低分子肝素鈣聯(lián)合硫酸鎂對重度子癇前期患者凝血功能及細胞凋亡的影響

劉欣

（遼寧省營口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院藥劑科，遼寧 營口 115000）

子癇前期是孕婦妊娠20 周后出現(xiàn)的一種妊娠期高血壓疾病[1]，因重度子癇前期患者病情危重、進展迅速，胎兒的生長可能受到影響，甚至導(dǎo)致患者心力衰竭，因此，及時采取降血壓、利尿等手段極為重要。硫酸鎂是目前臨床上治療子癇的一線藥物，雖具有抗痙攣、鎮(zhèn)靜等功效，但單一用藥療效欠佳，而低分子肝素鈣可發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，通過抗血栓形成改善胎盤血液循環(huán)[2]。目前，低分子肝素鈣、硫酸鎂聯(lián)合治療重度子癇前期患者的相關(guān)研究較少?；诖耍狙芯窟x取本院收治的70例重度子癇前期患者作為研究對象，旨在探討低分子肝素鈣聯(lián)合硫酸鎂對重度子癇前期患者凝血功能及細胞凋亡的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019 年1 月至2020 年2 月于本院接受治療的70 例重度子癇前期患者作為研究對象，以隨機數(shù)字表法分為對照組和觀察組，每組35例。對照組年齡23～36歲，平均（28.67±2.61）歲；孕齡25～34周，平均（30.51±1.10）周；初產(chǎn)婦20例，經(jīng)產(chǎn)婦15 例。觀察組年齡23～36 歲，平均（28.73±2.54）歲；孕齡25～34周，平均（30.64±1.15）周；初產(chǎn)婦22 例，經(jīng)產(chǎn)婦13 例。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準。納入標準：患者均符合《婦產(chǎn)科學》[3]中重度子癇前期的診斷標準；患者或家屬均同意加入研究，并簽署知情同意書。排除標準：對本研究治療藥物過敏者；合并肝腎功能不全者；伴顱內(nèi)高壓癥狀者；合并腦外傷、腫瘤者。

1.2 方法 對照組應(yīng)用硫酸鎂（河北天成藥業(yè)股份有限公司，國藥準字H20033861，規(guī)格：10 ml∶25 g）治療，于5 g硫酸鎂注射液中加入20 ml 5%葡萄糖溶液，用靜脈泵進行靜脈滴注，滴注時間控制在30 min內(nèi)；再加入15 g 硫酸鎂注射液于200 ml 5%葡萄糖溶液中，用靜脈泵進行靜脈滴注，滴速為30滴/min，持續(xù)用藥至分娩前1 d。

觀察組在對照組基礎(chǔ)上應(yīng)用5000 IU低分子肝素鈣（深圳賽保爾生物藥業(yè)有限公司，國藥準字H20060191，規(guī)格：0.5 ml∶5000 AXa單位）皮下注射治療，每天1次；術(shù)前24 h，羊膜穿刺、擇期行剖宮產(chǎn)患者停止使用低分子肝素鈣治療。

1.3 觀察指標 ①凝血功能：采集兩組患者靜脈血5 ml，經(jīng)抗凝處理后，采用離心機（無錫市分析儀器有限公司，RJ-TGL-20B臺式高速離心機）以3000 r/min離心15 min，取血清，采用全自動凝血分析儀（南京瑞麥科技開發(fā)有限公司，AYW9000 型）檢測凝血酶原時間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血酶活酶時間（activated partial thromboplastin time，ATPP）、血漿纖維蛋白原（plasma fibrinogen，F(xiàn)BG）、D-二聚體（D-dimer，D-D）；②細胞凋亡：取患者4 μm病理組織切片，常規(guī)脫蠟水化后進行樣品裂解，離心收集細胞后，采用比色法檢測半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific protease，caspase）-3、caspase-8水平，采用上海前塵生物科技有限公司提供的caspase-3活性檢測試劑盒與caspase-8試劑盒。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以例數(shù)表示，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后凝血功能指標比較 治療前，兩組PT、ATP、FBG、D-D水平比較差異無統(tǒng)計學意義；治療后，兩組PT、ATPP均長于治療前，F(xiàn)BG、D-D水平均低于治療前，且觀察組PT、ATPP 均長于對照組，F(xiàn)BG、D-D水平均低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組治療前后凝血功能指標比較（±s）

表1 兩組治療前后凝血功能指標比較（±s）

注：PT，凝血酶原時間；ATPP，活化部分凝血酶活酶時間；FBG，血漿纖維蛋白原；D-D ，D-二聚體；t1/P1，組間治療前比較；t2/P2，組間治療后比較

組別對照組觀察組例數(shù)3535時間治療前治療后t值P值治療前治療后t值P值t1值P1值t2值P2值PT（s）9.25±1.3411.68±1.502.9940.0139.32±1.1514.08±1.466.7660.0040.0880.7232.6640.015 APTT（s）31.54±1.5033.67±1.692.3430.01831.10±1.2437.10±1.657.8760.0080.4920.5123.3780.011 FBG（g/L）5.94±1.264.06±0.202.5500.0205.83±1.252.09±0.595.0850.0090.1450.62313.7020.002 D-D（μg/L）230.58±10.51152.85±10.2312.3120.003230.54±10.46105.24±10.1419.9460.0010.0060.8657.7400.008

2.2 兩組治療后細胞凋亡分子表達量比較 觀察組caspase-3、caspase-8 蛋白表達量均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組治療后細胞凋亡分子表達量比較（±s，pg/mg）

