外周血微小核糖核酸-21、同型半胱氨酸水平變化與急性心肌梗死患者Gensini積分的關聯性及臨床意義

張桂花

河南省項城市第一人民醫院檢驗科 466200

急性心肌梗死(AMI)是臨床常見心腦血管疾病，在我國發生率、殘死率均較高，具有發病急驟、進展迅速的特點，會嚴重影響患者生活質量[1]。臨床多采用經皮冠狀動脈介入術(PCI術)及溶栓治療，但術后心血管不良事件(MACE)發生率較高，預后效果較差，是心血管疾病的重要致死原因[2]。因此，快速準確評估病情程度及預后效果是挽救生命、降低病死率的關鍵。近年來，生化指標檢測在多種心血管疾病中應用廣泛，其中微小核糖核酸-21(miR-21)屬于小分子非編碼RNA，在血液循環中穩定存在，其在心肌細胞中表達豐富，與心肌損傷、再灌注損傷等密切相關[3]。同型半胱氨酸(Hcy)屬于血管內皮損傷標志物，其水平升高會增加氧化應激狀態，并促進血小板聚集，導致動脈粥樣硬化斑塊的形成，是多種心血管疾病的危險因素[4]。本文選取我院AMI患者136例，旨在探討外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關聯性及臨床意義。現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 經我院醫學倫理委員會批準，選取2019年6月—2020年6月我院AMI患者136例。患者均伴有持久性、突發性、劇烈性心前區、胸骨后壓榨型疼痛；均發生室性心律失常、房室傳導阻滯；均經冠狀動脈造影檢查≥1支冠脈閉塞；心肌損傷標志物水平升高；均經超聲心動圖、心電圖等輔助檢查確診為AMI；患者或家屬均簽署知情同意書。排除其他心臟疾病，如原發性肺動脈高壓、擴張型心肌病、肥厚性心肌病、原發性心臟瓣膜病；入院前進行溶栓、抗凝治療或既往接受過PCI術；合并血液系統、免疫系統疾病、惡性腫瘤、急慢性感染疾病；合并肝、腎、肺等重要臟器功能障礙；伴有腦血管疾病；合并甲狀腺功能亢進或嚴重結締組織疾病。

1.2 方法 (1)外周血miR-21、Hcy水平測定：所有患者均于術前、術后3d采集外周血5ml，置于枸櫞酸鈉抗凝管中，以3 000r/min的速度離心10min，分離血清與血漿，均置于-80℃下保存待測，miR-21檢測取400μl血漿，采用RNA提取液提取總miRNA，并逆轉錄為cDNA，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)擴增，然后用2-ΔΔCt方法計算miR-21相對表達量；Hcy檢測取血清1ml，采用比色法測定，試劑盒購自山東博邁達生物科技有限公司[批準文號：魯食藥監械(準)字2012第2400312號]。(2)術前Gensini積分評估：給予所有患者冠狀動脈造影術，評估冠脈狹窄程度，①基本評分：總分1～32分，分數越高，狹窄程度越嚴重，其中≤25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計4分，76%～90%計8分，91%～99%計16分，100%計32分。②評分系數：根據狹窄部位不同乘以不同系數(0.5～5)。Gensini評分=基本評分×評分系數。其中總分≤24分為輕度狹窄，25～49分為中度狹窄，≥50分為重度狹窄。(3)預后評估：所有患者均行經皮冠狀動脈介入術(PCI術)，并給予阿司匹林+氯吡格雷雙抗治療；根據術后6個月內是否發生MACE(如惡性心律失常、復發性心絞痛再入院、心力衰竭、心源性死亡)分為預后不良組(n=27)與預后良好組(n=109)，統計兩組一般資料，包括年齡、性別、合并癥、體質量指數(BMI)、Killip分級、心率(HR)、收縮壓(SBP)、病變支數、心肌損傷指標[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnI)]。

1.3 觀察指標 (1)比較兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分。(2)采用Pearson分析術前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關聯性。(3)采用Logistic分析AMI患者預后不良的影響因素。

2 結果

2.1 兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分 兩組年齡、性別、合并癥、BMI、HR、SBP比較，差異無統計學意義(P>0.05)；不同預后AMI患者Killip分級、病變支數、cTnI、CK-MB、miR-21相對表達量、Hcy、Gensini積分比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini積分比較

2.2 術前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分的關聯性 經Pearson相關性分析，AMI患者術前外周血miR-21、Hcy水平與Gensini積分呈正相關(r1=0.621，P1=0.035；r2=0.547，P2=0.048)。

2.3 AMI患者預后不良影響因素 經Logistic回歸分析顯示，Killip分級、病變支數、術后3d cTnI、CK-MB、miR-21相對表達量、Hcy均為AMI患者預后不良的重要影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 AMI患者預后不良影響因素

3 討論

AMI發病機制為冠狀動脈阻塞，導致心肌持續性缺血缺氧，引發心肌損傷壞死，且預后效果較差[5]。臨床應積極采取措施準確評估病情及預后，為治療方案的制定及調整提供指導意見。

近年來，隨著臨床檢驗技術的進步發展，基因分子、生化標志物的異常變化均能準確反映AMI病情，為臨床診斷治療提供新方向。心血管疾病中微小RNA研究普遍，在心肌細胞中表達明確，與再灌注損傷、心律失常、心肌肥厚等多種心臟疾病密切相關[6]。基于此，本文中對AMI患者miR-21水平進行檢測，結果顯示預后不良外周血miR-21相對表達量明顯更高，且與Gensini積分相關，是發生MACE的重要影響因素。分析其原因為，miR-21屬于跨膜蛋白基因，在進化上高度保守，參與心房顫動與纖維化的發生發展進程，機體發生AMI后，miR-21會富集于成纖維細胞，促進心血管系統的纖維化及AMI的進展[7]。在AMI早期，miR-21表達豐富可能通過促進炎癥反應參與心肌損傷，與冠狀動脈狹窄程度及Gensini積分密切相關[8]；而經PCI術治療后，miR-21水平會有所降低，狹窄程度減小，但對于預后不良患者，miR-21仍參與冠狀動脈粥樣硬化進程，且會影響其穩定性，增加MACE發生風險。

另外，相關研究指出，Hcy水平與AMI患者心室重構嚴重程度密切相關，可輔助臨床預測預后[9]。據此，本研究對AMI患者Hcy因子進行檢測，不同預后Hcy水平具有一定差異，且與MACE的發生密切相關。其原因可能為以下幾點：(1)Hcy水平升高會引起自由基的產生及炎癥因子的釋放，對心肌細胞具有一定損傷，導致心肌重塑，加速AMI的病情進展[10]；(2)Hcy會促進血管平滑肌細胞增殖，抑制血管內皮細胞分泌抗炎因子，并激活凝血因子Ⅳ的活性，促進血小板聚集，參與動脈粥樣硬化發生發展；(3)Hcy水平升高會降低阿司匹林抗血小板聚集作用，增加再次血運重建風險。因此，Hcy可評估AMI患者預后的重要危險因素，具有一定檢測價值。

綜上所述，AMI患者外周血miR-21、Hcy水平異常升高，且與Gensini積分、預后效果密切相關，具有較高臨床檢測價值。