異鼠李素減輕糖尿病視網膜病變大鼠視網膜細胞凋亡

王 卉，蘇 憲，張贏贏，褚戰亞，孫朝暉，張金玲，張倩倩

石家莊市人民醫院 1.眼科； 2.門診部，河北 石家莊 050030

糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy，DR)是常見糖尿病并發癥，導致視力損害，DR發病的重要原因為視網膜神經細胞不可逆凋亡[1]。研究顯示，氧化應激、炎性反應等多種因素參與了DR病理生理過程，血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)等炎性因子參與血管內皮細胞及周細胞炎性反應和新血管生成，MAPK/NF-κB信號通路為炎性通路，在DR發生發展過程中發揮重要作用[2]。異鼠李素(isorhamnetin,ISO)是從沙棘、銀杏等植物中提取的黃酮類物質，具有抗氧化、抗炎、保護內皮細胞的作用，研究顯示[3]，異鼠李素可通過抑制NF-κB信號通路發揮抗炎作用，減輕高糖高脂誘導的胰島β細胞損傷。本研究旨在觀察異鼠李素對DR大鼠視網膜病變的影響，從MAPK/NF-κB信號通路探究異鼠李素對DR大鼠視網膜細胞凋亡的作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物：SPF級SD雄性大鼠(8～9周齡)，體質量180～220 g[中國醫學科學院醫學實驗動物研究所，動物生產許可證號：SCXK(京)2019-0011]，飼養條件：溫度22～25 ℃，濕度45%～55%。

1.1.2 藥物和試劑：異鼠李素(純度≥98%，脈鉑醫藥科技有限公司)；鏈脲佐菌素(streptozocin，STZ,Sigma-Aldrich公司)；羥苯磺酸鈣(依比威藥品有限公司)；蘇木精伊紅(HE)染色試劑盒和TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(索萊寶生物科技公司)；TNF-α、IL-1β、IL-6和ELISA檢測試劑盒(Abcam公司)；兔抗鼠VEGF、Bax和caspase-3抗體(碧云天生物科技有限公司)；p-p38 MAPK、p38 MAPK、p-NF-κB p65、NF-κB p65抗體(Cell Signaling Technology公司)。

1.2 方法

1.2.1 動物分組及處理：大鼠適應性飼養1周后，腹腔內注射STZ(60 mg/kg)進行造模[4]，每天1次，連續給藥3 d，對照組(control組)注射等量的檸檬酸緩沖液，給藥3 d后，尾靜脈取血檢測大鼠空腹血糖，此后每周檢測1次，連續24周空腹血糖>16.7 mmol/L則為造模成功[5]。將……