血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)在發(fā)熱疾病診斷中應(yīng)用分析

胡昊

北京市順義區(qū)醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 101300

發(fā)熱作為臨床門(mén)診急診中常見(jiàn)病癥， 患者發(fā)病機(jī)制復(fù)雜， 自身免疫病、 腫瘤、 感染、 結(jié)締組織病（connective tissue disease,CTD）等，均可能是導(dǎo)致其體溫異常上升的影響因素[1-2]。因大部分患者就診時(shí)，病因都難以通過(guò)基礎(chǔ)檢查和病史詢問(wèn)來(lái)進(jìn)行確認(rèn)，對(duì)其病癥早期確診和盡早開(kāi)展對(duì)癥治療易造成負(fù)面影響。 因此，如何盡早確診患者病發(fā)機(jī)制，明確主要病因，是當(dāng)前臨床亟待解決的醫(yī)學(xué)問(wèn)題之一[3]。 血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)作為血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要步驟， 是以異常細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)來(lái)優(yōu)化的新型檢測(cè)技術(shù)，通過(guò)檢驗(yàn)受檢者紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板等指標(biāo)來(lái)反映其造血功能[4-5]。基于此，臨床主張根據(jù)健康受檢者的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)指標(biāo)， 對(duì)比患者發(fā)熱后血液內(nèi)血細(xì)胞質(zhì)量與血細(xì)胞數(shù)量，可見(jiàn)兩者存在明顯差異，借助指標(biāo)差異來(lái)診斷病癥的應(yīng)用價(jià)值已被臨床大量報(bào)道所證實(shí)[6]。 該次研究將選取2019 年3 月—2021 年3 月該院收治的210 例發(fā)熱患者為研究對(duì)象， 針對(duì)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)在病癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值展開(kāi)進(jìn)一步分析，同時(shí)選擇210 名健康受檢者，分析檢測(cè)技術(shù)在發(fā)熱疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的210 例發(fā)熱患者為觀察組，同期選擇210 名健康受檢者為對(duì)照組。 觀察組中男女比例為125∶85；年齡24～70 歲，平均（45.88±4.67）歲；體質(zhì)指數(shù)（BMI）18～25 kg/m2，平均（22.03±1.15）kg/m2。對(duì)照組中男女比例為130∶80； 年齡22～69 歲， 平均（46.11±4.15） 歲；BMI：18～26 kg/m2， 平均 （22.18±1.23）kg/m2。兩組研究對(duì)象一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 觀察組患者體溫均超過(guò)39℃，檢測(cè)前6 個(gè)月內(nèi)未服用對(duì)機(jī)體血細(xì)胞功能造成影響的藥物，均無(wú)凝血功能異常。排除合并表達(dá)障礙或精神疾病、腫瘤、凝血功能障礙、顱內(nèi)高壓、呼吸功能衰竭、大咯血、確診新型冠狀病毒肺炎等疾病患者。對(duì)照組所選受檢者均無(wú)凝血功能異常、血液疾病、體溫正常、近期未服用影響血三系、凝血功能的藥物，身體健康。研究對(duì)象均對(duì)該次研究表示知情同意。 該次研究均經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。

1.2 方法

所有受檢者均予進(jìn)行血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)， 具體步驟為： 患者上午8:00-10:00 抽取2 mL 外周靜脈血，經(jīng)乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑完成真空采血，充分混勻檢測(cè)樣本后，參照血常規(guī)檢查方法，利用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀完成相關(guān)檢查。 然后經(jīng)顯微鏡下觀察檢測(cè)樣本的細(xì)胞計(jì)數(shù)，然后制備血涂片，等待自然干燥后，利用瑞氏染劑完成染色，對(duì)所有細(xì)胞形態(tài)變化進(jìn)行仔細(xì)觀察，統(tǒng)計(jì)白細(xì)胞形態(tài)指標(biāo)的陽(yáng)性反應(yīng)，記錄陽(yáng)性率。 所有受檢者均在1 h 內(nèi)完成所有檢測(cè)，期間需嚴(yán)格規(guī)范臨床檢驗(yàn)操作步驟， 血涂片完成制備后，經(jīng)顯微鏡觀察完成分類(lèi)計(jì)數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄兩組受檢者的紅細(xì)胞指標(biāo)，包括平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC）、紅細(xì)胞壓積（hematorit,HCT）、平均紅細(xì)胞體積（mean corpuscular volume,MCV）、紅細(xì)胞體積分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（standard deviation of red blood cell volume distrbution width,RDW-SD）。

