HMGB1/RAGE軸在結直腸癌肥大細胞浸潤中的作用機制研究

袁兆林 劉娣 朱緒鋒（滕州市中心人民醫院檢驗科，滕州 277599）

結直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，多發于40～70歲中老年男性，隨著病情發展患者會出現便秘、便血及局部腹痛等癥狀。研究發現，腫瘤組織中肥大細胞浸潤情況與腫瘤分化、轉移等過程密切相關［1-2］。KOMI等［3］報道，多種腫瘤（尤其是惡性黑色素瘤、乳腺癌和結直腸癌）中均存在肥大細胞浸潤，與免疫細胞、腫瘤細胞和細胞外基質相互作用，重塑腫瘤微環境，釋放促血管生成因子，誘導新生血管形成，并釋放基質金屬蛋白酶促進腫瘤侵襲，創造利于腫瘤生長和轉移的條件。高遷移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）是一種非組蛋白染色體結合蛋白，可與相應細胞表面天然受體結合，如晚期糖基化終產物受體（receptor of advanced glycation end products，RAGE），引起炎癥反應［4-5］。QIAN等［6］研究報道，HMGB1/RAGE信號在炎癥驅動的癌變中起不可或缺作用，HMGB1可促進結直腸癌細胞增殖，介導RAGE激活，而RAGE與淋巴結轉移和TNM分期密切相關。本研究擬構建結直腸癌小鼠模型，探究HMGB1/RAGE軸對結直腸癌肥大細胞浸潤的作用及機制，為結直腸癌治療靶點的深入研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1材料人結直腸癌細胞SW837（上海ATCC細胞庫）；雄性BALB/c裸鼠（6～8周齡，廣東省醫學實驗動物中心）；人HMGB1 shRNA和NC shRNA慢病毒表達載體（上海吉凱基因化學技術公司）；NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC，碧云天生物科技有限公司）；甲苯胺藍染色液、蘇木素染色液（北京萬佳首化生物科技有限公司）；兔抗小鼠Tryptase抗體、兔抗小鼠HMGB1抗體、兔抗小鼠RAGE抗體、兔抗小鼠NF-κB p65抗體、羊抗兔IgG（HRP）抗體（上海艾博抗貿易有限公司）；……