LSD1抑制劑聯合順鉑對宮頸癌CaSki細胞功能影響的研究

李蒙蒙,張麗榮,彭軍,陳瑩瑩,李廣太*

近年來,隨著表觀遺傳學的發展,腫瘤內部的調控機制漸趨清晰,表觀遺傳學中的組蛋白甲基化以及乙酰化修飾對多種腫瘤基因的表達造成影響,從而控制腫瘤的進程[1]。在腫瘤發生中常伴隨基因甲基化或組蛋白甲基化的缺失[2-3]。賴氨酸特異性組蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是一種表觀遺傳酶,它能催化組蛋白H3K4 位點去甲基化、參與多種腫瘤基因的激活,與腫瘤的發生發展存在密切聯系,目前已成為研究的熱點。LSD1與多種癌癥預后相關,并且已被建議作為腫瘤的治療靶點[4-7]。研究表明,LSD1抑制劑對晚期宮頸癌增殖及轉移的治療起到重要作用[8],可通過對宮頸癌抑癌基因的甲基化,實現宮頸癌基因的轉錄沉默,增強宮頸癌的治療效果[9]。

本研究通過LSD1抑制劑OGL002和順鉑聯合作用于宮頸癌CaSki細胞系,檢測LSD1以及其下游組蛋白的表達水平,最終通過比較單用藥和聯合用藥對宮頸癌細胞增殖、侵襲和凋亡水平的影響,從表觀遺傳學闡明聯合用藥的作用效果,以期為晚期復發宮頸癌患者的精準靶向治療提供實驗依據。

1 材料和方法

1.1 材料

人類宮頸癌細胞系CaSki購自美國ATCC細胞庫。LSD1特異性抑制劑OGL002購自美國Selleck Chemicals公司,注射用凍干型順鉑購自齊魯制藥有限公司,鼠源GAPDH單克隆抗體、兔源LSD1單克隆抗體、兔源H3單克隆抗體、兔源H3K4me1單克隆抗體、兔源H3K4me2單克隆抗體、羊抗兔二抗、羊抗鼠二抗均購自英國Abcam公司。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養與分組 將CaSki細胞培養于恒溫培養箱中,細胞培養基選擇含10%胎牛血清的1640培養基。……