利培酮通過影響Wnt/β-catenin信號(hào)通路誘導(dǎo)人成骨細(xì)胞系hFob1.19凋亡

龐 蘭，李佩璠，鄭 蕾*，王藝明*

1.貴州醫(yī)科大學(xué),貴州 貴陽 550004； 2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 精神科，貴州 貴陽 550004

非典型抗精神病藥物的廣泛應(yīng)用明顯提升了精神分裂癥患者精神癥狀的緩解率和社會(huì)功能的恢復(fù)率[1]。然而，有報(bào)道精神分裂癥患者服用非典型抗精神病藥會(huì)引起骨密度下降，使精神分裂癥患者發(fā)生骨折的風(fēng)險(xiǎn)明顯增高[2]。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于非典型抗精神病藥物對(duì)骨代謝的影響的研究多集中在由非典型抗精神病藥物引起的高泌乳血癥繼發(fā)引起骨質(zhì)疏松上[3]，而關(guān)于非典型抗精神病藥物是否對(duì)人成骨細(xì)胞直接起作用以及其影響人成骨細(xì)胞的分子機(jī)制的研究少有文獻(xiàn)報(bào)道。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)Wnt/β-catenin信號(hào)通路可以調(diào)控成骨細(xì)胞凋亡以及誘導(dǎo)成骨細(xì)胞發(fā)生，與骨腫瘤、骨質(zhì)疏松等疾病關(guān)系密切[4]。

基于目前研究基礎(chǔ)，本研究旨在探討非典型抗精神病藥是否誘導(dǎo)人成骨細(xì)胞凋亡以及是否與Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)，希望為非典型抗精神病藥物臨床應(yīng)用對(duì)人成骨細(xì)胞的影響提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞：人成骨細(xì)胞系(human osteoblast cell line，hFob1.19)(ATCC)。

1.1.2 藥品：利培酮(risperidone，Ris)(Sigma-Aldrich公司)。

1.1.3 主要試劑：RPMI-1640液體培養(yǎng)基(Gibco公司)；DSMO(Sigma-Aldrich公司)；CCK-8(東仁化學(xué)科技(上海)有限公司)；RNA提取試劑盒、PCR反轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR 熒光試劑盒[賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司]；兔抗羊β-catenin、Lamin B、BCL-2、BAX、MCL-1、caspase-3、cleaved caspase-3和β-actin(Cell Signaling Technology公司)；Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Biosciences公司)。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞的分組及處理：將收到的裝有hFob1.19細(xì)胞置于RPMI-1640培養(yǎng)基(包含15%胎牛血清、青霉素100 U/mL、鏈霉素100 μg/mL)混勻并接種到培養(yǎng)瓶，放入……