天山雪蓮口服液對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療作用及其機(jī)制研究①

王靈銳 叢珊 王鈺銘 張晨曦 羅劍 羅莉（新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，烏魯木齊 830000）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種發(fā)病機(jī)制尚不明確的慢性自身免疫性疾病，主要病理表現(xiàn)為持續(xù)性多關(guān)節(jié)滑膜炎癥反應(yīng)、進(jìn)行性的軟骨和骨骼的破壞甚至關(guān)節(jié)功能喪失［1］。RA在成年人群中的患病率為0.5%～1%，以女性患者居多［2］。RA的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其中滑膜組織增生是引起RA軟骨和骨骼破壞的最重要因素。最新研究發(fā)現(xiàn)，滑膜成纖維細(xì)胞自噬紊亂是RA的重要發(fā)病機(jī)制之一，在膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（collagen-induced arthritis，CIA）大鼠模型中，滑膜成纖維細(xì)胞（RA synovial fibroblasts，RASFs）自噬水平升高，進(jìn)而促進(jìn)其增殖，最終導(dǎo)致滑膜增生，通過抑制滑膜組織自噬水平可減輕滑膜增生［3］。天山雪蓮（sasussured involucrata，SI）是中國新疆天山西部地區(qū)的稀有草本植物，多年來常用于RA的治療［4］。天山雪蓮口服液（SI Oral Liquid，SIOL）主要由SI提取物組成，目前已廣泛應(yīng)用于RA的臨床治療，在改善RA患者關(guān)節(jié)疼痛、晨僵、關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)壓痛方面效果明顯［5］，然而其作用機(jī)制尚不明確。本研究通過建立CIA大鼠模型，從調(diào)節(jié)自噬角度，進(jìn)一步探討SI治療RA的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)雄性SD大鼠50只，鼠齡6～7周，體質(zhì)量（200±20）g，購自新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。

1.1.2主要試劑與儀器天山雪蓮口服液（新疆天山蓮藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20190901）；雷公藤多苷片（黃石飛云制藥有限公司，批號(hào)：20200901）；牛源性Ⅱ型膠原蛋白（bovine typeⅡcollagen，CⅡ，Chondrex，Inc公司，批號(hào)：#20022）；弗氏完全佐劑（Sigma公司，CFA，批號(hào)：#SLCC6223）；JNK抗體、p-JNK抗體（Cell Signaling Technology公司，批號(hào)：#9252、#4668）；Bcl-2抗 體（Abcam公 司，批 號(hào)：ab59348）；Beclin-1抗體、LC3-Ⅱ抗體、β-actin抗體、辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgG（Proteintech公司，批號(hào)：

11306-1-AP、14600-1-AP、20536-1-AP、SA00001-2）；BCA蛋白定量試劑盒（索萊寶公司，批號(hào)：No.20210419）；……