1.湖南醫藥學院侗醫藥研究湖南省重點實驗室,湖南 懷化 418000;2.湖南醫藥學院基礎醫學院,湖南 懷化 418000;3.湖南醫藥學院藥學院,湖南 懷化 418000
馬卡列丙又稱毛秀才,為菊科植物顯脈旋覆花屬顯脈旋覆花Duhaldeanervosa(Wallich ex Candolle)A.Anderberg的全草,具有通經活絡止痛、祛風除濕、活血化瘀、消腫散血等作用,主要用于跌打損傷、骨折的治療,可顯著縮短骨折愈合的病程,是侗族從古至今常用的跌打損傷特效良藥[1-4]。迄今為止,從馬卡列丙藥材提取分離的化合物已報道有60多個,主要有揮發油類、甾體、萜類、黃酮等成分[5-8]。但是馬卡列丙促進骨折愈合相關的藥理活性研究未見報道,主要有抗炎、抗氧化等作用[9-11]。小鼠成骨細胞MC3T3-E1是研究骨形成的重要細胞模型,骨折愈合和骨質疏松癥相關藥物研究多采用該細胞進行藥效評價[12-13]。實驗將馬卡列丙的根莖粉碎后用不同的溶劑和方法得到8種提取物,利用小鼠成骨細胞對該提取物進行活性篩選,確定有活性的部位。實驗結果有助于侗藥馬卡列丙的進一步研究和開發,為其治療跌打損傷和促進骨折愈合的藥效物質基礎研究提供藥理實驗依據。
1.1 藥材及其制備 馬卡列丙藥材購自于云南,經湖南醫藥學院汪冶教授鑒定為菊科顯脈旋覆花Duhaldeanervosa(Wallich ex Candolle)A.Anderberg的根和根莖,其提取物制備方法如下所示。
1.1.1 揮發油和剩余水提物 藥材粉碎,過3號篩,稱取200 g,加入6倍量的純化水,采用2015版《中國藥典》2204揮發油測定法,蒸餾提取6 h,蒸餾液經油水分離器分離出油層,加10%的無水硫……