超聲造影血流灌注定量參數與腫瘤組織氧分壓相關性：實驗研究

馮玉儀，何楊成，金 海，何 艷，胡志文，羅 瓊，丘丹霞，柳建華

(華南理工大學附屬第二醫院超聲醫學科，廣東 廣州 510000)

腫瘤微環境對于治療腫瘤具有重要作用。腫瘤組織內血管結構異常，細胞快速增長，導致腫瘤長期處于缺氧狀態，組織氧分壓(oxygen partial pressure，PO2)<10 mmHg[1]，影響藥物或放射治療效果；同時腫瘤微環境又與腫瘤轉移、復發等密切相關[2-3]。治療前評估腫瘤微環境缺氧情況有助于制定個體化治療方案。近年來，超聲造影(contrast enhanced ultrasound，CEUS)快速發展，可實時、連續、多次觀察活體腫瘤組織內的血流灌注情況，并能定量分析腫瘤組織血流灌注強度[4-6]；其定量參數包括峰增強(peak enhancement，PE)、曲線下面積(area under curve，AUC)、腫瘤組織原始曲線增強上升斜率(Grad)及達峰時間(time to peak，TTP)等。本研究觀察CEUS定量參數與腫瘤組織PO2間的相關性。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料 GE LOGIQ E9超聲診斷儀，內置造影時間-強度曲線(time-intensity curve，TIC)分析軟件，配備ML6-15高頻線陣探頭。針式組織PO2測量儀主機購自上海塔望公司，PO2傳感器購自德國Presens公司。CEUS造影劑脂氟顯由陸軍軍醫大學第二附屬醫院超聲科研制，外觀為乳白色凝乳狀，核心氣體為全氟丙烷，平均粒徑2 μm，濃度為(4～9)×109/ml。微泡使用前由振蕩器振蕩45 s，CEUS用量為0.01 ml/kg體質量。HIF-1α抗體(NB100-105)購自NOVUS公司。

1.2 動物模型 30只雌性新西蘭大白兔購自廣東省實驗動物中心，平均體質量(2.5±0.5)kg，在24～26℃和45%～55%濕度下飼養7天及以上再行接種。VX2腫瘤組織購自中山大學細胞庫，于室溫條件下將二代腫瘤組織切成小塊(1 mm3)，與無菌生理鹽水混合形成VX2腫瘤組織懸濁液，取5 ml肌內注射至兔左后肢大腿外側淺肌層。在植入瘤塊后約第10天、腫瘤大小約10 mm時開始實驗。本研究方案由華南理工大學實驗動物委員會批準。

1.3 超聲引導下置入組織PO2傳感器 經耳緣靜脈注入2%戊巴比妥鈉20 mg/kg體質量麻醉荷瘤兔，待兔角膜反射消失后進行實驗。側臥位保定荷瘤兔，于左后肢外側備皮、消毒、鋪巾，以二維超聲觀察腫瘤大小、回聲等基礎情況；選擇顯示腫瘤最大切面，于超聲引導下以組織PO2傳感器進行穿刺，使傳感器針尖位于腫瘤外周，保持針尖與探頭平行，并以針尖標記觀察切面，固定超聲探頭(圖1)。……