IRE1α缺陷通過上調內質網鈣穩態蛋白降低軟骨細胞的自噬功能

軟骨細胞直接參與軟骨生長、發育及軟骨組織正常功能的維持。當軟骨遭受機械、損傷、衰老、營養物質缺乏時，會引發細胞產生一系列響應性保護反應，其中內質網應激在維持細胞穩態方面發揮著重要作用。自噬作為真核細胞內另一種保護機制，通過溶酶體介導的蛋白質降解途徑，吞噬和清除受損的細胞器、錯誤折疊蛋白質及其他大分子物質等，幫助細胞執行正常功能。研究表明，內質網應激和細胞自噬互為因果、互相影響、協同完成細胞正常功能的執行和穩態的維持，但二者之間具體的調控機制還不清楚。本研究旨在闡明軟骨細胞中內質網應激關鍵調控分子肌醇依賴性激酶1α（IRE1α）如何通過內質網鈣穩態蛋白（CHERP）和鈣離子信號影響自噬，為進一步探究內質網應激與自噬的相互調控機制奠定基礎，為軟骨發育的機制探究提供新的思路，也可能為骨軟化癥、軟骨發育不全等疾病的防治尋找到重要突破口和靶分子。

惠州市根除Hp處方大數據分析可見，單獨考慮“三聯療法”或“四聯療法”標準，“三聯療法”、“四聯療法”根除Hp處方的使用率在2010年較低，2016年，基本“三聯”處方率達到35.88%，“四聯”處方率達到15.53%，說明惠州市的根除Hp處方正在逐步的規范化。見表3、圖4。

1 材料和方法

1.1 材料

人軟骨細胞C28/I2 由美國紐約大學Professor Chuanju Liu惠贈。DMEM、DMEM/F12培養基（BI）；抗體：IRE1α（CST）、GAPDH，XBP1（u+s）、Nrf2、PERK、p-PERK、β-actin、p-IRE1、LC3I/Ⅱ（CST，Proteintech）；抑制劑和激動劑：4μ8c、雷帕霉素（Rapa）、巴佛洛霉素A1（Bafilomycin A1）、衣霉素（TM）（MCE）、SYBR qPCR mix（Vazyme）、自噬雙熒光病毒（漢恒生物）、PVDF膜（Millipore）、Ⅱ型膠原酶（Worthington）、小鼠基因組提取試劑盒（Bimake）、RNA提取試劑盒（Bioteke）ambion、八連管（Thermo scientific）、鈣離子熒光探針（Beyotime）、Ripa裂解液（強）（Beyotime）、HiScriptII Q RT SuperMix逆轉錄（Vazyme）。……