表2 兩組治療后細胞凋亡分子表達量比較（±s，pg/mg）

注：caspase，半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶

組別對照組觀察組t值P值例數(shù)3535 caspase-3221.51±35.9593.67±13.506.0570.005 caspase-8329.12±42.08146.21±18.627.3930.003

3 討論

重度子癇前期是嚴重妊娠期高血壓疾病，具有病情危急、病情進展迅速等特點，其發(fā)病機制目前尚未明確。相關(guān)研究報道，重度子癇前期孕婦的血管內(nèi)皮細胞受損，且胎盤灌注減少，其組織器官會受到不同程度的影響[4]。孕婦機體滋養(yǎng)細胞受侵襲后，胎盤血管無法重塑，若此時孕婦未得到相應(yīng)處理，胎盤灌注會持續(xù)減少，增加氧化應(yīng)激損傷程度；與此同時，毒性因子、脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物在氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響下會大量釋放，為收縮血管物質(zhì)的產(chǎn)生創(chuàng)造有利條件，促使血管痙攣與胎盤灌注相互作用，加重患者病情[5]。此時，患者不僅收縮壓≥160 mmHg或舒張壓≥110 mmHg，并伴視物模糊、持續(xù)性頭痛等癥狀，也會影響胎兒的生長發(fā)育。因此，采取合理有效的藥物治療重度子癇前期患者是保障順利分娩的關(guān)鍵。

硫酸鎂、低分子肝素鈣是目前治療重度子癇前期患者的常用藥物。硫酸鎂有抗痙攣、鎮(zhèn)靜與降低顱內(nèi)壓等作用，通過肌肉注射給藥后能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，可有效預(yù)防、控制子癇；低分子肝素鈣是一種防治深部靜脈血栓形成的抗凝血酶Ⅲ依賴性藥物，具有顯著的抗Xa因子活性，既能抑制體內(nèi)動脈血栓的形成，還具有理想的保胎作用[6]。有研究[7]認為，重度子癇前期發(fā)生過程中，患者血管內(nèi)皮受損會直接對血管完整性產(chǎn)生破壞，進而激活凝血系統(tǒng)，使凝血功能處于異常狀態(tài)。凝血功能指標中，APTT與PT可直接反映機體凝血狀態(tài)，若兩項指標水平下降，說明機體處于高凝狀態(tài)，且血栓的發(fā)生率較高；FBG、D-D是反映纖溶活性的重要纖溶指標，F(xiàn)BG是血漿內(nèi)蛋白質(zhì)之一，在凝血酶的影響下，F(xiàn)BG會轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，可提升全血黏度；D-D是體內(nèi)特殊的纖維蛋白降解產(chǎn)物，其水平升高，說明機體存在繼發(fā)纖維蛋白溶解亢進，故被臨床作為機體高凝狀態(tài)的標志物[8]。本研究結(jié)果顯示，治療后，兩組PT、ATPP均長于治療前，F(xiàn)BG、D-D水平均低于治療前，且觀察組PT、ATPP均長于對照組，F(xiàn)BG、D-D水平均低于對照組（P＜0.05），與劉艷[9]研究結(jié)果基本一致。提示低分子肝素鈣聯(lián)合硫酸鎂治療重度子癇前期患者，對改善機體凝血功能具有積極作用。分析原因為，硫酸鎂具有拮抗鈣離子血管收縮的特性，鎂離子能誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞中前列環(huán)素的形成，而低分子肝素鈣可增加纖溶活性，且具有半衰期長、促纖凝溶等特點，人體血管內(nèi)皮細胞在其引導(dǎo)下會促進纖維蛋白溶解酶原激活劑的釋放，使球蛋白溶解時間顯著縮短，進而顯著改善患者的凝血功能[10]。

研究[11]認為，細胞凋亡是一種被動過程，主要指細胞為穩(wěn)定內(nèi)部環(huán)境，在基因調(diào)控下自主性死亡。本研究結(jié)果顯示，觀察組caspase-3與caspase-8蛋白表達量均低于對照組（P＜0.05）。提示低分子肝素鈣與硫酸鎂聯(lián)合治療重度子癇前期患者，可對細胞凋亡進行抑制。分析原因為，caspase家族對細胞凋亡具有調(diào)控作用，在細胞凋亡過程中，caspase 的蛋白表達量會隨之升高，且細胞內(nèi)X染色體連鎖的凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）、Survivin 蛋白可對caspase 活性發(fā)揮拮抗作用，從而抑制細胞凋亡[12]。同時，硫酸鎂中含有的鎂離子具有抑制中樞神經(jīng)調(diào)控機體活動的作用，且釋放乙酰膽堿于運動神經(jīng)中，可阻斷神經(jīng)肌肉的傳導(dǎo)，有效降低血壓水平[13]。而低分子肝素鈣可增強滋養(yǎng)細胞的生物學功能，減輕胎盤組織氧化應(yīng)激損傷，可抑制滋養(yǎng)細胞凋亡。低分子肝素鈣與硫酸鎂聯(lián)合應(yīng)用不僅能增強胎盤滋養(yǎng)細胞抗侵襲能力，且有利于胎盤血管重塑，降低細胞因子對細胞的侵襲能力[14-15]。

綜上所述，應(yīng)用低分子肝素鈣聯(lián)合硫酸鎂治療重度子癇前期患者，有利于抑制細胞凋亡，并改善患者凝血狀態(tài)。