2019—2021 年廣西梧州市羊傳染病的檢測與分析

李曉玲，謝麗華 *，肖萍，王健文，莫奇初，嚴珮珊，吳穎航，黃治權，林嘉敏

（1.藤縣埌南鎮水產畜牧獸醫站 廣西梧州 543304；2.梧州市動物疫病預防控制中心 廣西梧州 543002；3.藤縣嶺景鎮水產畜牧獸醫站 廣西梧州 543309；4.藤縣新慶鎮水產畜牧獸醫站 廣西梧州 543307；5.梧州市漁業資源養護中心 廣西梧州 543002）

羊主要傳染病有口蹄疫（foot and mouth Disease，FMD）、小反芻獸疫（peste des petits ruminants，PPR）、布魯氏菌病（brucellosis）等。口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄類動物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病，臨床以唇舌、齒齦、蹄踵、乳房等部位出現水皰為特征。小反芻獸疫，是由小反芻獸疫病毒引起的一種急性病毒性傳染病，臨床以發熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征。FMD、PPR 均是我國一類動物疫病和強制免疫的病種。布魯氏菌病是由細胞內寄生的布魯氏菌引起的一種人獸共患病，該菌侵害淋巴系統和生殖系統，導致母畜流產和公畜睪丸炎。上述三種羊病不僅對羊健康危害巨大，同時也是其他偶蹄、小反芻動物甚至人類傳染病的感染來源，嚴重威脅畜牧業或人體健康，加強監測具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1）免疫疫苗。口蹄疫O 型滅活疫苗、小反芻獸疫弱毒疫苗，均為政府采購疫苗。

2）樣品數量。采集2019—2021 年梧州市七個縣（市、區）養殖場戶、屠宰場羊血清8,691 份，羊眼結膜棉拭子和淋巴結、脾、肺等組織樣品1,920 份。

3）儀器設備。帝肯Sunrise 酶標儀、ABI Q5 實時熒光PCR 儀、賽默飛二級生物安全柜等。

4）檢測試劑。O 型口蹄疫液相/固相阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒（蘭州所/金諾）、小反芻獸疫競爭ELISA 抗體檢測試劑盒（青島立見）、布病虎紅平板凝集試驗抗原（青島立見）、布病競爭ELISA抗體檢測試劑盒（青島立見）、小反芻獸疫病毒實時熒光RT-PCR 檢測試劑盒（深圳梓健）。

1.2 方法

1）口蹄疫免疫和抗體檢測。規模場羔羊28～35 日齡首免，一個月后二免，以后每隔4 個月免疫一次。散養戶每年春秋兩季集中免疫，每月對新增補欄免疫。免疫21d 后，采集血清檢測抗體。參照GB/T18935-2018 口蹄疫診斷技術液相阻斷ELISA 檢測方法，羊血清抗體效價≥27 判定為免疫合格個體；或使用固相阻斷ELISA 檢測方法，血清抗體陽性，判定為免疫合格個體。免疫合格個體數量占群體總數的70%（含）以上，判定免疫合格群體。

2）小反芻獸疫免疫和抗體、病毒檢測。新生羔羊1 月齡以后免疫1 次。免疫1～3 個月內，采集血清檢測抗體。參照GB/T27982—2011 小反芻獸疫診斷技術競爭ELISA 檢測方法，結果陽性判定為免疫合格個體。免疫合格個體數量占群體總數的70%（含）以上，判定免疫合格群體。病原學樣品參照GB/T27982—2011 小反芻獸疫診斷技術實時熒光RT-PCR 方法檢測小反芻獸疫病毒。

3）布魯氏菌病非免疫檢測和陽性剔除。采集血清，參照GB/T 18646—2018 動物布魯氏菌病診斷技術及虎紅平板凝集試驗初篩檢測，陽性樣品用競爭酶聯免疫吸附試驗（cELISA）進行復核。確診陽性動物按照農業農村部布魯氏菌病防治技術規范予以撲殺、無害化處理。

