青藤堿調控LncRNA BLACAT1對骨關節炎軟骨細胞增殖、凋亡的影響

陳 晨 鄭潤泉 李宗玉（中國人民解放軍聯勤保障部隊第960醫院骨科，濟南 250031）

骨關節炎是臨床上常見的一種慢性疾病，目前尚無骨關節炎有效治療藥物，軟骨細胞是關節軟骨的主要細胞，其通過維持細胞外基質的產生與酶促降解的平衡而發揮作用，骨關節炎發生過程中可產生軟骨細胞生長停滯、細胞損傷等，因而減輕軟骨細胞損傷成為重點，研究表明生物堿與植物的活性成分等具有抗氧化、抗炎等作用，并可減輕軟骨細胞損傷［1-4］。青藤堿是從中藥青風藤中提取的生物堿單體，具有抗炎、鎮痛等作用，研究表明青藤堿可減緩類風濕關節炎骨破壞的進程，但其作用機制尚未闡明［5］。LncRNA BLACAT1在骨關節炎骨髓基質干細胞中表達水平升高，并可通過靶向miR-142-5p而抑制細胞增殖［6］。但青藤堿是否可通過調控BLACAT1的表達從而發揮作用尚未可知。因此，本研究采用脂多糖（LPS）誘導軟骨細胞建立骨關節炎軟骨細胞損傷模型，探討青藤堿對LPS誘導的軟骨細胞增殖、凋亡、炎癥反應的影響及其對BLACAT1的調控作用。

1 材料與方法

1.1 材料青藤堿購自湖南正清制藥集團股份有限公司；人正常軟骨細胞購自北納生物；IFN-γ、TNF-α檢測試劑盒購自北京諾博萊科技有限公司；DMEM培養基、胎牛血清購自美國Gibco公司；Lipofectamine2000購 自美國Invitrogen公 司；si-NC、si-BLACAT1、pcDNA、pcDNA-BLACAT1購自廣州銳博生物科技有限公司；Trizol試劑購自大連寶生物工程有限公司；反轉錄試劑盒、SYBR Green試劑盒購自北京天根生化科技有限公司；CCK-8試劑購自日本同仁化學研究所；凋亡檢測試劑盒、LPS購自美國Sigma公司；……