性冠脈綜合征急診快速診治指南(2019)》[6]中的診斷標準；(2)首次確診且臨床資料完整。排除標準：(1)肝功能、腎功能嚴重障礙；(2)存在其他心臟類疾病；(3)合并血液系統疾病；(4)存在自身免疫系統疾病；(5)重大外傷史、手術史。對所有ACS 患者進行為期1 年的隨訪跟蹤，記錄不良心血管事件，主要包括再次發生心肌梗死、心血管循環再通手術、充血性心力衰竭、心源性猝死等。依據是否發生不良心血管事件將其分為預后良好組82 例和預后不良組34 例。選取同一時期健康體檢者100 例作為對照組，年齡40～70 歲，平均(57.9±6.9)歲；男性56 例，女性44例。兩組受檢者的平均年齡、性別比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 檢測方法 兩組受檢者均空腹抽取靜脈血5 mL 注入干燥試管，放置30 min 后顛倒混勻，再以3 000 r/min 的離心速度離心10 min，吸取樣本的上清液置于-80℃冰箱中保存。HMGB1 和ⅠMA 采用酶聯免疫(ELⅠSA)的方法進行檢測，試劑盒由伊萊瑞特公司提供，酶標儀采用科華ST-360。LP-PLA2檢測儀器為佳能TBA-FX8全自動生化分析儀，試劑盒由北京安圖生物工程有限公司生產。心肌肌鈣蛋白T(cardiac troponin T，cTnT)、肌 酸 激 酶 同 工酶-MB (creatine kinase isoenzyme-MB，CK-MB)采用安圖全自動免疫分析儀及其配套試劑盒進行檢測。所有操作均由同一檢驗師在同一臺儀器上完成，嚴格按照標準操作規程要求進行實驗室檢測。

1.3 統計學方法 應用SPSS22.0 統計軟件對所有檢測數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗。采用受試者工作曲線(ROC)分析各指標的診斷效能，采用Hanley-McNeil方法及Z檢驗比較ROC 曲線下面積(AUC)，采用Pearson 相關性分析各指標間的關系，采用Logistic 回歸方程分析預后影響因素。以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組受檢者的HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA水平比較 觀察組患者的血清HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA、cTnT、CK-MB水平明顯高于對照組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組受檢者的HMGB1、LP-PLA2、IMA水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGB1,LP-PLA2,and IMA levels between the two groups(±s)

表1 兩組受檢者的HMGB1、LP-PLA2、IMA水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGB1,LP-PLA2,and IMA levels between the two groups(±s)

組別觀察組對照組t值P值例數116 100 HMGB1(ng/mL)9.21±1.77 3.25±0.48 18.566 0.001 LP-PLA(ng/mL)330.58±65.73 131.47±32.29 19.229 0.001ⅠMA(U/mL)85.47±17.22 52.37±9.79 16.554 0.001 cTnT(μg/L)3.23±0.78 0.05±0.01 20.283 0.001 CK-MB(U/L)23.48±5.39 2.14±0.55 20.022 0.001

2.2 HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA對ACS患者的診斷效能 經ROC 分析結果顯示，HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA 三者聯合檢測診斷ACS 患者的曲線下面積(AUC)為0.863，靈敏度和特異度分別為88.1%、90.0%。三項聯合檢測的AUC明顯高于各項單獨檢測的AUC (Z1=1.858，P1=0.021；Z2=1.654，P2=0.016；Z3=1.457，P3=0.012)，見表2和圖1。

圖1 HMGB1、LP-PLA2、IMA診斷ACS患者的ROCFigure 1 ROC of HMGB1, LP-PLA2, and IMA in the diagnosis of ACS

表2 HMGB1、LP-PLA2、IMA對ACS患者的診斷效能Table 2 Diagnostic efficacy analysis of HMGB1,LP-PLA2,and IMA in patients with ACS

2.3 HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA與cTnT、CK-MB的相關性 經Pearson 相關性分析結果顯示，HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA與cTnT、CK-MB呈正相關(P＜0.05)，見表3。

2.4 不同預后患者的HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA水平比較 預后不良組患者HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA水平明顯高于預后良好組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表4。

表4 不同預后患者的HMGB1、LP-PLA2、IMA表達水平比較(±s)Table 4 Expression of HMGB1, LP-PLA2, and IMA in patients with different prognosis(±s)

表4 不同預后患者的HMGB1、LP-PLA2、IMA表達水平比較(±s)Table 4 Expression of HMGB1, LP-PLA2, and IMA in patients with different prognosis(±s)

組別預后不良組預后良好組t值P值例數34 82 HMGB1(ng/mL)10.56±2.01 8.64±1.59 20.334 0.001 LP-PLA2(ng/mL)378.44±72.69 310.73±61.88 23.211 0.001ⅠMA(U/mL)96.33±20.02 80.96±15.52 24.779 0.001