血細(xì)胞形態(tài)異常陽(yáng)性檢出情況：記錄兩組受檢者異型淋巴細(xì)胞、大細(xì)胞貧血、異常細(xì)胞、白細(xì)胞變小、小細(xì)胞貧血的檢查情況， 陽(yáng)性檢出率=檢出例數(shù)/總例數(shù)×100.00%。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布，表達(dá)方式為（±s），組間差異比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料的表達(dá)方式為頻數(shù)和百分比(%)，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者紅細(xì)胞指標(biāo)比較

兩組受檢者M(jìn)CH 比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.441，P＞0.05）； 觀察組MCHC、HCT、MCV、RDW-SD 水平顯著高于對(duì)照組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組受檢者紅細(xì)胞指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組受檢者紅細(xì)胞指標(biāo)比較（±s）

?

2.2 兩組受檢者血細(xì)胞形態(tài)異常陽(yáng)性檢出率比較

觀察組異型淋巴細(xì)胞、大細(xì)胞貧血、異常細(xì)胞、白細(xì)胞變小、 小細(xì)胞貧血等血細(xì)胞形態(tài)異常總陽(yáng)性檢出率為64.29%，顯著高于對(duì)照組的9.05%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見(jiàn)表2。

表2 兩組受檢者血細(xì)胞形態(tài)異常陽(yáng)性檢出率比較

3 討論

發(fā)熱作為臨床常見(jiàn)病，病理機(jī)制相對(duì)復(fù)雜，臨床表明需盡早診斷病因后采取有效對(duì)癥治療， 爭(zhēng)取最佳治療時(shí)機(jī)來(lái)避免病情加劇，及時(shí)控制病癥發(fā)展，能有效降低患者疾病并發(fā)癥發(fā)生概率， 是改善其預(yù)后的關(guān)鍵前提[7-8]。隨著抗生素在臨床的廣泛應(yīng)用，抗生素濫用和不合理用藥問(wèn)題在各科室中常有出現(xiàn)，致使部分發(fā)熱患者血液細(xì)胞沒(méi)有出現(xiàn)病理性變化，增加其病癥誤診風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)還會(huì)忽略掉血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的重要性和必要性， 均是臨床在檢測(cè)發(fā)熱患者時(shí)需要強(qiáng)調(diào)并且重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題之一[9]。血細(xì)胞是指人體血液中存在的細(xì)胞， 會(huì)隨著人體的病理反應(yīng)出現(xiàn)一系列變化，可見(jiàn)兩者存在一定關(guān)聯(lián)，并有報(bào)道指出， 人體的造血功能紊亂情況可通過(guò)血細(xì)胞質(zhì)變和量表程度來(lái)得到準(zhǔn)確反應(yīng)。 發(fā)熱作為臨床患者病癥常見(jiàn)表現(xiàn)， 有報(bào)道指出發(fā)熱患者的血細(xì)胞計(jì)數(shù)和形態(tài)都會(huì)受其病情進(jìn)展影響而出現(xiàn)明顯變化， 因此檢查患者血細(xì)胞來(lái)診斷病癥具有較高可行性[10-11]。

