蛋白質(zhì)精氨酸殘基化學(xué)修飾酶PADs與PRMTs在人肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)

鄒 瑾，何向蕾，2，張 欣，2，陳日萍，張 宇，胡帥悅，應(yīng)士波*

1.杭州醫(yī)學(xué)院 公共衛(wèi)生學(xué)院，浙江 杭州 310012；2.浙江省人民醫(yī)院 杭州醫(yī)學(xué)院附屬人民醫(yī)院，浙江 杭州 310011

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常見的原發(fā)性肝癌類型[1-2]。最新數(shù)據(jù)顯示,2020年中國發(fā)病例數(shù)達(dá)41萬,死亡人數(shù)更是高達(dá)39萬[3]。肝細(xì)胞癌早期診斷困難,缺乏靶向藥物,經(jīng)治療的病例中位生存期也僅為1～1.5年[1]。蛋白質(zhì)精氨酸脫亞氨酶(protein arginine deiminases,PADs)是一類催化蛋白質(zhì)肽鏈中的精氨酸殘基轉(zhuǎn)化為瓜氨酸殘基的水解酶,而這種蛋白質(zhì)翻譯后修飾被稱為瓜氨酸化(citrullination)[4]。研究表明,PADs家族中PAD2和PAD4表現(xiàn)出細(xì)胞特異性的表達(dá)水平、活性和生物學(xué)效應(yīng),參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展[5]。蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(protein arginine methyltransferases,PRMTs)是一類催化蛋白質(zhì)精氨酸殘基發(fā)生甲基化修飾的同工酶[6]。PRMTs分為3種類型,其中PRMT1、PRMT5和PRMT7分別是各型PRMTs中具有代表性的酶,且與腫瘤發(fā)生發(fā)展也有密切聯(lián)系[7-8]。因此,PADs和PRMTs的催化位點(diǎn)都為蛋白質(zhì)精氨酸殘基,兩者可能存在競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,它們的相互作用可能在細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化與腫瘤發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中起著重要作用。

本研究通過細(xì)胞模型和病理組織探究PADs和PRMTs在肝癌細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)水平,并分析PADs催化的蛋白瓜氨酸化水平是否可能與PRMTs有關(guān),旨在為肝癌的診斷和臨床治療提供新的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞和組織:人正常肝細(xì)胞系LX-2(上海中喬新舟生物科技有限公司),人肝癌細(xì)胞系HepG2和Huh7(中科院上海細(xì)胞庫);肝癌病理組織樣本(浙江省人民醫(yī)院),已通過醫(yī)學(xué)倫理審查委員會(huì)審批并豁免知情同意(QT2022431)。……