吳鵬杰,張 偉,劉圣杰,朱 剛,馬 宏,孟令峰,張 政,張耀光,魏 東,楊 澤,萬 奔,王建業
[北京醫院(國家老年醫學中心/中國醫學科學院老年醫學研究院):1.泌尿外科;2.病理科;3.國家衛生健康委北京老年醫學研究所,北京 100730]
近年來我國前列腺癌的發病率快速上升,據報道北京、上海、廣州前列腺癌發病率超過膀胱癌,成為最常見的泌尿外科腫瘤[1]。大多數前列腺腫瘤生長緩慢,少部分患者發生進展,因此尋找預測腫瘤預后的分子標記成為臨床研究的焦點。有研究顯示P53基因突變參與腫瘤的發生發展,可是P53在前列腺癌中的表達與細胞增殖、腫瘤分期、細胞分級關系尚不完全清楚[2-3]。本文通過免疫組化的方法分析P53、Ki-67蛋白表達的臨床意義,為治療前列腺癌提供分子學參考依據。
1.1 臨床資料收集衛生部北京醫院泌尿外科行根治性前列腺癌切除術90例患者資料,所有患者術前均無淋巴和遠處轉移的證據,術前均未行輔助內分泌治療或放療。患者年齡52~79歲,平均(69.4±10.1)歲。90例患者中血PSA水平<10 ng/mL者54例、>10 ng/mL者36例;Gleason評分≥8分者21例、7分者39例、≤6分者30例;根據2002年美國癌癥聯合委員會(American Joint Committee on Cancer,AJCC) 的腫瘤TNM 臨床分期標準分類:pT2N0M0者66例,pT3~T4N0M0者24例。病理伴有神經血管癌栓浸潤者21例。
1.2 免疫組化
1.2.1染色方法 即用型P53、Ki-67抗體購于北京中杉金橋生物技術公司。采用兩步法做免疫組化研究。所有標本用10 g/L甲醛固定12~18 h,石蠟包埋存檔,4 μm石蠟切片,前列腺癌標本于腫瘤處取材,常規脫蠟,逐步入水,用質量濃度為3%的過氧化氫孵育,0.01 mmol/L PBS (pH=7.4) 沖洗3次,每次3 min,熱……