目前，血細(xì)胞形態(tài)變化主要?jiǎng)澐譃? 種類(lèi)型，分別是白細(xì)胞變化、異型淋巴細(xì)胞、小細(xì)胞性貧血、大細(xì)胞性貧血和異常細(xì)胞[12]。 異型淋巴細(xì)胞變化在發(fā)熱患者血細(xì)胞形態(tài)中出現(xiàn)率最高，究其主要原因，病毒感染是主要致病因素，常見(jiàn)病癥類(lèi)型可見(jiàn)麻疹、流行性出血熱、傳染性肝炎、流行性感冒、百日咳樣綜合征、傳染性單核細(xì)胞增多癥等，均可導(dǎo)致患者該細(xì)胞出現(xiàn)變異[13-14]。白細(xì)胞形態(tài)變異包括淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞毒性出現(xiàn)變化，常見(jiàn)病癥類(lèi)型可見(jiàn)肺炎、呼吸道感染、支氣管感染等。 異常細(xì)胞可見(jiàn)空泡變性、核變性、 中毒顆粒和中性粒細(xì)胞大小不一等形態(tài)變化， 常見(jiàn)病癥類(lèi)型可見(jiàn)寄生蟲(chóng)感染和并發(fā)嗜酸粒細(xì)胞增多癥。紅細(xì)胞改變中，特別是觀察細(xì)胞體積變化可反應(yīng)患者是否存在貧血癥狀及明確貧血類(lèi)型，如大細(xì)胞變化表示患者屬于巨幼貧血， 小細(xì)胞變化則屬于缺血性貧血[15]。 鑒別細(xì)胞形態(tài)時(shí)，如果患者血液中占據(jù)大量淋巴細(xì)胞， 可預(yù)警患者機(jī)體是否感染病毒； 如果血細(xì)胞形態(tài)上可見(jiàn)異型淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著增加，提示患者可能引發(fā)傳染性單核細(xì)胞增多癥；如果患者異型淋巴細(xì)胞在血細(xì)胞中占據(jù)比例不超過(guò)10%，提醒其可能感染病毒。 此外，當(dāng)患者機(jī)體誘發(fā)化膿性感染時(shí)， 其中性粒細(xì)胞中毒變異與核左移概率較高， 且通常合并造血物質(zhì)匱乏或運(yùn)血功能減退癥狀[16]。

該次研究針對(duì)發(fā)熱患者血細(xì)胞形態(tài)學(xué)指標(biāo)與健康受檢者進(jìn)行對(duì)比， 結(jié)果顯示觀察組血細(xì)胞形態(tài)異常情況發(fā)生率及MCHC、HCT、MCV、RDW-SD 水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。 在陽(yáng)小春[17]的研究中，50例發(fā)熱患者血細(xì)胞形態(tài)總異常率為62.00%，包括異常細(xì)胞檢出率12.00%、 大細(xì)胞貧血檢出率8.00%、白細(xì)胞變小檢出率10.00%、異型淋巴細(xì)胞檢出率為26.00%、 小細(xì)胞貧血檢出率6.00%，MCHC、HCT、MCV 和RDW-SD 等相關(guān)數(shù)據(jù)大致相符， 證實(shí)研究具有較高可信度。 此外，根據(jù)發(fā)熱患者M(jìn)CHC、HCT、MCV、RDW-SD 等紅細(xì)胞形態(tài)參數(shù)與健康受檢者的對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說(shuō)明血紅細(xì)胞形態(tài)變化與疾病存在明顯關(guān)聯(lián)。 有研究指出患者機(jī)體出現(xiàn)發(fā)熱時(shí)，會(huì)過(guò)度消耗患者體內(nèi)蛋白質(zhì)和鐵元素，降低其食欲， 一定程度上會(huì)對(duì)其紅細(xì)胞形態(tài)造成干擾[18]。 與此同時(shí)，患者血糖持續(xù)上升所產(chǎn)生的的利尿反應(yīng)，頻繁大小便會(huì)加速患者自身水分流失速度，最直觀表現(xiàn)可見(jiàn)患者HCT 呈現(xiàn)持續(xù)上升趨勢(shì)，且RDW-SD 也會(huì)相繼出現(xiàn)變化，進(jìn)而改變患者紅細(xì)胞形態(tài)大小和產(chǎn)生數(shù)量變化。基于此，臨床在對(duì)發(fā)熱患者進(jìn)行血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)， 以其紅細(xì)胞形態(tài)參數(shù)變化和血細(xì)胞形態(tài)異常情況為標(biāo)準(zhǔn)， 有利于加快患者病情確診進(jìn)度，為后續(xù)診療工作提供科學(xué)依據(jù)[19]。

