scFv-DEC205-Trap重組包涵體靶向抗原復性及過程的優化①

佟春玉 張喆林 王森 鄭小會 韓玉芳 崔玉東 宋博翠

（黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院，大慶 163000）

金黃色葡萄球菌已經成為全世界人類細菌疾病的罪魁禍首之一。金黃色葡萄球菌亞單位疫苗的研發主要從其致病性的毒力因子為出發點，本實驗選取的是金黃色葡萄球菌靶向RNAⅢ激活蛋白（target of RNAⅢactivating protein，TRAP）蛋白［1］。TRAP是一種膜相關的167個氨基酸所組成的蛋白，沒有跨膜結構域，在金黃色葡萄球菌中高度保守，且為金黃色葡萄球菌所特有［2］。金黃色葡萄球菌毒力因子的產生是通過組氨酸磷酸化TRAP的靶點和激活AGR基因位點來調節的。RNAⅢ激活蛋白（RAP）的磷酸化導致agr群體感應系統的激活，從而產生一種稱為RNAⅢ的調節性mRNA分子，并導致毒素的產生。因此，TRAP蛋白在金黃色葡萄球菌毒力致病性方面占據著極其重要的地位，在所有菌株中都是保守的，可作為葡萄球菌疫苗候選抗原。

雖然體液免疫是抵御金黃色葡萄球菌感染的重要措施，但這種抗體反應不足以清除細菌或減少炎癥反應，因此金黃色葡萄球菌疫苗要在體液免疫基礎上引起足夠強的細胞免疫才能抵御金黃色葡萄球菌的侵染，而樹突狀細胞（dendritic cell，DC）是能專職激活細胞免疫的抗原提呈細胞。DC是哺乳動物體內最強的抗原提呈細胞，唯一可以激活初始T細胞的抗原提呈細胞，將疫苗靶向到DC成為近年的研究熱點。DEC205是上個世紀末SWIGGARD等在小鼠樹突細胞表面發現的［3］。DEC205為C型凝集素受體，具有高效靶向性，能準確高效且特異地靶向提呈抗原。……