乳腺癌MRI征象與ER、Her?2及Ki?67生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系

盧艷麗 萬(wàn)宏燕 吳俊

乳腺癌是臨床婦科最常見的惡性腫瘤，具有高發(fā)病率、高死亡率的特征［1］。近年來(lái)，乳腺癌發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，且逐漸年輕化，對(duì)女性生命安全造成嚴(yán)重威脅。影像學(xué)檢查是臨床診斷乳腺癌常用的輔助方法，其中磁共振成像（Magnetic reso?nance imaging，MRI）因具有高軟組織分辨率、多方面成像等優(yōu)勢(shì)在乳腺癌的診斷中得以廣泛應(yīng)用［2］。隨著MRI 技術(shù)的發(fā)展和廣泛普及，乳腺癌MRI 征象與其病理學(xué)之間的關(guān)系備受關(guān)注。理論上來(lái)說(shuō)，基因及細(xì)胞因子的存在與表達(dá)誘發(fā)的病理改變均可通過影像學(xué)方法呈現(xiàn)。相關(guān)學(xué)者認(rèn)為，乳腺癌MRI 征象與雌激素受體（estrogen recep?tor，ER）、人表皮生長(zhǎng)因子受體?2（Human epider?mal growth factor receptor?2，Her?2）等因子表達(dá)可能存在一定相關(guān)性［3］。本研究通過分析乳腺癌患者的臨床資料，探討其ER、Her?2 及核蛋白抗原（Ki?67）表達(dá)情況，并分析上述指標(biāo)與MRI 征象的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年4月至2021年7月北京市隆福醫(yī)院收治的94 例乳腺癌患者，均為女性，平均年齡為（49.68±8.24）歲；臨床分期：Ⅰ期15 例，Ⅱ期57 例，Ⅲ期22 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，且經(jīng)手術(shù)或病理檢查確診；影像學(xué)資料和病理資料無(wú)丟失或缺損；既往無(wú)手術(shù)史；年齡>18 歲，且無(wú)意識(shí)障礙者。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在MRI 檢查禁忌癥者；存在自身免疫疾病或全身感染性疾?。徊溉槠诨蛉焉锲谠袐D；循環(huán)功能嚴(yán)重障礙、肝腎功能嚴(yán)重?fù)p傷者。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，受試者或家屬已簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 MRI 檢查

設(shè)備：3.0T MRI（GE Healthcare，750W，Waukesha，WI）掃描儀。選用7 通道專用乳腺相控陣表面線圈。患者取俯臥位，將患者兩個(gè)乳房垂于空洞內(nèi)。對(duì)患者進(jìn)行T2 壓脂，軸位TIWI、T2WI 序列，彌散加權(quán)成像（DWI）。T1WI 平掃、T2WI 平掃及脂肪抑制掃描層厚<1.5 mm，單次掃描時(shí)間不超過2 min。常規(guī)平掃+Gd?DTPA 試劑行增強(qiáng)掃描。掃描完后將圖像進(jìn)行后處理，繪制時(shí)間?信號(hào)強(qiáng)度曲線（TIC），TIC 的層面設(shè)定感興趣區(qū)（ROI）選在強(qiáng)化最為顯著且曲線性質(zhì)最差的區(qū)域，按照Alonso 等［5］的研究標(biāo)準(zhǔn)分為流入型（Ⅰ型），平臺(tái)型（Ⅱ型），流出型（Ⅲ型）。最后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得出最終診斷結(jié)果。MRI 圖像由兩名或兩名以上經(jīng)驗(yàn)豐富、高年資診斷醫(yī)師采用雙盲法在不知病理結(jié)果的情況進(jìn)行閱片，重點(diǎn)觀察腫瘤大小、分級(jí)、類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及強(qiáng)化形式等特征。

1.2.2 免疫組化學(xué)檢測(cè)

兔抗人ER 免疫組化單克隆抗體、鼠抗人Her?2、Ki?67 單克隆抗體均由美國(guó)Epitomics 公司提供。鏈酶菌抗生物素蛋白?過氧化物酶連接（SP）免疫組化試劑盒、DAB 試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