紅細(xì)胞形態(tài)作為血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)中常用指標(biāo)，研究所用檢測(cè)方法除去所用血細(xì)胞分析儀，通常還聯(lián)合外周血涂片進(jìn)行觀察， 能有效避免其檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，進(jìn)而提高檢查結(jié)果的精確性。但是紅細(xì)胞排列與形態(tài)會(huì)受圖片制作技術(shù)、 厚薄程度及部位等客觀因素影響，因此，臨床在進(jìn)行鏡檢實(shí)際操作時(shí)，需高度重視此類(lèi)問(wèn)題，并注意儀器因素可能造成的假陽(yáng)性、假陰性誤診風(fēng)險(xiǎn)。 究其原因，患者檢測(cè)前的細(xì)胞形態(tài)和參數(shù)可能會(huì)受發(fā)熱病情和院前所用治療藥物影響， 出現(xiàn)病理性以外的白細(xì)胞增高假象，如儀器分群、分類(lèi)偏差、血小板（集中成堆）、紅細(xì)胞（抗溶性）等，不僅增加了臨床客觀評(píng)價(jià)血細(xì)胞形態(tài)變化的檢驗(yàn)難度， 還會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果與患者實(shí)際病癥不符， 檢驗(yàn)誤差問(wèn)題會(huì)影響最終診斷結(jié)果的精準(zhǔn)性[20]。 同時(shí)僅僅依據(jù)血細(xì)胞分析儀難以準(zhǔn)確鑒別患者淋巴細(xì)胞形態(tài)、粒細(xì)胞形態(tài)，以及對(duì)粒細(xì)胞的變性、空泡、中毒顆粒等情況，分析儀也無(wú)法提供客觀影像來(lái)便于臨床確診。因此，現(xiàn)階段對(duì)于發(fā)熱患者檢查，仍然是基于血細(xì)胞分析儀應(yīng)用基礎(chǔ)上，聯(lián)合顯微鏡檢查來(lái)識(shí)別其血細(xì)胞的病理性異常形態(tài)， 并強(qiáng)調(diào)需落實(shí)患者檢驗(yàn)前既往病史的咨詢工作， 了解其院前對(duì)病癥所采取的處理方式， 檢測(cè)時(shí)有預(yù)見(jiàn)性地予以對(duì)應(yīng)防控手段，將假陽(yáng)性、假陰性誤診風(fēng)險(xiǎn)控制最低化，提高診斷結(jié)果精準(zhǔn)性[21]。

此外， 研究認(rèn)為臨床還需充分提高醫(yī)護(hù)人員關(guān)于血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的操作水平， 確保后續(xù)診斷結(jié)果能精準(zhǔn)反映受檢者機(jī)體病理變化， 具體注意事項(xiàng)如下：①規(guī)范完成血液樣本采集：采集受檢者的血液樣本前，醫(yī)護(hù)人員需注意做好消毒工作，避免誘發(fā)感染，且操作手法需嚴(yán)格遵循相關(guān)規(guī)范要求，防止樣本污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果，提高誤診風(fēng)險(xiǎn)。②落實(shí)細(xì)胞樣本著色工作：檢測(cè)人員在進(jìn)行細(xì)胞樣本著色時(shí)，應(yīng)對(duì)染色液滴入量進(jìn)行嚴(yán)格控制。 例如研究中所用瑞氏染色劑， 檢測(cè)人員進(jìn)行到樣本中添加染色液一步驟時(shí)，需注意染色液能夠完全覆蓋住血膜，靜置后再充分中和緩沖液、染色液，最后再用蒸餾水擦拭掉多余染料。此外，顯微鏡觀察前要注意觀察推片是否完全干燥，同時(shí)需參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》來(lái)完成血液推片制定[22]。 ③加強(qiáng)受檢者健康教育：受檢者行血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)前， 需叮囑其檢測(cè)前1 d 禁止煙酒和保持飲食清淡，避免油膩、高蛋白食物影響血液成分含量比例。 檢測(cè)前需保持10 h 空腹?fàn)顟B(tài)，能保證血液物質(zhì)含量穩(wěn)定，可精準(zhǔn)反映其生理情況。結(jié)束采血后，叮囑受檢者對(duì)穿刺點(diǎn)用棉簽進(jìn)行按壓，若局部處有瘀血現(xiàn)象， 可在第2 天進(jìn)行局部熱敷來(lái)消散瘀血。若受檢者自述抽血后有頭暈眼花癥狀，醫(yī)護(hù)人員可用提前準(zhǔn)備的糖水予以患者少量服用， 緩解癥狀后再進(jìn)行其他檢查。 醫(yī)護(hù)人員強(qiáng)化個(gè)人操作技能和臨床經(jīng)驗(yàn)，可有效控制客觀因素造成的誤診風(fēng)險(xiǎn)，臨床需加以重視。

綜上所述， 發(fā)熱患者應(yīng)用血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)診斷病情，應(yīng)用價(jià)值顯著，可根據(jù)其紅細(xì)胞形態(tài)變化來(lái)明確病因，為后續(xù)有效治療提供科學(xué)依據(jù)。