葛根素減輕KKAy小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)

鄒 潔，張德德，陶 毅，趙 靜，王 瓊，徐乃佳

武漢市中醫(yī)醫(yī)院 內(nèi)分泌科, 湖北 武漢 430050

糖尿病(diabetes)是高血糖為特征的代謝性疾病，發(fā)病主要由胰島素分泌缺陷或其生物作用受損導(dǎo)致，近年呈現(xiàn)出年輕化發(fā)病趨勢(shì)[1]，該病伴發(fā)的肝、腎、血管等疾病嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。葛根素(puerarin,PUR)是提取自豆科植物野葛根中的單一成份黃豆甙元8-C-葡萄糖甙化合物。研究發(fā)現(xiàn)[2-3]，葛根素能夠擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)，抑制炎性反應(yīng)，降低血管內(nèi)皮損傷等作用。炎性因子及內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙與高血糖之間存在密切聯(lián)系，本實(shí)驗(yàn)通過分析葛根素對(duì)KKAy小鼠(2型糖尿病模型小鼠)血管內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)的影響，探討葛根素干預(yù)糖尿病血管內(nèi)皮損傷的相關(guān)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物：雄性KKAy小鼠(2型糖尿病模型小鼠)30只(SPF級(jí)，10周齡，23～27 g/只)，C57BL/6J健康小鼠[武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(鄂)2020-0001]。

1.1.2 藥品：葛根素(puerarin，PUR)注射液(2 mL：100 mg，百正藥業(yè)股份有限公司)；鹽酸二甲雙胍(metformin hydrochloride，MH)片(0.5 g/片，中美上海施貴寶制藥有限公司)。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白介素-1(interleukin-1,IL-1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)試劑盒(均北京方程生物有限公司)。血管細(xì)胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)抗體(均上海西唐生物科技有限公司)。TUNEL試劑盒、PCR試劑盒、BCA蛋白含量檢測(cè)試劑盒、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒(CST公司)。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物的分組及處理：將KKAy小鼠分為糖尿病(diabetes)組(高脂飼料喂養(yǎng)，每天灌胃0.9%氯化鈉溶液4.3 mL/kg)、二甲雙胍(MH)組(每天灌胃二甲雙胍200 mg/kg)及葛根素(PUR)組(每天腹腔注射葛根素注射液1.3 mL/kg)，以C57BL/6J小鼠為對(duì)照(control)組，每組各10只。……