收集上述94 例患者術(shù)后癌組織（乳腺癌組）及距瘤體5 cm 以上的癌旁組織（癌旁組織組）。各組織標(biāo)本均脫水，經(jīng)10%甲醛固定，二甲苯脫蠟；常規(guī)石蠟包埋，5 μm 連續(xù)厚切片。根據(jù)S?P 免疫組化染色法對(duì)ER、Her?2、Ki?67 進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)過程嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。一抗陰性對(duì)照使用PBS（磷酸鹽緩沖液）進(jìn)行代替。

結(jié)果判定［6］：采用雙盲法對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定，即根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞在全部組織細(xì)胞中占比及陽(yáng)性細(xì)胞染色強(qiáng)度判定：①按顯色細(xì)胞數(shù)計(jì)分，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0 分；陽(yáng)性細(xì)胞<10%為1 分，10%～50%為2分；50%～75%為3 分；>75%為4 分。②按細(xì)胞著色程度計(jì)分，0 分為無(wú)色，1 分為淡黃色，2 分為棕黃色，3 分為黃褐色。每張切片取5 個(gè)高倍視野。兩類分?jǐn)?shù)相乘總分<3 分為陰性，≥3 分為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）表示；計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)；采用雙變量相關(guān)性分析乳腺癌MRI征象與ER、Her?2 及Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性；以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組織中ER、Her?2、Ki?67 表達(dá)情況

乳腺癌組ER、Her?2、Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于癌旁組織組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1、圖1。

圖1 免疫組化圖（SP，×400）Figure 1 Immunohistochemical map（SP，×400）

表1 不同組織中ER、Her?2、Ki?67 表達(dá)情況［n（%）］Table 1 Expression of ER，Her?2 and Ki?67 in different tissues［n（%）］

2.2 MRI 結(jié)果

94 例患者均為浸潤(rùn)型乳腺癌。MRI 檢查顯示腫瘤直徑>2 cm 者52 例；形態(tài)不規(guī)則40 例；邊緣不光整55 例，呈毛刺征；分葉征33 例；早期環(huán)形強(qiáng)化71 例；動(dòng)態(tài)曲線分型：Ⅰ型8 例，Ⅱ型51 例，Ⅲ型35 例；內(nèi)部壞死51 例。典型病例。見圖2。

圖2 乳腺癌MRI 圖像Figure 2 Breast cancer MRI images

2.3 94 例乳腺癌MRI 征象與ER、Her?2、Ki?67 表達(dá)情況的關(guān)系

ER 陽(yáng)性表達(dá)者形態(tài)不規(guī)則、毛刺征、早期環(huán)形強(qiáng)化占比明顯高于ER 陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Her?2 陽(yáng)性表達(dá)者形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)部壞死占比高于Her?2 陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)者毛刺征、分葉征占比高于Ki?67 陰性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 94 例乳腺癌MRI 征象與ER、Her?2、Ki?67 表達(dá)情況的關(guān)系［n（%）］Table 2 Relationship between MRI signs and expression of ER，Her?2 and Ki?67 in 94 cases of breast cancer［n（%）］

2.4 乳腺癌MRI 征象與ER、Her?2 及Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性分析

腫瘤形態(tài)、邊緣、強(qiáng)化形式與ER 陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05）；邊緣與Ki?67 呈正相關(guān)（P<0.05）；內(nèi)部壞死、形態(tài)與Her?2 陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05）。見表3。

表3 乳腺癌MRI 征象與ER、Her?2 及Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis of breast cancer MRI signs and positive expression of ER，Her?2 and Ki?67

3 討論

王月波等［7］研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌生物學(xué)行為與組織病理學(xué)改變是乳腺癌影像學(xué)表現(xiàn)的基礎(chǔ)。ER、Her?2 及Ki?67 等生物學(xué)指標(biāo)可一定程度上反映乳腺癌的生物學(xué)行為及患者預(yù)后。探討乳腺癌影像學(xué)征象與分子生物學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，可有效預(yù)測(cè)乳腺癌的侵襲性，為患者臨床治療方案選擇及預(yù)后評(píng)估提供可靠依據(jù)。

