IL-6/JAK2/STAT3對口腔鱗狀細胞癌生物學行為的影響

仝向娟，周曉，鐘慧，彭子文，單振鋒

(1.中南大學湘雅三醫院 口腔科,湖南 長沙 410013； 2.湖南省腫瘤醫院 中南大學湘雅醫學院附屬腫瘤醫院 頭頸外科,湖南 長沙 410013; 3.中南大學生命科學學院,湖南 長沙 410013)

口腔鱗狀細胞癌(簡稱口腔鱗癌)是一種不同程度的口腔鱗狀分化的上皮性侵襲性腫瘤，是頭頸腫瘤的主要形式之一[1]。有研究表明口腔鱗癌的發生發展與信號傳導異常密切相關[2-3]。近幾年，對于白細胞介素6抗體(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2抗體(JAK2)/信號傳導和轉錄激活因子3抗體(STAT3)信號激活促進口腔鱗癌發展潛在的分子機制的探討受到了極大關注[4-5]，但其對口腔鱗癌細胞具體作用機制仍然不明晰。本研究旨在通過慢病毒轉染的方式建立體外高效、穩定低表達IL-6口腔鱗癌細胞系體系，進而觀察口腔鱗癌細胞中IL-6的變化與JAK2和STAT3聯系，以及對口腔鱗癌細胞的惡性生物學行為的影響，為口腔鱗癌的發生機制提供相關分子學證據，也為下一步口腔鱗癌的臨床基因靶向干預提供重要參考。

1 資料和方法

1.1 主要儀器和試劑

PowerPac Basic垂直電泳儀(Bio-Rad,美國),180-100轉膜儀(Bio-Rad,美國),FQD-96A實時熒光定量PCR儀(杭州博日科技股份有限公司),KOD-Plus-Neo高保真PCR酶購自Toyobo公司，膠回收試劑盒購自Generay公司，BamHI、EcoRI限制性內切酶、dNTP mix、T4 DNA連接酶、RNase inhibitor購自Fermentas公司，IL-6、STAT3、磷酸化信號傳導和轉錄激活因子3抗體(p-STAT3),JAK2,磷酸化蛋白酪氨酸激酶2抗體(p-JAK),存活素抗體(Survivin),鋅指轉錄因子抗體(Snail),細胞周期蛋白B1抗體(Cyclin B1),金屬基質蛋白酶2(MMP2),鈣黏附蛋白E抗體(E-Cadherin)均購自美國CST公司，血管內皮生長因子A抗體(VEGFA)購自美國Abcam公司。……