2 結果

2.1 口蹄疫免疫和抗體檢測情況

2019—2021 年累計免疫羊口蹄疫9.13 萬只次，每年應免免疫密度達100%。平均群體免疫合格率為91.18%，個體免疫合格率為89.05%（表1）。

表1 羊口蹄疫免疫和抗體檢測情況

2.2 小反芻獸疫免疫和抗體、病毒檢測情況

2020—2021 年累計免疫羊小反芻獸疫7.75 萬只次，每年應免免疫密度達100%。平均群體免疫合格率為96.52%，個體免疫合格率為95.01%。病原學檢測樣品1920 份病毒均為陰性（表2）。

表2 小反芻獸疫免疫和抗體、病毒檢測情況

2.3 布魯氏菌病非免疫抗體檢測情況

2019—2021 年累計監測羊布魯氏菌病場點154 個次、羊血清3,319 份，群體陽性率為0.65%，個體陽性率為0.03%（表3）。

表3 布魯氏菌病非免疫抗體檢測情況

3 討論

本研究采用最新國家標準診斷方法，使用權威機構或進口診斷試劑開展羊病檢測。其中，蘭州所口蹄疫改進型液相阻斷ELISA試劑盒、韓國金諾口蹄疫固相阻斷ELISA 試劑盒在廣西疫控機構廣泛使用，檢測時間短，試劑穩定，必要時采用液相、固相互相驗證，確保準確性。青島立見小反芻獸疫競爭ELISA 試劑盒是診斷國家外來性疫病-小反芻獸疫的可靠試劑，小反芻獸疫病毒熒光RT-PCR 方法較常規RT-PCR 方法更為敏感、快速。布魯氏菌病檢測采用平板凝集初篩、競爭ELISA 復核方式，既能提高效率，又能實施確診，且布病ELISA 確診方法相對于傳統試管凝集試驗，減少人為主觀誤差，縮短反應時間。本研究檢測數據可靠，為廣西梧州市口蹄疫、小反芻獸疫、布病防控提供科學支撐。

當前，口蹄疫、小反芻獸疫防治采用強制免疫方法，免疫密度和抗體水平是防控效果的重要指標。梧州市2019—2021 年羊飼養量介于2.97～3.86 萬只之間，口蹄疫、小反芻獸疫免疫數量分別達到2.55～3.39 萬只和2.15～3.01 萬只，個體免疫抗體合格率分別為85.42%～91.74%和90.98%～97.3%，群體免疫合格率分別為88.37%～94.29%和95.0%～97.67%，小反芻獸疫病毒檢測均為陰性。除去免疫保護期內、未達免疫日齡或因病不宜免疫等客觀因素外，免疫密度均達到100%，免疫抗體合格率均遠超過國家規定的70%最低保護線要求。監測結果表明，梧州市羊口蹄疫和小反芻獸疫免疫效果良好，政府采購疫苗效果確切，可以阻斷相應病種的大面積流行。但也需要注意，口蹄疫、小反芻獸疫每年都有免疫不合格的場群，特別是口蹄疫的個體和群體合格率不穩定，仍然存在散發感染傳播的潛在風險。

近年來，我國布魯氏菌病流行呈上升趨勢。根據《國家布魯氏菌病防治計劃》（2016—2020 年）顯示，2015 年全國布病重點地區22 個縣248 個定點場群的羊布魯氏菌病個體陽性率達到3.3%、群體陽性率達到34%。廣西梧州市2019 年監測羊1,647 只，布病陽性1 只，個體陽性率為0.06%，群體陽性率為1.56%。監測結果表明，2019 年以來梧州市羊只出現布病感染情況，但數量不多，以零星個體陽性為主，2020—2021 年未發現感染情況，羊群布病處于穩定控制標準（個體陽性率0.1%）以內。隨著廣西大力發展牛羊產業政策出臺，牛羊跨區域調運將愈發頻繁，不按規定調運、檢疫和隔離觀察可能成為輸入性布魯氏菌病的主要因素。因此，持續加強布魯氏菌病監測，防止布病輸入和傳播擴散顯得尤為重要。