相關(guān)研究證實(shí)，ER 的表達(dá)與癌組織類型存在密切聯(lián)系，若癌細(xì)胞的分化程度較高時(shí)，ER 陽(yáng)性表達(dá)率會(huì)降低［8］。胡幸等［9］亦指出，在乳腺癌中，ER有無(wú)表達(dá)及表達(dá)程度可有效評(píng)估患者臨床療效及預(yù)后。Her?2 是人體表皮生長(zhǎng)因子之一，主要參與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖及分化等過程，可促使蛋白多度表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生異型增生，與腫瘤進(jìn)展情況有關(guān)，對(duì)腫瘤預(yù)后具有很好的預(yù)測(cè)作用［10］。Ki?67 是一種核抗原，目前病理學(xué)普遍將Ki?67 指數(shù)列為增殖標(biāo)志物來(lái)評(píng)估腫瘤增殖能力，是公認(rèn)的細(xì)胞增殖活性標(biāo)志物。Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)率高者乳腺癌細(xì)胞惡性程度高，細(xì)胞增殖活躍，因此腫瘤生長(zhǎng)速度快、侵襲性強(qiáng)，預(yù)后較差。本研究中，上述因子在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于癌旁組織，與Ramasamy等［11］報(bào)道結(jié)果相符，說(shuō)明ER、Her?2 及Ki?67 在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。

在乳腺癌MRI 檢查中，乳腺癌腫瘤形態(tài)、邊緣、強(qiáng)化特征是較為重要的診斷點(diǎn)［12］。本研究結(jié)果顯示，ER 與腫瘤形態(tài)、邊緣、強(qiáng)化形式具有顯著相關(guān)性，形態(tài)不規(guī)則、邊緣有毛刺、非環(huán)形強(qiáng)化者ER 陽(yáng)性表達(dá)率較高。Ikink 等［13］報(bào)道指出，乳腺癌腫瘤形態(tài)不規(guī)則、邊緣有毛刺征者，ER 陽(yáng)性表達(dá)率高。邊緣毛刺腫塊通常被認(rèn)為是惡性腫瘤，反映了腫瘤對(duì)周圍的浸潤(rùn)，具有一定侵襲性。本研究發(fā)現(xiàn)，Ki?67 與腫瘤邊緣亦存在顯著相關(guān)性，與Schueler 等［14］報(bào)道結(jié)果一致。上述研究表明，Ki?67、ER 陽(yáng)性表達(dá)可能提示腫瘤惡性程度高，患者預(yù)后較差。國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道顯示，乳腺癌MRI 征象除形態(tài)不規(guī)則、邊緣毛刺征外，腫瘤內(nèi)部還易出現(xiàn)壞死時(shí)，可提示腫瘤生長(zhǎng)迅速，內(nèi)部供血不全，具有侵襲性［15?16］。本研究中，MRI顯示腫瘤內(nèi)部有壞死者，Her?2 陽(yáng)性表達(dá)率更高。進(jìn)一步相關(guān)性分析顯示，內(nèi)部壞死與Her?2 陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)。表明Her?2 陽(yáng)性表達(dá)者，腫瘤內(nèi)部出現(xiàn)壞死的幾率可能更高，需引起重視?？紤]其原因可能與Her?2 高表達(dá)的乳腺癌中，Her?2 抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖，腫瘤生長(zhǎng)迅速，腫瘤內(nèi)部易由于血供相對(duì)缺乏而出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良性壞死有關(guān)［17］。

綜上所述，乳腺癌患者M(jìn)RI征象與ER、Her?2及Ki?67 陽(yáng)性表達(dá)存在一定的相關(guān)性，MRI 征象與ER、Her?2 及Ki?67 水平在預(yù)測(cè)乳腺癌生物學(xué)特性中具有一定指導(dǎo)價(jià)值。