朱文瀟,王向陽,劉永輝,孔 亮,崔宏勛
(河南省洛陽正骨醫(yī)院,河南 鄭州 450016)
近年來,骨折已經(jīng)成為影響我國(guó)居民健康的重要因素,給社會(huì)、家庭造成沉重負(fù)擔(dān)[1]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,骨折的治療需內(nèi)外兼治,正如“肢體損于外,則氣血傷于內(nèi),營(yíng)衛(wèi)有所不慣,臟腑由之不和”[2]。平樂三七接骨丸是平樂郭氏正骨治療骨折的傳統(tǒng)藥物,該方由三七、乳香、沒藥、當(dāng)歸、自然銅等10余味中藥組成,臨床應(yīng)用多年,能顯著緩解患者骨折后疼痛及縮短愈合時(shí)間,療效較好,但其具體機(jī)制尚不明確。本研究將三七接骨丸作用于標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物骨折模型,觀察三七接骨丸對(duì)骨折愈合過程中血清及骨折端骨痂轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(Transforming growth factor-β,TGF-β)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bone morphogenetic proteins,BMPs)表達(dá)的調(diào)控,從細(xì)胞分子水平初步闡釋三七接骨丸促進(jìn)骨折愈合的作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供進(jìn)一步的理論支持。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:普通級(jí)新西蘭大白兔[動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(蘇)2017-0011]72只由南京市江寧區(qū)青龍山動(dòng)物繁殖場(chǎng)提供,雌雄各半,平均體重(2.5±0.5)kg。全部動(dòng)物在河南省中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行常規(guī)喂養(yǎng),自由進(jìn)食飲水,室溫25 ℃,濕度50%~80%。
1.1.2 主要試劑及儀器:TGF-β1試劑盒(上海雅吉生物公司),BMP試劑盒(上海科興生物科技公司),總RNA抽提試劑(Takara生物公司)。熒光PCR儀(型號(hào)CFX Connect,伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司),超高靈敏度化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)(型號(hào)ChemiDocTM XRS+,伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司),全自動(dòng)生化分析儀(型號(hào)AU5800,Beckman Coulter公司)。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 實(shí)驗(yàn)藥物:平樂三七接骨丸(豫藥制字Z04030007)、骨肽片(國(guó)藥準(zhǔn)字H20058927)均由河南省洛陽正骨醫(yī)院藥房統(tǒng)一提供。……