TPPA法與TRUST法檢測對性病梅毒患者的診斷價值探討

歐煉功

藤縣皮膚病防治院 廣西 梧州 543300

梅毒屬于臨床上一種常見性病，主要指機體感染蒼白密螺旋體蒼白亞種（又名梅毒螺旋體）后所引起的性傳播疾病；本病具有極為復雜的臨床表現(xiàn)，可導致機體組織破壞、功能失常，病情持續(xù)進展可損害人體多系統(tǒng)、多器官，嚴重甚至危及生命[1]。梅毒傳播途徑包括性傳播、母嬰傳播及血液傳播，其中最主要傳染途徑為性傳播，約占90%，且感染時間越短、傳染幾率越大[2]。臨床目前針對梅毒螺旋體常規(guī)實驗室檢測方法主要有甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）及酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）等，各有優(yōu)勢與弊端[3]。故本研究對我院梅毒患者分別開展TRUST與TPPA檢測，分析其應用價值，內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年1月～2020年12月我院最終臨床確診的117例梅毒患者臨床資料，所有人資料均未丟失且此項研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。梅毒患者男女比例為57：60，年齡范圍在0～18歲有2例，18～60歲99例，60歲以上16例。

1.2 方法 所有入組對象均采集晨起空腹靜脈血5mL分為2份作為后續(xù)檢測樣本、及時送檢，使用低速自動平衡離心機（型號：800型，臺式，上海醫(yī)療器械有限公司）實施離心操作，獲取血清。TRUST法測定：取血清樣本（50μL）置于加樣卡片圈內(nèi)，再均勻涂抹使其分布整個卡片圈，將抗原液輕輕搖勻，使用試劑盒所自帶的針頭滴加1滴抗原液至卡片圈，再將卡片置于水平旋轉(zhuǎn)搖床上方，使用數(shù)顯梅毒旋轉(zhuǎn)儀搖勻（型號：WZR-H6000，蘇州愛林）進行8分鐘振蕩搖勻（調(diào)節(jié)速度：100轉(zhuǎn)/分）后立即于亮光下進行結(jié)果觀察。結(jié)果判定：TRUST法陽性特征為圓圈內(nèi)出現(xiàn)粉色或者紅色的絮狀物，若圓圈內(nèi)觀察到甲苯胺紅顆粒在中央處發(fā)生聚集或者呈均勻分布判定為陰性。TPPA法檢測：操作人員各項步驟嚴格依據(jù)試劑說明書開展，血清使用樣品稀釋液進行5倍、10倍、20倍、40倍的稀釋，再分別于稀釋20倍孔內(nèi)滴加未致敏明膠粒子、于稀釋40倍孔內(nèi)滴加致敏明膠粒子各一滴，肉眼評判檢測結(jié)果；細胞在反應孔凝集且呈現(xiàn)不規(guī)則沉積為陽性、細胞在反應孔中央沉積（光滑紐扣狀）為陰性。

2 結(jié)果

TPPA法2018～2020年梅毒陽性符合率及總符合率分別為100.00%、96.30%、97.50%、97.46%，均顯著高于TRUST法78.26%、79.63%、75.00%、77.78%（P＜0.05），如表1所示：

表1 不同年份兩種檢測方式的梅毒陽性符合率比較[n（%）]

3 討論

人體一旦感染梅毒，通常表現(xiàn)出較為典型的硬下疳特征，隨著病情進展，患者全身會出現(xiàn)梅毒疹，嚴重影響患者工作與日常生活；病情嚴重時會對患者骨關(guān)節(jié)、黏膜、心血管、淺表淋巴結(jié)及神經(jīng)等造成損害，進而引發(fā)顱內(nèi)壓增高、視網(wǎng)膜炎癥、癡呆等情況，危害其生命安全[4]。故及早明確診斷并開展針對性治療方案尤為必要。

TRUST法主要通過在抗原內(nèi)加入甲苯胺紅顆粒作為指示物，為檢測人員肉眼觀察提供一定便利。其主要優(yōu)勢為經(jīng)濟實惠、患者接受程度高等，且其檢測結(jié)果可隨患者病情發(fā)生變化而產(chǎn)生不同程度的反應，因此臨床通常借助這一檢測方法對患者臨床病情變化實施監(jiān)測[5]。但這種檢測方法屬于非梅毒螺旋體特異性抗體實驗，容易受到外界多種因素（如患者自身存在免疫性疾病、合并惡性腫瘤、前帶反應、吸毒等）干擾，導致最終檢測結(jié)果準確度偏低。因此當臨床TRUST法檢測結(jié)果顯示為陰性時，并不能排除存在一期或三期梅毒、神經(jīng)性梅毒及潛伏梅毒的可能性，臨床檢驗人員必須結(jié)合患者實際癥狀做出準確判斷。徐東江、王克迪、吳俊[6]等學者報道中認為，TPPA的檢出敏感性、特異性及準確度均高于TRUST，這與本研究中TPPA法2018～2020年梅毒陽性符合率及總符合率均顯著高于TRUST法（P＜0.05）的結(jié)果相似。TPPA法是近年來臨床普遍認可的準確性較高的梅毒檢測方式，其主要將已發(fā)生裂解的梅毒螺旋體包被于明膠顆粒上，再與患者血清標本中特異性抗體發(fā)生特異性結(jié)合，最終產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應[7]。人體感染梅毒后，其機體特異性抗體經(jīng)過規(guī)范治療后轉(zhuǎn)陰的可能較小，基本處于終身陽性狀態(tài)，故TPPA檢測具有高敏感度。

綜上所述，梅毒患者臨床診斷中合理應用TPPA法，其相比TRUST法具有更高的陽性符合率，診斷準確性良好；但該方法在實際操作過程中存在檢測時間長、操作繁雜、自動化水平低等問題，也值得檢驗人員注意。