2.5 影響ACS 患者預后的因素 經多因素Logistic 回歸分析結果顯示，HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA均是ACS 患者預后不良的獨立危險因素(P＜0.05)，見表5。

表5 影響ACS患者預后因素的多因素Logistic回歸分析Table 5 Factors affecting prognosis of patients with ACS

3 討論

ACS是臨床上一類常見的心血管疾病，其病理基礎主要是冠狀動脈粥樣硬化的形成，若其形成斑塊不穩定則容易發生破裂、出血，進而誘發血栓形成[7]。隨著ACS 的發病年齡逐漸年輕化，且發病率逐年上升，已成為威脅人類健康的主要疾病之一[8]。盡管冠狀動脈介入手術取得了巨大進展，但部分患者仍然會發生不良心血管事件，影響患者預后。因此，積極尋求能夠早期診斷及判斷預后的血清學指標，對提高患者治愈率、改善預后具有重要作用。

HMGB1 是一種染色體結合蛋白，主要參與DNA的重組、轉錄等過程，當細胞壞死或受到刺激時，就會釋放到細胞外，成為一種損傷分子，引起組織或器官功能障礙[9]。HMGB1作為一種促炎介質，是通過增強機體的炎性反應進而參與斑塊的形成過程，因此檢測其在血清中的水平可反映斑塊易損性，預測心血管事件的發生[10]。江文科等[11]研究顯示，HMGB1 是診斷ACS 的重要指標，可在一定程度上反映疾病嚴重程度，在ACS發生發展過程中扮演重要角色。LP-PLA2是一種特異性血管炎癥因子，可與低密度脂蛋白結合后生成溶血卵磷脂以及氧化型游離脂肪酸，通過刺激炎癥因子及黏附分子活性參與動脈粥樣硬化斑塊形成過程，從而誘發血管內皮細胞損傷，導致心功能出現障礙[12]。祁景蕊等[13]指出，LP-PLA2水平越高，冠狀動脈血管病變程度就越嚴重，其存在不穩定斑塊的可能性就越大。ⅠMA是由肝臟合成的血清白蛋白，它主要是缺血組織在降解與修飾、缺血-再灌注的過程中與過渡金屬結合而產生，是一種特異性的心肌缺血性標志物，當心肌細胞受損導致功能異常時，其水平迅速上升[14]。章麗珠等[15]的研究顯示，ⅠMA可以早期檢測出心肌缺血，在ACS早期診斷中具有重要應用價值。本研究結果顯示，HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA 在ACS 患者中明顯升高，與上述研究結論相符，進一步提示這些指標與ACS的發生發展息息相關。有研究顯示，cTnT、CKMB診斷ACS的靈敏度僅為68.57%、64.7%[16-17]。盡管此次實驗室常規檢測顯示傳統心肌損害類標志物cTnT、CK-MB 針對ACS 的預測靈敏度不高，但利用了Pearson相關性進行分析后，筆者發現HMGB1、LPPLA2、ⅠMA與實驗室常規檢測項目cTnT、CK-MB呈正相關；同時利用ROC 曲線分析HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA對ACS的診斷效能，發現聯合檢測的靈敏度和特異度可達到88.1%、90.0%，達到理想水平。

根據預后情況將ACS患者進行分組后發現，預后不良組患者的HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA 水平明顯高于預后良好組患者，說明以上指標與疾病的預后密切相關。有研究指出，HMGB1的水平與PCⅠ術后的ACS患者預后顯著相關，HMGB1水平升高是ACS患者PCⅠ術后心肌損傷的危險因素[18]；李長龍等[19]根據ROC曲線預測預后，發現血清HMGB1 預測預后的曲線下面積為0.897。LP-PLA2作為心血管疾病發病風險增加的動態監測指標，是ACS的獨立風險因素[20]；張恒亮等[21]指出Lp-PLA2作為預測ACS患者發生不良心血管事件的曲線下面積為0.657。ⅠMA參與了人體心肌細胞的缺血、缺氧、酸中毒等過程，是ACS的危險因素，可用于ACS預后監測[22]。周秀等[23]發現，ⅠMA預測ACS患者心肌損傷的曲線下面積為0.821。以上研究均表明，HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA可作為ACS患者預后的監測指標。本研究利用Logistic 回歸分析發現HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA是ACS患者預后不良的獨立危險因素，正好印證了上述觀點，與上述研究結論也相符合。

綜上所述，血清HMGB1、LP-PLA2、ⅠMA 在急性冠脈綜合征患者中明顯升高，是其預后不良的獨立危險因素，聯合檢測有助于患者早期診斷和預后評估。但本研究也存在一些不足之處，首先，沒有進行前瞻性的設計，可能存在一定選擇偏倚，其次，為單中心研究，樣本來源受限，仍有待今后經多中心研究來驗證此次結論的正確性。